駱昕 曲紹軒 林金盛 李輝平 侯立娟 蔣寧 冷龍元 馬林

摘要：為了明確食用菌寄主和培養(yǎng)料含水量對食用菌栽培中發(fā)生嚴重的蟲害異遲眼蕈蚊生長發(fā)育的影響，采用室內飼養(yǎng)法，模擬了不同寄主（平菇、金針菇、毛木耳和香菇）和培養(yǎng)料含水量（50%和70%）的栽培環(huán)境，研究異遲眼蕈蚊不同生活史階段中生長發(fā)育的變化。結果表明，寄主和培養(yǎng)料含水量對異遲眼蕈蚊生長發(fā)育的影響明顯且對不同發(fā)育歷期影響不同。二齡、四齡幼蟲和蛹在食用菌寄主金針菇上的發(fā)育歷期最長;當食用菌培養(yǎng)料水分含量為70%時，一齡幼蟲、二齡幼蟲、蛹期和成蟲發(fā)育歷期顯著長于培養(yǎng)料水分含量為50%時的發(fā)育歷期;食用菌寄主和培養(yǎng)料水分含量對卵和三齡幼蟲的發(fā)育歷期無顯著影響。

關鍵詞：異遲眼蕈蚊;寄主;培養(yǎng)料含水量;發(fā)育歷期

中圖分類號：S436.46+2 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2019）23-0119-04

異遲眼蕈蚊（Bradysia difformis Frey），屬雙翅目眼蕈蚊科遲眼蕈蚊屬[1]。2003年Menzel等對從食用菌場采集的標本進行鑒定后，根據新的命名法和分類法進行重新命名[2]。異遲眼蕈蚊可危害平菇、秀珍菇、雙孢蘑菇、茶樹菇等多種食用菌品種，是食用菌栽培蟲害種類的優(yōu)勢種群之一[3]。異遲眼蕈蚊幼蟲取食食用菌菌絲、子實體，成蟲雖不直接危害食用菌，卻是病原菌、螨蟲的傳播媒介[4]。據云南省初步調查，食用菌栽培中蟲害侵染率達100%，造成減產30%～40%，經濟效益損失25%～35%[5]。水分、溫度、寄主對厲眼蕈蚊、韭菜遲眼蕈蚊等眼蕈蚊科昆蟲生長發(fā)育的影響已有報道[6-8]，但對危害食用菌的異遲眼蕈蚊生長發(fā)育的影響尚不清楚。

本研究選取平菇、金針菇、毛木耳、香菇4種國內主栽食用菌品種作為供試寄主，研究了異遲眼蕈蚊在不同培養(yǎng)料含水量條件下發(fā)育歷期的變化，以期明晰異遲眼蕈蚊與不同寄主在不同培養(yǎng)料含水量中的互作關系，探討異遲眼蕈蚊對寄主和培養(yǎng)料含水量的適應對策，為其預測預報及防治提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

平菇、金針菇、毛木耳和香菇4個食用菌寄主由江蘇省農業(yè)科學院蔬菜研究所食用菌研究室提供。

1.2 供試蟲源

異遲眼蕈蚊采集自江蘇省農業(yè)科學院蔬菜研究所食用菌出菇大棚，在養(yǎng)蟲室內連續(xù)隔離飼養(yǎng)，待形成穩(wěn)定的實驗室種群后備用。

1.3 方法

1.3.1 試驗方法 供試食用菌寄主菌塊（d=4 mm）接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）[9]平板（d=70 mm）中央，待菌絲長滿平板后作為母種。原種培養(yǎng)料配制方法：稱取棉籽殼750 g、玉米芯200 g、麩皮50 g和水1 000 g，配制成含水量為50%的培養(yǎng)料;稱取棉籽殼750 g、玉米芯200 g、麩皮50 g和水1 667 g，配制成含水量為70%的培養(yǎng)料。將攪拌均勻的培養(yǎng)料分裝到300 mL的栽培瓶中，每瓶裝250 g培養(yǎng)料，高壓蒸汽滅菌（0.11 kPa，121 ℃）后取出冷卻至室溫，每瓶接種母種菌塊（d=15 mm）1塊，封口后室溫靜置培養(yǎng)至菌絲長滿。

