戚宇琪，郭 杰，郭曉霞

(1.山西省中醫(yī)藥研究院，太原 030012； 2.山西中醫(yī)藥大學(xué)，太原 030024； 3.山西省中醫(yī)院特需內(nèi)分泌科，太原 030012)

肥胖是指人體將過剩能量轉(zhuǎn)化為多余脂肪并積聚在體內(nèi)的一種狀態(tài)。近年來，全球肥胖的發(fā)病率呈逐年增長(zhǎng)趨勢(shì)。至2015年我國(guó)18歲及以上人群的肥胖率已達(dá)11.9%，超重率達(dá)30.1%[1]。2016年中國(guó)超重/肥胖醫(yī)學(xué)營(yíng)養(yǎng)治療專家共識(shí)定義體質(zhì)指數(shù)(body mass index，BMI)為25～29.9 kg/m2為超重，BMI≥30 kg/m2為肥胖[2]。食欲亢進(jìn)是肥胖的重要原因[3]。研究發(fā)現(xiàn)，瘦素和瘦素受體與食欲控制密切相關(guān)[4-5]。瘦素可通過多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑作用于阿片-促黑素細(xì)胞皮質(zhì)素原(proopiomelanocortin，POMC)神經(jīng)元以促進(jìn)其產(chǎn)生抑制食欲的α-促黑色素細(xì)胞刺激素(α melanocyte-stimulating hormone，α-MSH)，同時(shí)亦可作用于刺鼠相關(guān)蛋白(agouti-related peptide，AgRP)/神經(jīng)肽Y(neuropeptide Y，NPY)神經(jīng)元以抑制其產(chǎn)生促進(jìn)食欲的AgRP和NPY[6]。然而，瘦素發(fā)揮作用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑紛繁復(fù)雜，具體機(jī)制尚不明確，目前瘦素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑已成為國(guó)際上研究肥胖及其相關(guān)疾病的熱點(diǎn)方向?，F(xiàn)參考國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，以作用于AgRP/POMC神經(jīng)元的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑為切入點(diǎn)，對(duì)瘦素及瘦素受體在調(diào)節(jié)食欲方面的作用機(jī)制予以綜述，為基于食欲控制的肥胖癥的預(yù)防與治療提供新的思路。

1 瘦素與瘦素受體

瘦素是由肥胖基因編碼、白色脂肪細(xì)胞分泌的一種分子量為16 000的蛋白[7]。1994年有學(xué)者利用定位克隆發(fā)現(xiàn)并成功克隆了位于小鼠第6號(hào)染色體上的ob基因，隨后人與大鼠的ob基因也相繼被克隆，ob基因的表達(dá)產(chǎn)物也被正式命名為L(zhǎng)eptin，中文譯為“瘦素”[8]。在機(jī)體中，瘦素參與調(diào)節(jié)能量代謝、食欲及生長(zhǎng)發(fā)育[9]，瘦素基因敲除會(huì)導(dǎo)致機(jī)體脂肪組織功能異常，繼發(fā)攝食過量和能量消耗減少，引起肥胖[5]。瘦素受體廣泛存在于下丘腦、海馬等中樞神經(jīng)系統(tǒng)和胰島、心臟等外周器官中，瘦素受體本身并不具有酪氨酸激酶活性，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用是通過偶聯(lián)和激活酪氨酸激酶(Janus kinases，JAK)2實(shí)現(xiàn)[10]。白色脂肪細(xì)胞分泌的瘦素透過血腦屏障后與瘦素受體的特異性結(jié)合使瘦素受體分子二聚化以增強(qiáng)其與JAK2的親和力并與JAK2偶聯(lián)，偶聯(lián)的JAK2相互接近，通過其表面酪氨酸的相互作用以完成磷酸化活化，并與受體蛋白上的不同位點(diǎn)結(jié)合，啟動(dòng)相應(yīng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，導(dǎo)致POMC/AgRP神經(jīng)元表達(dá)，進(jìn)而發(fā)揮食欲調(diào)節(jié)的作用。根據(jù)JAK2與瘦素受體蛋白結(jié)合的位點(diǎn)，其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可分為JAK2/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子(signal transduction and activator of transcription，STAT)3途徑、促分裂原活化的蛋白激酶(mitogen activated protein kinase，MAPK)/胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)1/2途徑、胰島素受體底物(insulin receptor substrate，IRS)/磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K)途徑3種[11]。

