藍(lán)國兵，何自福，于 琳，湯亞飛，李正剛，鄧銘光，佘小漫

（1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，廣東 廣州 510640；2.廣東省植物保護(hù)新技術(shù)重點實驗室，廣東 廣州 510640）

【研究意義】火龍果（Hylocereus undatus）為仙人掌科量天尺屬多年生攀緣性多肉質(zhì)植物，原產(chǎn)于巴西、墨西哥等中美洲地區(qū)［1］。我國臺灣于20世紀(jì)90年代初引進(jìn)試種成功后傳入大陸，目前在廣西、廣東、海南、福建、貴州、云南等地均有大面積種植［2-3］?；瘕埞a(chǎn)業(yè)已成為農(nóng)民脫貧致富的重要經(jīng)濟作物之一。【本研究切入點】隨著火龍果的大面積種植，火龍果種植區(qū)病害發(fā)生也日趨嚴(yán)重。火龍果生產(chǎn)上報道為害較大的病害有褐腐?。∟eoscytalidium dimidiatum）［4-5］、炭 疽 病（Collectotrichum gloeosporioides）［6］、軟腐?。‥nterobacter cloacae）［7］、病毒病（Cactus virus X）［8］等，其中由新暗色柱節(jié)孢菌（N.dimidiatum）侵染引起的火龍果褐腐病（又稱潰瘍?。菄?yán)重威脅火龍果產(chǎn)業(yè)發(fā)展的一種毀滅性真菌病害。該病害已在以色列、馬來西亞、美國等國家為害［9-11］，輕則造成果皮“麻點”降低商品價值，重則導(dǎo)致整條莖稈和果實腐爛死亡，所造成的平均產(chǎn)量損失一般在20%～30%，嚴(yán)重時達(dá)50%以上甚至毀園［12］。華南地區(qū)常年高溫高濕的氣候特點有利于火龍果褐腐病的暴發(fā)和流行，火龍果整個生長季均可受到該病原菌為害，廣東地區(qū)發(fā)病最嚴(yán)重是每年4—10月?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】目前，火龍果褐腐病的防治主要依賴化學(xué)農(nóng)藥，已報道具較好抑菌效果的有咪鮮胺、戊唑醇、吡唑醚菌酯、苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑、氟硅唑、多菌靈等藥劑［13-15］，但相關(guān)藥劑對火龍果褐腐病的田間防效試驗報道較少［12,16-17］。至2019年8月，在中國農(nóng)藥信息網(wǎng)（http: //www.chinapesticide.org.cn）上尚未查到已有登記防治火龍果病害的殺菌劑產(chǎn)品，有關(guān)有效藥劑對火龍果褐腐病菌持效期研究尚未見報道?！緮M解決的關(guān)鍵問題】為了篩選出防治效果突出的藥劑應(yīng)用于田間生產(chǎn)，本研究采用藥劑瓊脂擴散法，測定了16種殺菌劑產(chǎn)品對火龍果褐腐病菌的抑菌持效期，并對抑菌效果好或持效期長的殺菌劑劑產(chǎn)品開展田間藥效試驗，以期為火龍果褐腐病的防控提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試菌株：用于持效期測定的火龍果褐腐病菌株編號為DF-CH8，由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所分離、鑒定和保存。

供試殺菌劑：供試的16種殺菌劑均為市售產(chǎn)品，分別為50%咯菌腈可濕性粉劑（瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司）、250 g/L 丙環(huán)唑乳油（瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司）、40%丙硫菌唑懸浮劑（江門市大光明農(nóng)化新會有限公司配制）、430 g/L戊唑醇懸浮劑（拜耳股份公司）、400 g/L氟硅唑乳油（江門市大光明農(nóng)化新會有限公司）、500 g/L異菌脲懸浮劑（美國富美實公司）、450 g/L咪鮮胺水乳劑（美國富美實公司）、250 g/L苯醚甲環(huán)唑乳油（瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司）、40%腈菌唑可濕性粉劑（美國陶氏益農(nóng)公司）、50%多菌靈可濕性粉劑（四川國光股份有限公司）、40%噻菌靈可濕性粉劑（臺灣雋農(nóng)實業(yè)股份有限公司）、250 g/L嘧菌酯懸浮劑（先正達(dá)南通作物保護(hù)有限公司）、70%丙森鋅可濕性粉劑（拜耳股份公司）、2%春雷霉素水劑（日本北興化學(xué)工業(yè)株式會社、75%百菌清可濕性粉劑〔先正達(dá)（蘇州）作物保護(hù)有限公司〕、125 g/L氟環(huán)唑懸浮劑〔巴斯夫植物保護(hù)（江蘇）有限公司〕產(chǎn)品。

