葉華富 李勇

睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（OSAHS）是指夜晚7h睡眠中呼吸暫停和低通氣反復(fù)發(fā)作次數(shù)≥30次，或者睡眠呼吸暫停低通氣指數(shù)（AHI）≥5次/h，患者以呼吸暫停、堵塞、憋氣、血氧飽和度下降、打鼾、白天嗜睡等臨床癥狀為主，是一種免疫性、炎癥性疾病[1]。OSAHS發(fā)病率高、合并癥多，嚴重危害患者健康[2]。目前，OSAHS的發(fā)病機制并未明確。IL是白細胞產(chǎn)生的具有傳遞信息，激活、調(diào)節(jié)免疫細胞增殖和分化等功能的炎性因子[3]。研究發(fā)現(xiàn)，TNF-α、C反應(yīng)蛋白、IL-6等炎性因子在OSAHS患者的血清中呈現(xiàn)高表達[4-5]?；诖?，本研究通過分析OSAHS患者血清與外周血單個核細胞（PBMCs）培養(yǎng)上清液L-23、IL-17水平，探討IL-23與IL-17對OSAHS患者發(fā)病與預(yù)后的影響，現(xiàn)報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2015年1月至2017年1月本院耳鼻咽喉科收治的OSAHS患者與非OSAHS患者各98例，分別設(shè)為OSAHS組與對照組，排除合并慢性呼吸道疾病、心腦血管疾病、惡性腫瘤、甲狀腺功能亢進/減退者。OSAHS 組男 62 例，女 36 例；年齡 21～73（45.83±11.53）歲。對照組男 58 例，女 40 例；年齡 20～74（44.71±10.76）歲。OSAHS組與對照組性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計學意義（均P＞0.05）。

1.2 方法 兩組患者均于多導睡眠監(jiān)測完成后次日清晨抽取兩份空腹靜脈血。一份在4℃溫育箱內(nèi)靜置并以3 000r/min的速率離心10min，分離的血清置于-80℃的冰箱內(nèi)待測；另一份進行PBMCs分離和培養(yǎng)，具體如下：將靜脈血注入ACD血液抗凝管內(nèi)搖勻，按1∶1比例加入PBS稀釋搖勻，吸取6ml淋巴細胞分離液放入離心管內(nèi)，并將稀釋后的血液置入該離心管內(nèi)，在20℃的溫育箱內(nèi)以2 000r/min速率離心20min。離心后由上到下依次為紅細胞和粒細胞層、淋巴細胞分離液層、PBMCs層、血漿層。吸出PBMCs層置入新的離心管內(nèi)，離心管內(nèi)加入PBS并搖勻，在20℃的溫育箱內(nèi)以2 000r/min離心10min，并洗滌2次。加入重懸細胞后調(diào)節(jié)細胞密度為2×106個/ml，將細胞接種在培養(yǎng)板內(nèi)，用500ng/ml Ionomycin和50ng PMN進行刺激試驗，收集刺激后的細胞培養(yǎng)上清液并置于-20℃冰箱內(nèi)待測。采用ELISA法及相應(yīng)試劑檢測血清、PBMCs培養(yǎng)上清液的IL-23與IL-17水平。

1.3 觀察指標 觀察并比較OSAHS組與對照組血清IL-23、IL-17 水平，PBMCs培養(yǎng)上清液 IL-23、IL-17 水平；比較經(jīng)韓式懸雍垂鄂咽成形術(shù)治療后2年隨訪期內(nèi)OSAHS組死亡（19例，因OSAHS并發(fā)上氣道梗阻、心腦血管意外死亡）與存活（79例）患者血清IL-23、IL-17水平。

1.4 統(tǒng)計學處理 應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計軟件；計量資料以表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗；計數(shù)資料比較采用χ2檢驗；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血清IL-23、IL-17水平比較 見表1。

表1 兩組患者血清IL-23、IL-17水平比較（pg/ml）

由表1可見，OSAHS組患者血清IL-23、IL-17水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。

