駱昕 曲紹軒 林金盛 李輝平 侯立娟 蔣寧 冷龍?jiān)? 馬林

摘要：為了明確食用菌寄主和培養(yǎng)料含水量對(duì)食用菌栽培中發(fā)生嚴(yán)重的蟲(chóng)害異遲眼蕈蚊生長(zhǎng)發(fā)育的影響，采用室內(nèi)飼養(yǎng)法，模擬了不同寄主（平菇、金針菇、毛木耳和香菇）和培養(yǎng)料含水量（50%和70%）的栽培環(huán)境，研究異遲眼蕈蚊不同生活史階段中生長(zhǎng)發(fā)育的變化。結(jié)果表明，寄主和培養(yǎng)料含水量對(duì)異遲眼蕈蚊生長(zhǎng)發(fā)育的影響明顯且對(duì)不同發(fā)育歷期影響不同。二齡、四齡幼蟲(chóng)和蛹在食用菌寄主金針菇上的發(fā)育歷期最長(zhǎng);當(dāng)食用菌培養(yǎng)料水分含量為70%時(shí)，一齡幼蟲(chóng)、二齡幼蟲(chóng)、蛹期和成蟲(chóng)發(fā)育歷期顯著長(zhǎng)于培養(yǎng)料水分含量為50%時(shí)的發(fā)育歷期;食用菌寄主和培養(yǎng)料水分含量對(duì)卵和三齡幼蟲(chóng)的發(fā)育歷期無(wú)顯著影響。

關(guān)鍵詞：異遲眼蕈蚊;寄主;培養(yǎng)料含水量;發(fā)育歷期

中圖分類號(hào)：S436.46+2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2019）23-0119-04

異遲眼蕈蚊（Bradysia difformis Frey），屬雙翅目眼蕈蚊科遲眼蕈蚊屬[1]。2003年Menzel等對(duì)從食用菌場(chǎng)采集的標(biāo)本進(jìn)行鑒定后，根據(jù)新的命名法和分類法進(jìn)行重新命名[2]。異遲眼蕈蚊可危害平菇、秀珍菇、雙孢蘑菇、茶樹(shù)菇等多種食用菌品種，是食用菌栽培蟲(chóng)害種類的優(yōu)勢(shì)種群之一[3]。異遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)取食食用菌菌絲、子實(shí)體，成蟲(chóng)雖不直接危害食用菌，卻是病原菌、螨蟲(chóng)的傳播媒介[4]。據(jù)云南省初步調(diào)查，食用菌栽培中蟲(chóng)害侵染率達(dá)100%，造成減產(chǎn)30%～40%，經(jīng)濟(jì)效益損失25%～35%[5]。水分、溫度、寄主對(duì)厲眼蕈蚊、韭菜遲眼蕈蚊等眼蕈蚊科昆蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響已有報(bào)道[6-8]，但對(duì)危害食用菌的異遲眼蕈蚊生長(zhǎng)發(fā)育的影響尚不清楚。

本研究選取平菇、金針菇、毛木耳、香菇4種國(guó)內(nèi)主栽食用菌品種作為供試寄主，研究了異遲眼蕈蚊在不同培養(yǎng)料含水量條件下發(fā)育歷期的變化，以期明晰異遲眼蕈蚊與不同寄主在不同培養(yǎng)料含水量中的互作關(guān)系，探討異遲眼蕈蚊對(duì)寄主和培養(yǎng)料含水量的適應(yīng)對(duì)策，為其預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)及防治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

平菇、金針菇、毛木耳和香菇4個(gè)食用菌寄主由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所食用菌研究室提供。

1.2 供試蟲(chóng)源

異遲眼蕈蚊采集自江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所食用菌出菇大棚，在養(yǎng)蟲(chóng)室內(nèi)連續(xù)隔離飼養(yǎng)，待形成穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)室種群后備用。