1.2 試驗方法

1.2.1 抑菌持效期測定 菌株活化與含菌培養(yǎng)基制備：將供試菌株于PDA平板上27 ℃活化培養(yǎng)5 d，然后用無菌水洗下孢子，配制成1×107個孢子/mL孢子懸浮液，用移液槍吸200 μL孢子懸浮液加入到溫度約40℃的PDA培養(yǎng)基中，搖勻后傾入滅菌培養(yǎng)皿（直徑9 cm）中制成含菌的PDA平板。培養(yǎng)皿背面劃“十”字線，距離“十”字線交叉點3 cm處，用直徑為0.7 cm打孔器打孔后備用。

殺菌劑持效期測定：采用藥劑瓊脂擴散法［18］，用無菌水將16種供試殺菌劑配制成有效成分濃度為1 000 mg/kg的稀釋藥液，用移液槍吸取50 μL藥液置于含菌PDA平板孔中，以加等體積的無菌水為空白對照，置于25 ℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)。培養(yǎng)后2、3、5、7、9、11、13、15 d分別測量“十”字線上抑菌圈半徑的大小，并觀察記錄抑菌圈消失時間。

1.2.2 田間小區(qū)藥效試驗 試驗于2018年在廣東省紫金縣鳳安鎮(zhèn)回龍村進(jìn)行，供試火龍果品種為紅肉紅皮火龍果，種植已有3年。試驗地果園為平地，果園管理水平較差，火龍果褐腐病發(fā)生嚴(yán)重，果園病情壓力比較大。果園采用柱式栽培，每個水泥柱種植4株火龍果，每667 m2約120個水泥柱子。

試驗設(shè)計及施藥方法：以本研究篩選出的抑菌持效期較長或抑菌效果較好的殺菌劑為供試藥劑，設(shè)置100 mg/kg（常規(guī)施藥濃度）和500 mg/kg（偏高施藥濃度）兩種施藥濃度，在火龍果嫩莖剛抽出時開始施藥，間隔10～13 d施一次藥，連續(xù)施藥3次。每個處理3次重復(fù)，每個重復(fù)20株火龍果（5個水泥柱），隨機區(qū)組排列。采用背負(fù)式電動噴霧器噴霧，每小區(qū)噴藥液量為4 L，對照區(qū)噴施等量清水，全株噴霧均勻。第1次施藥時，火龍果植株枝條上有較多褐腐病病斑，尚未有果。

調(diào)查方法：于第3次施藥后7 d和15 d調(diào)查防效，主要調(diào)查嫩莖的發(fā)病情況，并對藥劑安全性進(jìn)行觀察。每小區(qū)調(diào)查全部水泥柱火龍果，每株火龍果調(diào)查5個嫩莖。調(diào)查時按病莖面積所占比例進(jìn)行分級，統(tǒng)計病情指數(shù)和計算防治效果，采用DPS7.05軟件進(jìn)行差異顯著性分析。病情分級方法如下：0級，整條嫩莖無病斑；1級，病斑面積占整條嫩莖面積5%以下；3級，病斑面積占整條嫩莖面積6%～10%；5級，病斑面積占整條嫩莖面積11%～20%；7級，病斑面積占整條嫩莖面積21%～40%；9級，病斑面積占整條嫩莖面積41%以上。

2 結(jié)果與分析

2.1 殺菌劑抑菌持效期長短比較

培養(yǎng)2 d后，16種藥劑對火龍果褐腐病菌DF-CH8菌株的抑菌圈均達(dá)到最大值，爾后隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加，抑菌圈逐漸變小或消失。培養(yǎng)2 d后，咯菌腈、丙環(huán)唑、丙硫菌唑、戊唑醇、氟硅唑和異菌脲等6種殺菌劑對火龍果褐腐病菌的抑菌圈大且明顯，最大抑菌圈半徑分別為2.90、3.00、2.85、2.95、2.98、2.00 cm，培養(yǎng)15 d后抑菌圈半徑分別為1.80、1.30、1.30、1.20、0.70、0.50 cm，抑菌持效期長。培養(yǎng)2 d后，咪鮮胺、苯醚甲環(huán)唑、腈菌唑等3種殺菌劑對火龍果褐腐病菌DF-CH8的抑菌圈半徑分別為3.00、2.90、2.80 cm，培養(yǎng)9～11 d后抑菌圈逐漸消失，表現(xiàn)出較長的抑菌持效期。培養(yǎng)2 d后，多菌靈、嘧菌酯和噻菌靈等3種殺菌劑對火龍果褐腐病菌DFCH8的抑菌圈半徑分別為3.00、2.50、2.00 cm，培養(yǎng)5～7 d后抑菌圈逐漸消失，抑菌持效期較短。丙森鋅、春雷霉素、百菌清、氟環(huán)唑等4種殺菌劑早期對火龍果褐腐病菌的抑菌圈較小，最大抑菌圈半徑不足1.25 cm，培養(yǎng)3 d后抑菌圈基本消失，表現(xiàn)出極短的抑菌持效期（表1，圖1）。

