高變異藥物指的是一個或多個生物等效性評價指標(biāo)的個體內(nèi)變異性（CV）≥30%的藥物制劑，導(dǎo)致藥物高變異的原因較多，常見的有溶解度低、親脂性高、生物利用度低、過敏反應(yīng)大、制劑因素與飲食時間等[1]。根據(jù)2015年版（第4部）《中華人民共和國藥典》中有關(guān)于《藥物制劑生物利用度和生物等效性指導(dǎo)原則》規(guī)定，對于高變異藥物，如Cmax差異較大但對臨床無較大影響，基于臨床充分理由，可放寬接受范圍，即Cmax范圍可接受程度在69.84%～143.19%之間[2-3]。此外，生物等效性試驗(yàn)成為新藥研發(fā)期間評價質(zhì)量，以及橋接安全性與有效性最為主要的手段，在試驗(yàn)中經(jīng)比較受試制劑與對比制劑相對生物利用度，根據(jù)選定藥動學(xué)參數(shù)、預(yù)設(shè)接受限等，判定二者生物等效性情況[4]。國外已有專項(xiàng)高變異藥物生物等效性評價指導(dǎo)原則，但國內(nèi)比較缺乏，為此值得進(jìn)一步研究與探索。本文借鑒相關(guān)文獻(xiàn)與研究報道，就高變異藥物生物等效性評價中多組試驗(yàn)設(shè)計及其統(tǒng)計情況進(jìn)行了如下初步探索。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2018年1—6月本試驗(yàn)中心接待的受試者60例作為研究對象，納入對象愿意配合研究，無本研究制劑過敏癥，同時排除嚴(yán)重疾病、妊娠期或哺乳期、不愿意配合研究或未能完成試驗(yàn)者。按照隨機(jī)數(shù)表法分為A組與B組，每組30例受試者。A組：男19例、女11例；年齡20～50歲，均值（38.5±4.5）歲；服藥順序RT與TR各15例。B組：男20例、女10例；年齡20～50歲，均值（38.3±4.8）歲；服藥順序RT與TR各15例。兩組前述資料上比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），可比較。

1.2 方法

兩組受試者采取相同的參比制劑、受試制劑處理，A組雙交叉試驗(yàn)結(jié)束1周后，再開始B組雙交叉試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)束后一并完成樣品分析與統(tǒng)計。采取多組試驗(yàn)設(shè)計及統(tǒng)計處理，參考統(tǒng)計模型與置信區(qū)間，具體的計算為：

①（1-2α）% 置信區(qū)間上下限 =100×e（XT-XR）±t0.1，df×DiffSE，其中（XT-XR）指的是對數(shù)轉(zhuǎn)換后受試制劑與參比制劑均數(shù)差，e指的是自然對數(shù)底數(shù)，df指的是殘差自由度，DiffSE指的是均數(shù)差異標(biāo)準(zhǔn)誤。個體內(nèi)變異系數(shù)，S2指的是以e為底自然對數(shù)轉(zhuǎn)換后藥代動力學(xué)參數(shù)。經(jīng)綜合計算方差分析后可得到殘差MSE。

1.3 數(shù)據(jù)分析

本研究數(shù)據(jù)錄入EXCEL表格中，應(yīng)用SPSS21.0處理數(shù)據(jù)，采取百分比%表示計數(shù)資料，實(shí)施χ2檢驗(yàn)，采取均數(shù)（± s）表示計量資料，實(shí)施t檢驗(yàn)，P＜0.05作為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

通過試驗(yàn)設(shè)計與統(tǒng)計分析，顯示多組試驗(yàn)AUC生物等效性評價結(jié)果中，90%置信區(qū)間在84.74%～104.32%之間，符合等效標(biāo)準(zhǔn)，把握度不低于80%，滿足統(tǒng)計要求，具體數(shù)據(jù)可見表1。

3 討論

仿制藥在近幾年發(fā)展快速，高變異藥物生物等效性評價也成為關(guān)注熱點(diǎn)，因個體內(nèi)變異系數(shù)增大，導(dǎo)致受試者例數(shù)也要相應(yīng)增加，才能滿足試驗(yàn)要求[5]。盡管可采取重復(fù)交叉設(shè)計與成組序貫設(shè)計，或統(tǒng)計時放寬等效性界限，但都有一定的難度[6]。結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)與過去試驗(yàn)設(shè)計，現(xiàn)就一種高變異藥物生物等效性評價多組試驗(yàn)設(shè)計及統(tǒng)計進(jìn)行了分析。