人工氣候箱（SPX-2501，上海博訊實業(yè)有限公司）的溫度設定為25 ℃，相對濕度分別設置為50%和70%，無光照。將直徑為2.5 cm、兩端開口的玻璃管豎直放置在托盤內，玻璃管底部覆蓋海綿和濾紙，托盤內加少量水保濕，將長滿菌絲的培養(yǎng)料放置在濾紙上，每管放料10 g。每管放入1對新羽化還未交配的雌蟲和雄蟲，用60目防蟲網封口，1個處理重復6次，每天17：00在體視顯微鏡下觀察成蟲的存活天數以及雌蟲的產卵情況，并將雌蟲每日所產的卵挑出，放入覆有保濕濾紙和2 g不同寄主的12孔細胞培養(yǎng)板中，每孔1粒卵，用60目防蟲網封口，每天09：00和17：00（室內試驗環(huán)境溫度與人工氣候箱設定的溫度相近）在體視顯微鏡下各觀察1次，詳細記錄卵、幼蟲和蛹發(fā)育歷期及成蟲壽命，觀察到蟲齡變化時間09：00記為N+0.6 d，變化時間17：00記為 N+1 d。

1.3.2 數據統(tǒng)計方法 選擇不同處理中從卵至成蟲自然死亡的完整發(fā)育個體用于數據統(tǒng)計分析。首先對所有試驗數據進行了Shapiro-Wilk正態(tài)檢驗，數據基本符合正態(tài)分布。因此，以食用菌寄主及培養(yǎng)料含水量為固定因子，重復為隨機因子，采用雙因素有重復的方差，分析異遲眼蕈蚊不同階段的發(fā)育歷期。其指標在SPSS 20.0中用鄧肯式新復極差法進行顯著性分析[10]。

2 結果與分析

2.1 食用菌寄主和培養(yǎng)料含水量對異遲眼蕈蚊卵發(fā)育的影響

如表1所示，食用菌寄主（F=0.088，P=0.966）與培養(yǎng)料含水量（F=1.430，P=0.232）對卵發(fā)育歷期無顯著影響，且兩者交互（F=0.206，P=0.893）也對卵發(fā)育歷期無顯著影響。

2.2 食用菌寄主和培養(yǎng)料含水量對異遲眼蕈蚊幼蟲發(fā)育的影響

食用菌寄主和培養(yǎng)料含水量對異遲眼蕈蚊幼蟲不同齡期發(fā)育有不同的影響（表1）。食用菌寄主（F=0.594，P=0.619）對一齡幼蟲發(fā)育歷期無顯著影響，食用菌培養(yǎng)料含水量（F=10.111，P<0.01）對一齡幼蟲發(fā)育歷期影響極顯著，兩者交互（F=0.346，P=0.792）無顯著影響。食用菌培養(yǎng)料含水量70%時，一齡幼蟲發(fā)育歷期為3.76 d，顯著長于食用菌培養(yǎng)料含水量50%時（圖1）。

食用菌寄主（F=3.499，P<0.05）和培養(yǎng)料含水量（F=11.955，P<0.01）分別對二齡幼蟲發(fā)育歷期有顯著、極顯著影響，但是兩者交互（F=0.300，P=0.826）無顯著影響。異遲眼蕈蚊二齡幼蟲在不同寄主上的發(fā)育歷期從長到短順序依次為金針菇>平菇>毛木耳>香菇，食用菌培養(yǎng)料含水量70%時，二齡幼蟲發(fā)育歷期為3.73 d，顯著長于食用菌培養(yǎng)料含水量50%時（圖2）。