2.2 兩組患者PBMCs培養(yǎng)上清液IL-23、IL-17水平比較 見表2。

表2 兩組患者PBMCs培養(yǎng)上清液IL-23、IL-17水平比較（pg/ml）

由表2可見，OSAHS組患者PBMCs上清液IL-23、IL-17均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。

2.3 治療后2年內(nèi)OSAHS組死亡與存活患者血清IL-23、IL-17水平比較 見表3。

表3 治療后2年內(nèi)OSAHS組死亡與存活患者血清IL-23、IL-17 水平比較（pg/ml）

由表3可見，經(jīng)治療后隨訪2年內(nèi)，OSAHS組死亡患者血清IL-23、IL-17水平均高于存活患者，差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。

3 討論

OSAHS是臨床上常見的、多發(fā)的睡眠疾病，是由于睡眠過程中反復(fù)發(fā)生的上呼吸道崩塌所導致的上氣道部分氣流受限、完全堵塞等而引起的反復(fù)的高碳酸血癥和間歇性低氧血癥，進而可能會導致患者發(fā)生重疊綜合征、心腦血管疾病、內(nèi)分泌功能紊亂、血流動力學變化、神經(jīng)功能紊亂等變化[6-7]。間歇性的慢性反復(fù)低氧血癥作為OSAHS患者病理生理的中心問題，會導致炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)，在整個病變過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，且與患者的多器官功能損傷也存在密切關(guān)系[8]。OSAHS患者的上氣道炎癥會加重上氣道狹窄，延長睡眠呼吸暫停的時間，增多睡眠呼吸暫停的次數(shù)，且炎癥因子會對上氣道神經(jīng)功能和肌肉功能產(chǎn)生影響，兩者功能遭受影響后又會加重OSAHS患者的病情，加重炎癥發(fā)展，增多炎癥因子的釋放，對其表達產(chǎn)生抑制作用，形成惡性循環(huán)[9]。因此本研究分析OSAHS患者血IL-23與IL-17水平的變化及臨床意義，以期能為臨床治療提供參考。

輔助性T細胞17（Th17）是與Th1及Th2存在差別的效應(yīng)T細胞，能夠分化產(chǎn)生IL-17，并對炎癥反應(yīng)具有調(diào)節(jié)作用[10]。IL-17是一種重要的前炎性因子，具有較強的活化和招募中性粒細胞的功能，同時能夠刺激T細胞，使其活化，進而對樹突狀細胞的成熟產(chǎn)生促進作用，并介導釋放多種炎癥介質(zhì)，誘導機體產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，提高炎性因子在機體中的表達[11]。目前臨床對IL-17的研究主要集中在慢性阻塞性肺疾病、支氣管哮喘、肺炎等方面。已有研究指出，IL-17能夠激活NF-κB通路和有絲裂原活化蛋白激酶家族通路[12]。而由于OSAHS所導致的低氧會對炎癥反應(yīng)的啟動因子和關(guān)鍵因子NF-κB產(chǎn)生刺激，因而筆者推測IL-17在OSAHS疾病的進展過程中也發(fā)揮重要作用。IL-23主要是由活化的樹突狀細胞和巨噬細胞分泌的，具有維持Th17細胞活化的功能，可對Th17細胞的增殖產(chǎn)生刺激，幫助分泌IL-17，促進炎性因子分泌[13]。研究發(fā)現(xiàn)，小鼠缺失IL-23的抗原呈遞細胞刺激T細胞分泌IL-17前炎性因子的能力降低，得出IL-23可能對IL-17的表達有一定影響[14]。本研究結(jié)果顯示，OSAHS患者血清IL-23、IL-17水平均高于對照組，PBMCs上清液IL-23、IL-17水平亦均高于對照組；OSAHS患者經(jīng)治療后2年隨訪期內(nèi)死亡患者血清IL-23、IL-17水平均高于存活患者。這提示，IL-17在OSAHS的發(fā)病過程中也發(fā)揮重要作用，且由于IL-17與IL-23存在相同的變化趨勢，因而IL-23可能對IL-17的表達有一定影響。

綜上所述，IL-23、IL-17可能通過影響炎癥反應(yīng)參與OSAHS的發(fā)生、發(fā)展，高血清IL-23、IL-17水平患者預(yù)后較差。