2 JAK2/STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑

1992年Schindler等[12]在有關(guān)干擾素的研究中首次發(fā)現(xiàn)了STAT蛋白。STA由src同源2區(qū)(srchomology 2 domain，SH2)結(jié)構(gòu)域、卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域、氨基末段結(jié)構(gòu)域、轉(zhuǎn)錄激活域、DNA結(jié)構(gòu)域、酪氨酸激活域6個(gè)功能區(qū)組成，其中對(duì)STAT活化起至關(guān)重要作用的是SH2結(jié)構(gòu)域，其作為一個(gè)高度保守的結(jié)構(gòu)域，首先與磷酸化的瘦素受體特異性結(jié)合，其次在JAKs的作用下實(shí)現(xiàn)STAT的磷酸化活化[13]。JAK2/STAT3途徑于20世紀(jì)90年代初第一次被發(fā)現(xiàn)[14]，活化了的JAK2作用于瘦素受體，使得瘦素受體蛋白上的Tyr1138、Tyr1077被磷酸化，而活化的Tyr1138和Tyr1077與STAT3和STAT5上SH2結(jié)構(gòu)域的特異性結(jié)合導(dǎo)致STAT3、STAT5活化[15]?；罨腟TAT3、STAT5與瘦素受體解離繼而形成異型或同型二聚體，二聚體進(jìn)入細(xì)胞核與位于靶基因上游的反向重復(fù)序列TTCCNGGAA結(jié)合，上調(diào)POMC基因的表達(dá)，下調(diào)AgRP/NPY基因的表達(dá)，轉(zhuǎn)錄并翻譯POMC蛋白，并激活下丘腦弓狀核中的POMC神經(jīng)元，促進(jìn)其產(chǎn)生抑制食欲的α-MSH，發(fā)揮瘦素調(diào)節(jié)食欲的生理學(xué)效應(yīng)[13-15]。在此過程中，促紅細(xì)胞生成素是JAK2/STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的促進(jìn)因子，其可促進(jìn)JAK2、STAT磷酸化[16]；蛋白酪氨酸酶1B則是JAK2/STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的抑制因子，其通過阻斷STAT3與靶基因DNA的結(jié)合，抑制瘦素的生理學(xué)作用，而導(dǎo)致肥胖[17]。

細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(suppressor of cytokine signaling 3，SOCS3)被認(rèn)為是STATs的靶基因，肥胖條件下SOCS3表達(dá)增加則被認(rèn)為是瘦素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和作用受限的主要機(jī)制之一[18]?；罨腟TATs可刺激SOCS3基因的轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄的SOCS3結(jié)合至磷酸化的JAKs和STATs，導(dǎo)致JAK2/STAT信號(hào)通路關(guān)閉，抑制STATs活化，從而產(chǎn)生經(jīng)典的負(fù)反饋通路，阻止JAK2/STAT信號(hào)通路的進(jìn)一步激活[19]。目前對(duì)JAK2/STAT途徑介導(dǎo)的瘦素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究得最多，其通過精細(xì)調(diào)節(jié)瘦素的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)從而控制食欲的方式對(duì)維持機(jī)體能量穩(wěn)態(tài)有至關(guān)重要的作用。