1.3 方法

1.3.1 試驗(yàn)方法 供試食用菌寄主菌塊（d=4 mm）接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）[9]平板（d=70 mm）中央，待菌絲長(zhǎng)滿平板后作為母種。原種培養(yǎng)料配制方法：稱取棉籽殼750 g、玉米芯200 g、麩皮50 g和水1 000 g，配制成含水量為50%的培養(yǎng)料;稱取棉籽殼750 g、玉米芯200 g、麩皮50 g和水1 667 g，配制成含水量為70%的培養(yǎng)料。將攪拌均勻的培養(yǎng)料分裝到300 mL的栽培瓶中，每瓶裝250 g培養(yǎng)料，高壓蒸汽滅菌（0.11 kPa，121 ℃）后取出冷卻至室溫，每瓶接種母種菌塊（d=15 mm）1塊，封口后室溫靜置培養(yǎng)至菌絲長(zhǎng)滿。

人工氣候箱（SPX-2501，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司）的溫度設(shè)定為25 ℃，相對(duì)濕度分別設(shè)置為50%和70%，無(wú)光照。將直徑為2.5 cm、兩端開(kāi)口的玻璃管豎直放置在托盤內(nèi)，玻璃管底部覆蓋海綿和濾紙，托盤內(nèi)加少量水保濕，將長(zhǎng)滿菌絲的培養(yǎng)料放置在濾紙上，每管放料10 g。每管放入1對(duì)新羽化還未交配的雌蟲(chóng)和雄蟲(chóng)，用60目防蟲(chóng)網(wǎng)封口，1個(gè)處理重復(fù)6次，每天17：00在體視顯微鏡下觀察成蟲(chóng)的存活天數(shù)以及雌蟲(chóng)的產(chǎn)卵情況，并將雌蟲(chóng)每日所產(chǎn)的卵挑出，放入覆有保濕濾紙和2 g不同寄主的12孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔1粒卵，用60目防蟲(chóng)網(wǎng)封口，每天09：00和17：00（室內(nèi)試驗(yàn)環(huán)境溫度與人工氣候箱設(shè)定的溫度相近）在體視顯微鏡下各觀察1次，詳細(xì)記錄卵、幼蟲(chóng)和蛹發(fā)育歷期及成蟲(chóng)壽命，觀察到蟲(chóng)齡變化時(shí)間09：00記為N+0.6 d，變化時(shí)間17：00記為 N+1 d。

1.3.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法 選擇不同處理中從卵至成蟲(chóng)自然死亡的完整發(fā)育個(gè)體用于數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。首先對(duì)所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行了Shapiro-Wilk正態(tài)檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)基本符合正態(tài)分布。因此，以食用菌寄主及培養(yǎng)料含水量為固定因子，重復(fù)為隨機(jī)因子，采用雙因素有重復(fù)的方差，分析異遲眼蕈蚊不同階段的發(fā)育歷期。其指標(biāo)在SPSS 20.0中用鄧肯式新復(fù)極差法進(jìn)行顯著性分析[10]。

2 結(jié)果與分析

2.1 食用菌寄主和培養(yǎng)料含水量對(duì)異遲眼蕈蚊卵發(fā)育的影響

如表1所示，食用菌寄主（F=0.088，P=0.966）與培養(yǎng)料含水量（F=1.430，P=0.232）對(duì)卵發(fā)育歷期無(wú)顯著影響，且兩者交互（F=0.206，P=0.893）也對(duì)卵發(fā)育歷期無(wú)顯著影響。

2.2 食用菌寄主和培養(yǎng)料含水量對(duì)異遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)發(fā)育的影響

食用菌寄主和培養(yǎng)料含水量對(duì)異遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)不同齡期發(fā)育有不同的影響（表1）。食用菌寄主（F=0.594，P=0.619）對(duì)一齡幼蟲(chóng)發(fā)育歷期無(wú)顯著影響，食用菌培養(yǎng)料含水量（F=10.111，P<0.01）對(duì)一齡幼蟲(chóng)發(fā)育歷期影響極顯著，兩者交互（F=0.346，P=0.792）無(wú)顯著影響。食用菌培養(yǎng)料含水量70%時(shí)，一齡幼蟲(chóng)發(fā)育歷期為3.76 d，顯著長(zhǎng)于食用菌培養(yǎng)料含水量50%時(shí)（圖1）。