2.2 殺菌劑田間防治效果比較

2.2.1 病指比較與安全性觀察 第3次施藥后7 d，咪鮮胺、苯醚甲環(huán)唑、咯菌腈、丙硫菌唑、丙環(huán)唑、氟硅唑、異菌脲、戊唑醇等8種藥劑100 mg/kg施藥濃度處理后，各小區(qū)火龍果嫩莖上褐腐病平均病情指數(shù)分別為9.50、8.42、7.22、6.69、6.06、6.03、5.36和4.69；500 mg/kg施藥濃度處理后，各小區(qū)火龍果嫩莖上褐腐病平均病情指數(shù)分別為 7.17、5.92、5.47、4.00、3.53、4.67、4.20和2.50，空白對照病情指數(shù)為24.36，顯著高于藥劑處理的病情指數(shù)（表2）。第3次施藥后15 d，咪鮮胺、苯醚甲環(huán)唑、咯菌腈、丙硫菌唑、丙環(huán)唑、氟硅唑、異菌脲、戊唑醇等8種藥劑100 mg/kg施藥濃度處理后，各小區(qū)火龍果嫩莖上褐腐病平均病情指數(shù)分別為21.56、23.31、14.95、10.50、11.45、10.61、9.75和 8.36；500 mg/kg施藥濃度處理后，各小區(qū)火龍果嫩莖上褐腐病平均病情指數(shù)分別為26.56、19.81、11.50、8.94、8.19、8.17、8.28和5.92；空白對照病情指數(shù)為33.47，顯著高于藥劑處理的病情指數(shù)（表2）。試驗中僅觀察到丙環(huán)唑在500 mg/kg施藥濃度下對火龍果生長有較明顯的抑制作用，表現(xiàn)為火龍果嫩莖抽出和生長均較慢，其他7種殺菌劑處理未觀察到產(chǎn)生藥害現(xiàn)象。

表1 16種殺菌劑對火龍果褐腐病菌抑菌圈半徑大小及持效期Table 1 Radius sizes of inhibition zones and effective duration of 16 fungicides against N. dimidiatum

圖1 不同殺菌劑對火龍果褐腐病菌的抑制效果（25℃，2 d）Fig. 1 Inhibition effects of different fungicides against N. dimidiatum (25℃，2 d)

2.2.2 常規(guī)施藥濃度防效比較 100 mg/kg施藥濃度處理后，戊唑醇和異菌脲對火龍果褐腐病表現(xiàn)出較好的防效，第3次施藥后7 d平均防效分別達(dá)到80.79%和77.81%，第3次施藥后15 d平均防效仍分別有75.02%和70.84%，田間防治持效期較長；氟硅唑、丙環(huán)唑、丙硫菌唑，第3次施藥后7 d對火龍果褐腐病平均防效分別為75.04%、75.12%和72.38%，第3次施藥后15 d對火龍果褐腐病防效降低，平均防效分別為68.23%、65.79%和68.70%，田間防治持效期一般；咯菌腈、苯醚甲環(huán)唑、咪鮮胺第3次施藥后7 d對火龍果褐腐病平均防效分別為70.10%、65.27%和60.89%，第3次施藥后15 d平均防效分別為55.39%、35.48%和30.32%，持效期較短（表2）。

表2 8種殺菌劑對火龍果褐腐病的田間防效Table 2 Field control effects of 8 fungicides against N. dimidiatum

2.2.3 偏高施藥濃度防效比較 施藥濃度為500 mg/kg時，供試的8種殺菌劑對火龍果褐腐病防治效果均有提高。戊唑醇、異菌脲、氟硅唑、丙環(huán)唑、丙硫菌唑等5種殺菌劑對火龍果褐腐病表現(xiàn)出良好的防效，田間防治持效期較長，第3次施藥后7 d對火龍果褐腐病的平均防效分別為89.64%、82.71%、80.77%、85.51% 和 83.43%；第3次藥后15 d平均防效分別為82.15%、75.20%、75.78%、75.50%和73.14%，顯著高于其他3種殺菌劑。咯菌腈、苯醚甲環(huán)唑、咪鮮胺第3次施藥后7 d的防效比較好，平均防效分別為77.47%、75.84%和70.44%，第3次施藥后15 d的防效比較差，平均防效分別為65.64%、40.72%和20.55%（表2）。