3 MAPK/ERK1/2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑

MAPK/ERK1/2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是MAPK信號(hào)通路中最重要、最為經(jīng)典的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，是目前研究最為透徹的哺乳動(dòng)物細(xì)胞MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路[20]。Sturgill和Ray[21]于1986年在3T3-L1脂肪細(xì)胞提取物中首次檢測(cè)到MAPK，MAPK是一種胰島素激活的絲氨酸/蘇氨酸活性蛋白激酶，其不僅具有磷酸化高分子量多肽的能力，而且在受到特殊信號(hào)分子(如瘦素)刺激后還能通過發(fā)生酪氨酸磷酸化而活化[22]。研究發(fā)現(xiàn)，ERK在瘦素調(diào)節(jié)食欲過程中起重要作用[23]。活化的JAK2作用于瘦素受體，使受體蛋白上的Tyr985磷酸化并與含有SH2的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SH2-containing protein tyrosine phosphatase-2，SHP2)結(jié)合，SHP2在活化的JAK2的作用下實(shí)現(xiàn)磷酸化活化，并活化作為銜接蛋白的生長(zhǎng)因子SH2，活化的SH2與效應(yīng)分子Grb22結(jié)合，激活效應(yīng)子Ras、Raf以及MAPK，使上游信號(hào)分子促分裂原活化的胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1激活，激活的促分裂原活化的胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1以磷酸化的方式活化ERK1/2，活化的ERK1/2入核，轉(zhuǎn)錄并翻譯POMC蛋白，POMC蛋白激活下丘腦中的POMC神經(jīng)元，促進(jìn)其產(chǎn)生抑制食欲的α-MSH，發(fā)揮瘦素控制食欲的生理效應(yīng)[24-25]。SHP2神經(jīng)元特異性缺失則導(dǎo)致小鼠肥胖和瘦素抵抗[26]。

4 IRS/PI3K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑

IRS/PI3K信號(hào)通路參與瘦素活性首先是在IRS缺失小鼠中發(fā)現(xiàn)[27]。研究表明，抑制下丘腦IRS/PI3K信號(hào)通路可抑制瘦素的厭食作用[28]。IRS是參與細(xì)胞因子(如胰島素)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的磷酸化蛋白，其由IRS1～4四個(gè)成員組成，作用是與含有SH2結(jié)構(gòu)域的蛋白結(jié)合，其中經(jīng)過磷酸化而激活的IRS2酪氨酸能同PI3K結(jié)合并影響磷脂代謝[29]。PI3K是肌醇組第3位的脂類激酶，其受到細(xì)胞外刺激時(shí)可產(chǎn)生磷脂酰肌醇磷酸(phosphatidylinositol phosphate，PIP)2和PIP3兩種產(chǎn)物。PI3K廣泛存在于控制食欲的POMC神經(jīng)元和AgRP/NPY神經(jīng)元中，瘦素對(duì)POMC神經(jīng)元和AgRP/NPY神經(jīng)元中的PI3K有相反的作用[30]。瘦素直接增加POMC神經(jīng)元中PI3K的活性，間接抑制AgRP神經(jīng)元中PI3K的活性，相較于瘦素，胰島素可激活兩種神經(jīng)元中的PI3K?；罨腏AK2作用于IRS蛋白，使其與自身調(diào)控亞基p85結(jié)合以激活PI3K[31]。PI3K在瘦素激活途徑中有重要作用，Donato J等[32]全面概述了不同PI3K亞型及其與瘦素和肥胖的關(guān)系。

4.1IRS/PI3K/蛋白激酶B(protein kinase B，PKB/Akt)/叉頭狀轉(zhuǎn)錄因子O1(forkhead box transcription factor O1，F(xiàn)oxO1)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路 激活的PI3K磷酸化活化磷酸肌醇激酶1，而磷酸肌醇激酶1又磷酸化活化Akt，繼而抑制下游的FoxO1。FoxO1是瘦素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的負(fù)向調(diào)節(jié)因子，在營(yíng)養(yǎng)剝奪條件下，F(xiàn)oxO1從細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核轉(zhuǎn)移以增加NPY/AgRP基因的表達(dá)，抑制厭食性POMC的表達(dá)，從而增加了食物的攝入量[27]。Akt通過抑制FoxO1的活性、促進(jìn)STAT3與POMC和AgRP啟動(dòng)子結(jié)合調(diào)控POMC基因和AgRP/NPY基因的表達(dá)，以發(fā)揮瘦素調(diào)節(jié)食欲的作用[17]。腫瘤抑制因子第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因(phosphates and tensin homologue deleted on chromosome ten gene，PTEN)是IRS/PI3K/Akt/Fox01信號(hào)通路的抑制因子，其通過阻止PI3K對(duì)PIP3的催化，阻止PI3K的激活。研究發(fā)現(xiàn)，一方面PTEN的消融可導(dǎo)致瘦素受體中PI3K的激活，通過增加交感神經(jīng)對(duì)腺周白色脂肪組織的流出，導(dǎo)致體脂肪質(zhì)量減少，從而導(dǎo)致白色脂肪組織向褐色脂肪組織轉(zhuǎn)化；另一方面，POMC神經(jīng)元中缺乏PTEN的小鼠通過激活A(yù)TP依賴的K+通道導(dǎo)致肥胖和瘦素抵抗[33]。因此，POMC神經(jīng)元中PIP3水平的慢性升高可能會(huì)干擾下丘腦中瘦素的活性。

