趙麗霞，彭俊旭，張懷奇，胡育邦，彭粵，任從才

（中山大學(xué)附屬第八醫(yī)院（深圳福田）麻醉科，廣東深圳 518000）

近年來(lái)，2型糖尿病發(fā)病率明顯提高，晚期并發(fā)心血管疾患者的死亡率最高。體外循環(huán)、冠狀動(dòng)脈球囊擴(kuò)張術(shù)以及急性心梗溶栓之后極易出現(xiàn)心肌缺血-再灌注損傷，對(duì)患者預(yù)后及生存質(zhì)量產(chǎn)生嚴(yán)重影響[1,2]。本研究在分子水平將丙泊酚對(duì)II型糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注時(shí)自噬的影響進(jìn)行探討。

1 材料與方法

1.1 分組 選取84只6周齡-8周齡的健康成年雄性SD大鼠，體質(zhì)量在200 g-220 g之間，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為非糖尿病組與2型糖尿病組，每組42只。采用高糖高脂飼料喂養(yǎng)2型糖尿病組大鼠，8周后，給予其30 mg/kg鏈脲佐菌素腹腔內(nèi)注射，對(duì)2型糖尿病模型進(jìn)行誘導(dǎo)。注射完鏈脲佐菌素之后，每周均空腹12 h，采集尾靜脈血，對(duì)空腹血糖進(jìn)行測(cè)定，連續(xù)4周，大鼠2型糖尿病模型誘導(dǎo)成功的標(biāo)準(zhǔn)為血糖高于14 mmol/L，同時(shí)有明顯的胰島素抵抗、多飲、多尿現(xiàn)象出現(xiàn)。

1.2 具體實(shí)驗(yàn)方式 六組大鼠均給予50 mg/kg 10%的水合氯醛腹腔內(nèi)注射，麻醉大鼠之后，再行氣管插管操作，將小動(dòng)物呼吸機(jī)連接起來(lái)，對(duì)其行機(jī)械通氣；采用股靜脈穿刺微量輸液泵對(duì)生理鹽水或者丙泊酚進(jìn)行輸注，將三導(dǎo)聯(lián)心電監(jiān)測(cè)連接，在右側(cè)頸動(dòng)脈行穿刺置管操作，將壓力換能裝置連接起來(lái)，對(duì)左心室壓力進(jìn)行監(jiān)測(cè)。等到大鼠心率以及血壓處于穩(wěn)定狀態(tài)之后，采用右側(cè)臥位，在第3-第5肋間行開(kāi)胸操作，將心包剪開(kāi)，在冠狀動(dòng)脈左前降支走行下方穿6-0絲線，將聚乙烯硬管墊在結(jié)扎線以及心肌之間，將結(jié)扎線收緊之后，能發(fā)現(xiàn)結(jié)扎部位之下的心肌變暗，心電圖顯示出ST段明顯抬高，則說(shuō)明成功缺血；將結(jié)扎線剪開(kāi)置換后，如果心臟表面呈現(xiàn)為紅色，抬高ST段下降50%以上，則表示成功完成再灌注，缺血時(shí)間以及再灌注時(shí)間分別為30 min、2 h；于缺血之前的10 min，DI+P組以及CI+P組均給予6 mg·kg-1·h-1丙泊酚靜脈持續(xù)泵注，其他各組均給予生理鹽水靜脈持續(xù)輸注，DC組以及CC組均只穿線，不需要行結(jié)扎處理。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 19.0處理數(shù)據(jù)，各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定將結(jié)果均行t檢驗(yàn)，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

各組大鼠電鏡下觀察情況分析。再灌注120 min末，電鏡下觀察到各組大鼠心肌組織有超微結(jié)構(gòu)改變出現(xiàn)；CC組心肌細(xì)胞呈現(xiàn)為整齊排列現(xiàn)象，沒(méi)有水腫現(xiàn)象出現(xiàn)，具有完整的線粒體膜；DC組與CC組對(duì)比，細(xì)胞胞排列更加紊亂，水腫輕度，線粒體出現(xiàn)輕度膜、嵴融合不清現(xiàn)象；DI+P組、CI+P組相較于DI組與CI組，心肌細(xì)胞損傷更輕；DI組與CI組心肌細(xì)胞紊亂排列，有高度水腫現(xiàn)象出現(xiàn)，存在空泡樣改變，線粒體嵴和膜斷裂溶解完全消失。

3 討論

cTnT是心肌細(xì)胞特異性抗原，心肌結(jié)構(gòu)蛋白的破壞情況可通過(guò)其在血液中的濃度進(jìn)行反映，且和心肌細(xì)胞損傷之間有密切相關(guān)性。ET是對(duì)心血管功能進(jìn)行調(diào)節(jié)的因子，能對(duì)心血管系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)以及基礎(chǔ)血管張力進(jìn)行有效維持，研究中顯示丙泊酚能促使糖尿病血管內(nèi)皮細(xì)胞功能得到改善[3]。目前臨床上鮮有關(guān)于丙泊酚對(duì)2型糖尿病心肌缺血-再灌注時(shí)自噬產(chǎn)生影響的報(bào)道，本研究結(jié)果顯示，丙泊酚可通過(guò)將自噬抑制蛋白p-mTOR表達(dá)增加，進(jìn)而對(duì)心肌過(guò)度自噬進(jìn)行抑制，促使正常大鼠心肌缺血-再灌注損傷減輕；除此之外，丙泊酚還可以通過(guò)對(duì)心肌過(guò)度自噬進(jìn)行抑制，進(jìn)而將2型糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注損傷減輕。

綜上所述，丙泊酚能將2型糖尿病大鼠以及正常大鼠的心肌缺血-再灌注損傷減輕，為臨床實(shí)踐提供了一定的理論基礎(chǔ)。但是分子機(jī)制淺顯，今后我們將從自噬通路的上游如LncRNA-miR調(diào)控自噬方面研究丙泊酚對(duì)缺血再灌注損傷保護(hù)的分子作用機(jī)制。