食用菌寄主（F=1.416，P=0.237）、培養(yǎng)料含水量（F=2.066，P=0.151）和兩者交互（F=0.360，P=0.782）均對三齡幼蟲發(fā)育歷期無顯著影響，與卵期表現(xiàn)相同。

食用菌寄主（F=3.894，P<0.01）對四齡幼蟲發(fā)育歷期影響極顯著，培養(yǎng)料含水量（F=3.392，P=0.066）對四齡幼蟲發(fā)育歷期無顯著影響，兩者交互（F=3.031，P<0.05）有顯著影響。異遲眼蕈蚊四齡幼蟲在70%含水量的金針菇培養(yǎng)料上的發(fā)育歷期最長（3.77±0.55 d）（圖3）。

2.3 食用菌寄主和培養(yǎng)料含水量對異遲眼蕈蚊蛹發(fā)育的影響

食用菌寄主（F=4.738，P<0.01）和培養(yǎng)料含水量（F=23.038，P<0.01）均對蛹發(fā)育歷期有極顯著影響，但是兩者交互（F=0.148，P=0.931）無顯著影響。異遲眼蕈蚊蛹在不同寄主上的發(fā)育歷期從長到短順序依次為金針菇>毛木耳>香菇>平菇， 食用菌培養(yǎng)料含水量70%時， 二齡幼蟲發(fā)育歷期為3.56 d，顯著長于食用菌培養(yǎng)料含水量50%時（圖4）。

2.4 食用菌寄主和培養(yǎng)料含水量對異遲眼蕈蚊成蟲壽命的影響

如表1和圖5所示，食用菌寄主（F=0.685，P=0.562）對成蟲發(fā)育歷期無顯著影響，培養(yǎng)料含水量（F=122.800，P<0.01）對成蟲發(fā)育歷期影響極顯著，兩者交互（F=1.799，P=0.147）無顯著影響， 與對一齡幼蟲發(fā)育影響相同。 食用菌培養(yǎng)料含水量70%時，成蟲發(fā)育歷期為3.52 d，顯著長于食用菌培養(yǎng)料含水量50%時。

3 討論

試驗結果表明，寄主和培養(yǎng)料含水量對異遲眼蕈蚊生長發(fā)育的影響明顯且對不同發(fā)育歷期影響不同。食用菌培養(yǎng)料含水量對異遲眼蕈蚊一齡幼蟲的發(fā)育歷期和成蟲的壽命有顯

著影響，培養(yǎng)料含水量越大，2個階段蟲態(tài)的發(fā)育歷期越長;二齡幼蟲和蛹期發(fā)育歷期受寄主和培養(yǎng)料含水量單因素的影響顯著或極顯著;兩者交互對異遲眼蕈蚊四齡幼蟲的發(fā)育歷期有顯著影響; 但異遲眼蕈蚊卵和三齡幼蟲的發(fā)育歷期均不受寄主和水分單因素及兩者交互的影響。在影響顯著或極顯著的各發(fā)育歷期中，食用菌寄主金針菇對二齡、四齡幼蟲和蛹的發(fā)育歷期延長均表現(xiàn)出最大延長的促進作用;食用菌培養(yǎng)料水分含量越高對一齡幼蟲、二齡幼蟲、蛹期和成蟲發(fā)育歷期延長的促進作用越大。