4.2IRS/PI3K/離子通道的調(diào)控 激活的PI3K通過開放或閉合細(xì)胞膜上的離子通道控制鉀離子和鈣離子的進(jìn)出。目前已知的POMC和AgRP/NPY神經(jīng)元細(xì)胞膜上的鉀/鈣離子通道有3種：ATP敏感鉀通道(ATP-sensitive potassium channel，KATP)、瞬時(shí)受體電勢(shì)通道(canonical transient receptor potential channel，TRPC)、電壓門控鈣離子通道(voltage-gated calcium channel，VGCC)[34-36]，其中KATP與TRPC作用于鉀離子，分別控制鉀離子的外流與內(nèi)流；而VGCC則作用于鈣離子，控制著鈣離子的內(nèi)流[37]。①KATP：是控制鉀離子內(nèi)流的重要離子通道，其活性與細(xì)胞內(nèi)ATP的水平呈負(fù)相關(guān)[38]。瘦素通過PI3K磷酸化活化PTEN的C端，并抑制PTEN磷酸酶的活性，由此產(chǎn)生PTEN抑制，而PTEN抑制則會(huì)誘導(dǎo)纖維型肌動(dòng)蛋白解聚，從而引起細(xì)胞骨架重構(gòu)，大量ATP被消耗，下丘腦AgRP/NPY神經(jīng)元細(xì)胞膜上控制鉀離子外流的KATP由此激活，鉀離子外流，AgRP/NPY神經(jīng)元細(xì)胞超極化[39]。②TRPC：TRPC控制鉀離子的外流。瘦素通過PI3K磷酸化活化磷脂酶Cγ，最終激活POMC神經(jīng)元上的TRPC4和TRPC5，導(dǎo)致鉀離子外流，POMC神經(jīng)元細(xì)胞去極化[40]。同時(shí)瘦素又通過鈣調(diào)素依賴蛋白激酶/p21激活酶交換因子途徑增強(qiáng)TRPC4和TRPC5向細(xì)胞外轉(zhuǎn)運(yùn)鉀離子的能力，進(jìn)一步促進(jìn)了POMC神經(jīng)元細(xì)胞的去極化[41-43]。PI3K催化亞基p110的選擇性丟失會(huì)抑制PI3K的活化，使該信號(hào)通路不能發(fā)揮調(diào)節(jié)食欲的作用[44]；TRPC5亞基的特異性缺失可阻礙POMC神經(jīng)元的去極化[45]。瘦素亦可通過PI3K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路作用于POMC神經(jīng)元，促進(jìn)白色脂肪褐變，增加能量消耗，減少脂質(zhì)堆積[46]。③VGCC：VGCC是瘦素作用于下丘腦POMC神經(jīng)元的主要靶點(diǎn)，其控制著細(xì)胞膜上鈣離子的內(nèi)流。電壓依賴的VGCC分為高電壓激活鈣通道(high-voltage activated calcium channel，HVA)和低電壓激活鈣通道(low-voltage activated calcium channel，LVA)[47]。瘦素通過PI3K途徑增加POMC神經(jīng)元HVA的電流，降低HVA的激活電壓，最終提高POMC神經(jīng)元的興奮性；另一方面，瘦素通過JAK2/MAPK途徑降低NPY神經(jīng)元HVA的電流以對(duì)其產(chǎn)生抑制作用，最終通過控制食欲降低食物的攝入、減輕體重[48]。