食用菌寄主（F=3.499，P<0.05）和培養(yǎng)料含水量（F=11.955，P<0.01）分別對(duì)二齡幼蟲(chóng)發(fā)育歷期有顯著、極顯著影響，但是兩者交互（F=0.300，P=0.826）無(wú)顯著影響。異遲眼蕈蚊二齡幼蟲(chóng)在不同寄主上的發(fā)育歷期從長(zhǎng)到短順序依次為金針菇>平菇>毛木耳>香菇，食用菌培養(yǎng)料含水量70%時(shí)，二齡幼蟲(chóng)發(fā)育歷期為3.73 d，顯著長(zhǎng)于食用菌培養(yǎng)料含水量50%時(shí)（圖2）。

食用菌寄主（F=1.416，P=0.237）、培養(yǎng)料含水量（F=2.066，P=0.151）和兩者交互（F=0.360，P=0.782）均對(duì)三齡幼蟲(chóng)發(fā)育歷期無(wú)顯著影響，與卵期表現(xiàn)相同。

食用菌寄主（F=3.894，P<0.01）對(duì)四齡幼蟲(chóng)發(fā)育歷期影響極顯著，培養(yǎng)料含水量（F=3.392，P=0.066）對(duì)四齡幼蟲(chóng)發(fā)育歷期無(wú)顯著影響，兩者交互（F=3.031，P<0.05）有顯著影響。異遲眼蕈蚊四齡幼蟲(chóng)在70%含水量的金針菇培養(yǎng)料上的發(fā)育歷期最長(zhǎng)（3.77±0.55 d）（圖3）。

2.3 食用菌寄主和培養(yǎng)料含水量對(duì)異遲眼蕈蚊蛹發(fā)育的影響

食用菌寄主（F=4.738，P<0.01）和培養(yǎng)料含水量（F=23.038，P<0.01）均對(duì)蛹發(fā)育歷期有極顯著影響，但是兩者交互（F=0.148，P=0.931）無(wú)顯著影響。異遲眼蕈蚊蛹在不同寄主上的發(fā)育歷期從長(zhǎng)到短順序依次為金針菇>毛木耳>香菇>平菇， 食用菌培養(yǎng)料含水量70%時(shí)， 二齡幼蟲(chóng)發(fā)育歷期為3.56 d，顯著長(zhǎng)于食用菌培養(yǎng)料含水量50%時(shí)（圖4）。

2.4 食用菌寄主和培養(yǎng)料含水量對(duì)異遲眼蕈蚊成蟲(chóng)壽命的影響

如表1和圖5所示，食用菌寄主（F=0.685，P=0.562）對(duì)成蟲(chóng)發(fā)育歷期無(wú)顯著影響，培養(yǎng)料含水量（F=122.800，P<0.01）對(duì)成蟲(chóng)發(fā)育歷期影響極顯著，兩者交互（F=1.799，P=0.147）無(wú)顯著影響， 與對(duì)一齡幼蟲(chóng)發(fā)育影響相同。 食用菌培養(yǎng)料含水量70%時(shí)，成蟲(chóng)發(fā)育歷期為3.52 d，顯著長(zhǎng)于食用菌培養(yǎng)料含水量50%時(shí)。

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，寄主和培養(yǎng)料含水量對(duì)異遲眼蕈蚊生長(zhǎng)發(fā)育的影響明顯且對(duì)不同發(fā)育歷期影響不同。食用菌培養(yǎng)料含水量對(duì)異遲眼蕈蚊一齡幼蟲(chóng)的發(fā)育歷期和成蟲(chóng)的壽命有顯

著影響，培養(yǎng)料含水量越大，2個(gè)階段蟲(chóng)態(tài)的發(fā)育歷期越長(zhǎng);二齡幼蟲(chóng)和蛹期發(fā)育歷期受寄主和培養(yǎng)料含水量單因素的影響顯著或極顯著;兩者交互對(duì)異遲眼蕈蚊四齡幼蟲(chóng)的發(fā)育歷期有顯著影響; 但異遲眼蕈蚊卵和三齡幼蟲(chóng)的發(fā)育歷期均不受寄主和水分單因素及兩者交互的影響。在影響顯著或極顯著的各發(fā)育歷期中，食用菌寄主金針菇對(duì)二齡、四齡幼蟲(chóng)和蛹的發(fā)育歷期延長(zhǎng)均表現(xiàn)出最大延長(zhǎng)的促進(jìn)作用;食用菌培養(yǎng)料水分含量越高對(duì)一齡幼蟲(chóng)、二齡幼蟲(chóng)、蛹期和成蟲(chóng)發(fā)育歷期延長(zhǎng)的促進(jìn)作用越大。