3.1 高變異藥物生物等效性試驗(yàn)設(shè)計特點(diǎn)分析

藥代動力學(xué)參數(shù)（Cmax與AUC）個體內(nèi)變異系數(shù)（intra subject CV%）超過30%則將其視為高變異藥物。在過去，生物等效性試驗(yàn)設(shè)計受試者一般控制在18～24例，但個體內(nèi)變異性較大的藥物，常規(guī)試驗(yàn)例數(shù)難以滿足統(tǒng)計學(xué)需求，同時部分高變異藥物經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)交叉試驗(yàn)時，藥物個體內(nèi)變異系數(shù)超過30%，制劑之間差異5%，需要的例數(shù)不能低于38例才能≥80%的把握度，如超過40%，則需要68例，當(dāng)超過50%，需要的例數(shù)應(yīng)達(dá)到106例，可見個體內(nèi)變異性較大會影響試驗(yàn)例數(shù)，這是必須明確與掌握的規(guī)則[7]。從近幾年相關(guān)報道和文獻(xiàn)中得知，變異性較高的藥物生物等效性評價時增加受試者例數(shù)依舊是最為簡單與有效的方式，但是操作難度較大，因?yàn)閭惱韺W(xué)與試驗(yàn)管理等方面問題較多[8-10]。試驗(yàn)往往屬于研究機(jī)構(gòu)開展，因臨床試驗(yàn)研究機(jī)構(gòu)能力有限，每次接受的最大被試在50例以下，而一些變異性較大的藥物需50例以上被試，這就導(dǎo)致難以有效實(shí)施。這個問題也是目前需要解決的障礙之一。

3.2 生物等效性多組試驗(yàn)設(shè)計思路

按照標(biāo)準(zhǔn)生物等效性試驗(yàn)設(shè)計來看，若比較兩種制劑，通常采取雙周期、雙處理，以及兩序列的方式交叉設(shè)計，被試者分成兩組，采取隨機(jī)分組的方式，其中一組被試先服用受試制劑，然后服用參比制劑，另外一組服用藥物順序則剛好相反。因自身也進(jìn)行交叉對照試驗(yàn)，使得制劑因素對藥物吸收影響和其他的因素之間區(qū)分開來，從而減少不同試驗(yàn)周期與個體差異影響試驗(yàn)結(jié)果。在FDA指導(dǎo)原則中明確指出，在一次研究被試數(shù)量有限時，可采取兩組或多組試驗(yàn)的方式處理[11]。當(dāng)然，若試驗(yàn)時間不同，同一研究機(jī)構(gòu)根據(jù)相同試驗(yàn)方案執(zhí)行多組標(biāo)準(zhǔn)雙交叉生物等效性試驗(yàn)，好比單個獨(dú)立的試驗(yàn)，結(jié)果也有所差異，但可將各組試驗(yàn)結(jié)果合并，從而得出整體性結(jié)論。這種設(shè)計在樣本量較大試驗(yàn)中比較適用，比如個體內(nèi)變異系數(shù)超過50%時所需被試106例以上，可分為三組，每組36例，或者分為四組，每組27例。這種設(shè)計的優(yōu)勢在于，每組人員數(shù)量可根據(jù)研究機(jī)構(gòu)能力進(jìn)行調(diào)整，同時可分為幾個時期對不同試驗(yàn)組別進(jìn)行試驗(yàn)，管理更容易，被試者脫落也極易控制，最終可達(dá)到大樣本試驗(yàn)的效果，提高了把握度，若產(chǎn)品真實(shí)等效，可大概率通過等效置信區(qū)間[12]。在本次研究中提及的案例例數(shù)為60例，可直接分為兩組進(jìn)行試驗(yàn)，從結(jié)果中看出多組試驗(yàn)AUC生物等效性評價結(jié)果中，90%置信區(qū)間在84.74%～104.32%之間，符合等效標(biāo)準(zhǔn)，把握度不低于80%，滿足統(tǒng)計要求。

綜上所述，多組試驗(yàn)設(shè)計可增加把握度，可促進(jìn)試驗(yàn)管理，設(shè)計的統(tǒng)計模型在階段設(shè)計、多中心設(shè)計等生物等效性評價中均可應(yīng)用。

表1 本研究多組試驗(yàn)AUC生物等效性評價相關(guān)結(jié)果