4.3IRS/PI3K/磷酸二酯酶3B(phosphodiesterase-3B，PDE3B)/環(huán)腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate，cAMP)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路 PI3K/PDE3B/cAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是下丘腦瘦素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要途徑。激活的PI3K磷酸化活化磷酸肌醇激酶1以使磷酸肌醇激酶1激活A(yù)kt，最終激活PDE3B，并降低AgRP/NPY神經(jīng)元中cAMP的水平[49]，從而降低AgRP/NPY神經(jīng)元的興奮性[50]，最終減少攝食量。抑制PDE3B的活性可逆轉(zhuǎn)瘦素對(duì)食物攝入和體質(zhì)量的影響，證實(shí)了PDE3B在下丘腦介導(dǎo)的瘦素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的重要作用。PI3K作為瘦素與胰島素信號(hào)通路間的交叉位點(diǎn)，在胰島素信號(hào)通路中亦起重要作用。事實(shí)上，胰島素作用的發(fā)揮大多數(shù)涉及PI3K的激活[51]。胰島素與其受體的結(jié)合可促進(jìn)胰島素受體與其調(diào)控亞基p85結(jié)合，從而促進(jìn)PI3K/PDE3B/cAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的形成，由此也證實(shí)了肥胖與胰島素抵抗的相關(guān)性。

4.4IRS/PI3K/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)/S6激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路 mTOR是一種進(jìn)化上保守的絲氨酸-蘇氨酸激酶，其能感知營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(尤其是氨基酸)，刺激蛋白質(zhì)合成、細(xì)胞生長(zhǎng)及增殖，并抑制自噬。mTOR及其下游靶點(diǎn)S6激酶1廣泛存在于NPY/AgRP神經(jīng)元和POMC神經(jīng)元中?；罨腁kt通過抑制結(jié)節(jié)性腦硬化復(fù)合物-1和2的形成，解除Ras同源物對(duì)mTOR的抑制作用，從而激活下丘腦中的mTOR以刺激S6激酶的磷酸化。研究表明，聯(lián)合應(yīng)用mTOR抑制劑可明顯阻斷瘦素的厭食作用，而瘦素在缺少S6激酶1的小鼠中不能發(fā)揮減少食物攝入量的作用[27]。AMP活化的蛋白激酶是一種細(xì)胞內(nèi)能量傳感器，其在代謝應(yīng)激引起ATP耗竭或細(xì)胞內(nèi)AMP、ADP水平升高時(shí)被激活，一旦激活，則可通過促進(jìn)ATP的分解代謝和抑制ATP的合成代謝保持能量平衡。激活的S6激酶亦可抑制AMP活化的蛋白激酶的活化，繼而抑制AMP下游因子乙酰輔酶A羧化酶的磷酸化活化，以致POMC神經(jīng)元中丙二酰輔酶A的水平升高，丙二酰輔酶A通過抑制肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1的活性降低線粒體的脂肪酸氧化，從而提高細(xì)胞長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A的水平，而長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A水平的升高會(huì)導(dǎo)致患者厭食[52]。

5 結(jié)語和展望

瘦素及其受體在人類食欲調(diào)控中發(fā)揮十分重要的作用，其信號(hào)通路上任何環(huán)節(jié)的異常均會(huì)導(dǎo)致瘦素調(diào)節(jié)食欲的異常，從而導(dǎo)致肥胖，其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路上諸多負(fù)向調(diào)節(jié)因子亦會(huì)阻礙瘦素發(fā)揮食欲調(diào)節(jié)的作用，是肥胖及相關(guān)代謝疾病的危險(xiǎn)因素。目前國(guó)內(nèi)關(guān)于瘦素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究以JAK/STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究得最多，而對(duì)于MAPK及PI3K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究較少，尤其是IRS/PI3K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。IRS/PI3K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可通過改變POMC及AgRP/NPY神經(jīng)元上細(xì)胞膜離子的通透性，使其達(dá)到興奮或抑制的狀態(tài)，其中涉及多種生物化學(xué)反應(yīng)。隨著對(duì)瘦素及其受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究的深入，其機(jī)制將更加明確，POMC及AgRP/NPY神經(jīng)元上瘦素及其受體調(diào)節(jié)食欲的機(jī)制已逐步明確，基于食欲調(diào)控的瘦素相關(guān)的抗肥胖藥物的研發(fā)已展示出良好的前景，PI3K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究也為此類新型抗肥胖藥物的研發(fā)指明了方向，為肥胖及其相關(guān)代謝性疾病的預(yù)防和治療打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。