3 討論

火龍果褐腐病是火龍果生產(chǎn)上的毀滅性病害，嚴(yán)重影響火龍果產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，生產(chǎn)病害防控上主要還是依賴化學(xué)藥劑。該病菌主要為害幼嫩枝條和果實，在廣東地區(qū)每年4—10月的高溫多雨季節(jié)為害嚴(yán)重。此外，火龍果莖桿表面光滑且臘質(zhì)層厚，一般防治藥劑比較難被植株吸收起作用。具有內(nèi)吸活性強、耐雨水沖刷的殺菌劑才能起到較好防治效果。針對廣東地區(qū)高溫多雨的氣候特點和火龍果自身的生理結(jié)構(gòu)特點，篩選出持效期長且田間防治效果突出的殺菌藥劑在生產(chǎn)上具有重要應(yīng)用價值。

田間藥效試驗選擇在病情壓力比較大的果園進(jìn)行，能較好地比較不同藥劑的防效差別。本研究中篩選到戊唑醇、異菌脲、氟硅唑、丙環(huán)唑、丙硫菌唑等5種藥劑對火龍果褐腐病表現(xiàn)出良好防效，可以作為防控火龍果褐腐病的重要藥劑。賢小勇等［16］在田間藥效試驗中發(fā)現(xiàn)吡唑醚菌酯、嘧菌酯、戊唑醇等也有較好的防效，本研究結(jié)果與該研究結(jié)果基本一致，而氟硅唑防效相對較差，本研究結(jié)果與該研究結(jié)果不一致。此外，林珊宇等［12］的田間藥效試驗發(fā)現(xiàn)吡唑醚菌酯`氟唑菌酰胺藥劑對火龍果褐腐病也具有很好防效。

本研究采用藥劑瓊脂擴散法，通過觀察抑菌圈的消失時間研究藥劑持效期，反映的是不同藥劑對火龍果褐腐病菌孢子萌發(fā)和菌絲生長的抑制作用，抑菌圈大而干凈，且消失時間長，說明藥劑對病菌的抑菌效果好且持效期長。而在田間，藥劑的持效期往往還受田間環(huán)境、田間病原菌含量、病菌抗藥性、植物生理特性、藥劑作用方式、藥劑助劑特性等多種因素影響。郭永斌等［19］研究了6種銅制劑對蘋果樹腐爛病菌抑制作用的持效期及影響因素，證實光照、降雨、藥劑展著性均對藥劑持效期產(chǎn)生了影響。吡咯類藥劑咯菌腈對病菌室內(nèi)離體抑菌持效期長，但在田間對火龍果嫩莖的防效比較差，這可能與咯菌腈沒有內(nèi)吸活性以及粉劑不耐雨水沖刷等有關(guān)［20-21］。三唑類藥劑戊唑醇在田間藥效試驗中防效比較突出，持效期長達(dá)15 d以上，這可能與戊唑醇能迅速被植物有生長力的部分吸收并主要向頂部轉(zhuǎn)移的特性密切相關(guān)［22］。丙環(huán)唑、氟硅唑、丙硫菌唑等具有內(nèi)吸活性的三唑類殺菌劑室內(nèi)抑菌持效期較長，在田間也表現(xiàn)出較好防效，藥后15 d的平均防效仍有65%以上，持效期也比較長；而三唑類藥劑苯醚甲環(huán)唑在室內(nèi)抑菌效果好，但離體持效期比較短，田間藥效試驗中的早期防效較好，后期防效較差，持效期也較短，室內(nèi)和田間的表現(xiàn)相一致。同樣是三唑類藥劑的苯醚甲環(huán)唑，其防效較差的原因有待進(jìn)一步研究。二羧酰亞胺類藥劑異菌脲在室內(nèi)抑菌效果好，離體持效期長，田間防效好，持效期也較長，室內(nèi)和田間相一致。咪唑類藥劑咪鮮胺早期對火龍果褐腐病均抑菌效果很好，表現(xiàn)為抑菌圈大、圈內(nèi)干凈，但持效期特別短，7 d即失去抑菌作用，在田間防效中同樣表現(xiàn)不好，藥后7 d防效不足61%，藥后15 d基本沒有防效，分析與咪鮮胺藥劑內(nèi)吸活性較差的特性密切相關(guān)［23］。

4 結(jié)論

生產(chǎn)上防治火龍果褐腐病優(yōu)先推薦具有較強內(nèi)吸活性的戊唑醇、異菌脲、氟硅唑、丙硫菌唑、丙環(huán)唑等殺菌劑，注意輪換用藥，延緩病菌產(chǎn)生抗藥性。本團隊研究發(fā)現(xiàn)，火龍果褐腐病的防控同時應(yīng)結(jié)合清園減少初侵染來源、加強水肥管理培育壯枝、適時施藥保護(hù)嫩枝老熟等綜合措施控制病害的為害和蔓延?；瘕埞指》揽厮巹┑霓r(nóng)藥殘留情況有待進(jìn)一步研究。