異遲眼蕈蚊不僅危害食用菌，也是韭菜、大蔥、蠶豆、百合等蔬菜、 花卉的地下害蟲之一。茍玉萍等研究了不同植物及韭菜品種對異遲眼蕈蚊生長發(fā)育的影響，發(fā)現(xiàn)韭菜是最適合異遲眼蕈蚊幼蟲生長的寄主，在韭菜的多個品種中，萬源紫根寬葉王和萬源漢中冬韭一號是異遲眼蕈蚊為害性較弱的品種[11-12]。食用菌栽培中，與異遲眼蕈蚊同屬眼蕈蚊科的厲眼蕈蚊也是重要的蟲害之一，取食金針菇的厲眼蕈蚊發(fā)育總歷期最短，而取食毛木耳的最長[13]。幼蟲期是異遲眼蕈蚊取食的主要時期，幼蟲期長則會延長其取食為害的時間，對寄主植物生長不利，而幼蟲期短則會增加幼蟲取食為害的世代數[14]。食用菌寄主對異遲眼蕈蚊的影響機制還鮮有報導。

水分是昆蟲生存必不可少的重要條件，水分直接參與昆蟲的新陳代謝，當昆蟲體內水分受到外界環(huán)境影響而失去平衡時，便可不同程度影響昆蟲的生長發(fā)育[15]。食用菌栽培中害蟲的生存和分布與空氣及培養(yǎng)料中的濕度高低有很大關系。遲眼蕈蚊屬中的韭菜遲眼蕈蚊是被研究較多的一種[16-17]。韭菜遲眼蕈蚊經過干旱脅迫后各蟲態(tài)發(fā)育歷期明顯延長[18]，潮濕環(huán)境有利于幼蟲的存活和發(fā)育[19]。韭菜遲眼蕈蚊成蟲補充水分對延長壽命及促進其有效產卵行為具有重要意義[20]，濕度太低或太高都會影響韭菜異遲眼蕈蚊的生長發(fā)育[7]。本研究中培養(yǎng)料水分對異遲眼蕈蚊的影響與韭菜遲眼蕈蚊并不完全一致，這可能與兩者的種間差異及生理學特性有關。

幼蟲期是異遲眼蕈蚊取食的主要時期，食用菌出菇期的高濕環(huán)境更有利于幼蟲為害，在食用菌栽培中，應加強對異遲眼蕈蚊的蟲情監(jiān)測，及時通過昆蟲病原線蟲、微生物殺蟲劑等生物方法加強對幼蟲的防治和預防可以降低對食用菌產量的影響[21-22]，同時采用黃色黏蟲板、誘蟲燈等物理方法誘殺成蟲可有效減少蟲口基數[23]。

參考文獻：

[1]張宏瑞，張曉云，沈登榮，等. 食用菌異遲眼蕈蚊Bradysia difformis的生物學特性[J]. 中國食用菌，2008，27（6）：54-56.

[2]Menzel F，Smith J E，Colauto N B. Bradysia difformis Frey and Bradysia ocellaris （Comstock）：two additional neotropical species of black fungus gnats （Diptera：Sciaridae） of economic importance：a redescription and review[J]. Annals of the Entomological Society of America，2003，96（4）：448-457.

[3]馬 林，林金盛，陸 娜，等. 江浙地區(qū)秀珍菇雙翅目害蟲鑒定及防治[J]. 南方農業(yè)學報，2019，50（1）：68-73.

[4]Ernesto S B，Mariangel L，Junior L，et al. Biological control of the fungus gnats Bradysia difformis （Diptera，Mycetophilidae） in mushrooms with Heterorhabditis amazonensis in tropical conditions[J]. Scientia Horticulturae，2017，216：120-125.

[5]李建波，何 璞. 我國食用菌雙翅目害蟲種類和防治研究現(xiàn)狀[J]. 中國植保導刊，2017，37（11）：19-25，37.

[6]曲紹軒，馬 林，袁 野，等. 食用菌厲眼蕈蚊Lycoriella ingenua在溫度逆境下的存活率[J]. 環(huán)境昆蟲學報，2015，37（3）：688-692.

[7]Yang Y T，Li W X，Xie W，et al. Development of Bradysia odoriphaga （Diptera：Sciaridae） as affected by humidity：an age-stage，two-sex，life-table study[J]. applied Entomology and Zoology，2015，50（1）：3-10.