異遲眼蕈蚊不僅危害食用菌，也是韭菜、大蔥、蠶豆、百合等蔬菜、 花卉的地下害蟲(chóng)之一。茍玉萍等研究了不同植物及韭菜品種對(duì)異遲眼蕈蚊生長(zhǎng)發(fā)育的影響，發(fā)現(xiàn)韭菜是最適合異遲眼蕈蚊幼蟲(chóng)生長(zhǎng)的寄主，在韭菜的多個(gè)品種中，萬(wàn)源紫根寬葉王和萬(wàn)源漢中冬韭一號(hào)是異遲眼蕈蚊為害性較弱的品種[11-12]。食用菌栽培中，與異遲眼蕈蚊同屬眼蕈蚊科的厲眼蕈蚊也是重要的蟲(chóng)害之一，取食金針菇的厲眼蕈蚊發(fā)育總歷期最短，而取食毛木耳的最長(zhǎng)[13]。幼蟲(chóng)期是異遲眼蕈蚊取食的主要時(shí)期，幼蟲(chóng)期長(zhǎng)則會(huì)延長(zhǎng)其取食為害的時(shí)間，對(duì)寄主植物生長(zhǎng)不利，而幼蟲(chóng)期短則會(huì)增加幼蟲(chóng)取食為害的世代數(shù)[14]。食用菌寄主對(duì)異遲眼蕈蚊的影響機(jī)制還鮮有報(bào)導(dǎo)。

水分是昆蟲(chóng)生存必不可少的重要條件，水分直接參與昆蟲(chóng)的新陳代謝，當(dāng)昆蟲(chóng)體內(nèi)水分受到外界環(huán)境影響而失去平衡時(shí)，便可不同程度影響昆蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育[15]。食用菌栽培中害蟲(chóng)的生存和分布與空氣及培養(yǎng)料中的濕度高低有很大關(guān)系。遲眼蕈蚊屬中的韭菜遲眼蕈蚊是被研究較多的一種[16-17]。韭菜遲眼蕈蚊經(jīng)過(guò)干旱脅迫后各蟲(chóng)態(tài)發(fā)育歷期明顯延長(zhǎng)[18]，潮濕環(huán)境有利于幼蟲(chóng)的存活和發(fā)育[19]。韭菜遲眼蕈蚊成蟲(chóng)補(bǔ)充水分對(duì)延長(zhǎng)壽命及促進(jìn)其有效產(chǎn)卵行為具有重要意義[20]，濕度太低或太高都會(huì)影響韭菜異遲眼蕈蚊的生長(zhǎng)發(fā)育[7]。本研究中培養(yǎng)料水分對(duì)異遲眼蕈蚊的影響與韭菜遲眼蕈蚊并不完全一致，這可能與兩者的種間差異及生理學(xué)特性有關(guān)。

幼蟲(chóng)期是異遲眼蕈蚊取食的主要時(shí)期，食用菌出菇期的高濕環(huán)境更有利于幼蟲(chóng)為害，在食用菌栽培中，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)異遲眼蕈蚊的蟲(chóng)情監(jiān)測(cè)，及時(shí)通過(guò)昆蟲(chóng)病原線蟲(chóng)、微生物殺蟲(chóng)劑等生物方法加強(qiáng)對(duì)幼蟲(chóng)的防治和預(yù)防可以降低對(duì)食用菌產(chǎn)量的影響[21-22]，同時(shí)采用黃色黏蟲(chóng)板、誘蟲(chóng)燈等物理方法誘殺成蟲(chóng)可有效減少蟲(chóng)口基數(shù)[23]。

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收稿日期：2019-08-08

基金項(xiàng)目：現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)（編號(hào)：CARS-20）;江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號(hào)：CX（17）2009]。

作者簡(jiǎn)介：駱 昕（1995—），女，四川萬(wàn)縣人，研究實(shí)習(xí)員，主要從事食用菌蟲(chóng)害防治方面的研究。E-mail：1749292693@qq.com。

通信作者：馬 林，博士，研究員，主要從事食用菌栽培與病蟲(chóng)防控方面的研究。E-mail：malin1590@sina.com。