[8]楊玉婷，史彩華，程佳旭，等. 不同寄主植物對韭菜遲眼蕈蚊生長發(fā)育、繁殖和保護酶活力的影響[J]. 植物保護，2017，43（5）：119-123.

[9]馬 林，曲紹軒，王曉強，等. 食用菌木霉的生防細菌鑒定及相關基因功能預測[J]. 江蘇農業(yè)學報，2016，32（3）：528-533.

[10]邢 鯤，趙 飛，韓巨才，等. 晝夜變溫幅度對小菜蛾不同發(fā)育階段生活史性狀的影響[J]. 昆蟲學報，2015，58（2）：160-168.

[11]茍玉萍，劉 倩，劉長仲. 不同寄主植物對異遲眼蕈蚊生長發(fā)育和繁殖的影響[J]. 植物保護，2015，41（1）：28-32.

[12]茍玉萍，劉 倩，張艷霞，等. 不同韭菜品種對異遲眼蕈蚊生長發(fā)育及繁殖的影響[J]. 中國生態(tài)農業(yè)學報，2015，23（6）：741-747.

[13]曲紹軒，宋金俤，林金盛，等. 食用菌寄主和溫度對厲眼蕈蚊生長發(fā)育的影響[J]. 食用菌學報，2015，22（2）：89-93.

[14]張艷霞，郭蘇帆，劉長仲. 異遲眼蕈蚊在不同植物上的生長發(fā)育及種群參數[J]. 應用昆蟲學報，2016，53（6）：1184-1189.

[15]段小鳳，王曉慶，李品武，等. 幾種環(huán)境因子對昆蟲適應性影響的研究進展[J]. 中國農學通報，2015，31（14）：79-82.

[16]楊 棟，李俊領，金曉婷，等. 幾種殺蟲劑對韭菜遲眼蕈蚊幼蟲的室內毒力篩選及藥劑混配研究[J]. 江蘇農業(yè)科學，2017，45（6）：83-85.

[17]徐 蕾，趙彤華，許國慶，等. 韭菜遲眼蕈蚊取食習性及趨性行為反應[J]. 江蘇農業(yè)科學，2018，46（13）：101-104.

[18]孫麗娟，陳杰民，鄭長英. 韭菜養(yǎng)根期干旱處理對韭菜遲眼蕈蚊種群動態(tài)的影響[J]. 昆蟲學報，2019，62（3）：351-357.

[19]徐 蕾，趙彤華，劉培斌，等. 濕度和高溫對韭菜遲眼蕈蚊生長發(fā)育影響[J]. 遼寧農業(yè)科學，2016（6）：23-25.

[20]周仙紅，曹 雪，沈一凡，等. 營養(yǎng)物質和水分對韭菜遲眼蕈蚊成蟲繁殖和壽命的影響[J]. 應用昆蟲學報，2016，53（6）：1205-1210.

[21]Ernesto S B，Mariangel L，Edgar P，et al. Heterorhabditis amazonensis for biological control of fungus gnats Bradysia difformis in Daisy Gerberas[J]. BioControl，2017，62（6）：847-855.

[22]馬 林，曲紹軒，林金盛，等. 食用菌遲眼蕈蚊生防菌蘇云金芽孢桿菌的篩選及毒力測定[J]. 食用菌，2015（6）：53-55.

[23]宋金俤，馬 林，曲紹軒. 食用菌雙翅目害蟲特性與控制途徑[J]. 食用菌，2012（4）：52-53.

收稿日期：2019-08-08

基金項目：現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系建設專項（編號：CARS-20）;江蘇省農業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號：CX（17）2009]。

作者簡介：駱 昕（1995—），女，四川萬縣人，研究實習員，主要從事食用菌蟲害防治方面的研究。E-mail：1749292693@qq.com。

通信作者：馬 林，博士，研究員，主要從事食用菌栽培與病蟲防控方面的研究。E-mail：malin1590@sina.com。