黃 琦，廖 鑫，王 攀，徐尚福

1.遵義醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院 核醫(yī)學(xué)科(遵義 563000)；2.遵義醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院 內(nèi)分泌科(遵義 563000)；3.遵義醫(yī)科大學(xué) 基礎(chǔ)藥理教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(遵義 563000)

糖尿病腎病 (diabetic kidney disease, DKD)是2型糖尿病患者常見且嚴(yán)重的慢性血管并發(fā)癥，中國(guó)住院糖尿病患者的DKD患病率為33.6%[1]。 DKD早期診斷并經(jīng)治療后多可緩解，延緩其發(fā)展成終末期腎病。因此，早期診斷DKD對(duì)糖尿病管理顯得尤為重要。目前，臨床早期篩查以尿微量白蛋白(microalbuminuria, MAU)或尿蛋白/肌酐比值作為診斷2型糖尿病腎損害的指標(biāo)。近年來(lái)，血清胱抑素C(CysC)在DKD中的診斷價(jià)值逐漸得到認(rèn)可，目前已應(yīng)用于臨床生化檢測(cè)[2-3]。本研究擬觀察2型糖尿病不同尿蛋白排泄?fàn)顟B(tài)下，患者血清趨化素(chemerin)和CysC水平，探討血清chemerin與CysC水平的相關(guān)性，為臨床應(yīng)用血清chemerin檢測(cè)協(xié)助診斷DKD提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2017年1月至2018年9月于遵義醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科住院的2型糖尿病患者共104例，其中，男53例，平均年齡(54.5 ± 8.2)歲；女51例，平均年齡(52.6 ± 9.4)歲。2型糖尿病納入標(biāo)準(zhǔn)：參照《中國(guó)2型糖尿病防治指南》2017版，采用1999 年世界衛(wèi)生組織(WHO)診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)1型糖尿??；2)慢性腎小球腎炎；3)尿路感染；4)高血壓；5)心臟?。?)肝臟疾??；7)妊娠；8)近期服用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑和(或)血管緊張素受體拮抗劑者。根據(jù)24 h尿微量白蛋白(urinary microalbuminuria, U-mAlb)量，將2型糖尿病患者分為3組：正常蛋白尿組(24 h U-mAlb<30 mg)(n=35)、微量蛋白尿組(24 h U-mAlb：30～300 mg)(n=35)和大量蛋白尿組(24 h U-mAlb>300 mg)(n=34)。另外，隨機(jī)選擇年齡、性別匹配的健康者35例作為對(duì)照組。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料收集 收集入組者相關(guān)臨床資料，主要包括性別、年齡、身高、體重、體重指數(shù)(BMI)、既往病史等。

1.2.2 血生化指標(biāo)及24 h U-mAlb檢測(cè) 受試者禁食8～10 h后清晨采靜脈血，應(yīng)用Olympus (AU2700) 全自動(dòng)分析儀分析測(cè)定空腹血糖(FBG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、CysC。高壓液相法檢測(cè)糖化血紅蛋白(HbA1c)；收集24 h尿，應(yīng)用美國(guó)Beckman Coulter IMMAGE 全自動(dòng)免疫分析儀測(cè)定24 h U-mAlb量。

1.2.3 血清chemerin檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法測(cè)定血清chemerin濃度，試劑盒購(gòu)自美國(guó)R&D公司；選擇450 nm 波長(zhǎng)用i-mark酶標(biāo)儀(美國(guó)Bio-rad公司)測(cè)量各OD值，經(jīng)計(jì)算換算得出血清濃度值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 各組間血生化指標(biāo)比較

正常蛋白尿組、微量蛋白尿組、大量蛋白尿組HbA1c均高于對(duì)照組 (P<0.05)；大量蛋白尿組BUN、Cr、CysC、chemerin和24 h U-mAlb均較對(duì)照組、正常蛋白尿組及微量蛋白尿組明顯升高 (P<0.05)；微量蛋白尿組chemerin較正常蛋白尿組及對(duì)照組明顯升高 (P<0.05)(表1)。

表1 不同蛋白尿組及對(duì)照組生物標(biāo)記物水平的比較

注：與對(duì)照組比較，*P< 0.05；與正常蛋白尿組比較，△P<0.05；與微量蛋白尿組比較，#P<0.05

2.2 chemerin、CysC 與其他變量的相關(guān)性

以CysC為因變量，與其他變量進(jìn)行Pearson相關(guān)分析， CysC與BUN(r=0.848，P<0.05)、Cr(r=0.930，P<0.05)、chemerin(r=0.336，P<0.05)、24 h U-mAlb (r=0.390，P<0.05) 呈正相關(guān)。CysC與HbA1c無(wú)相關(guān)性 (r=-0.032，P>0.05)。以chemerin為因變量，與其他變量進(jìn)行Pearson相關(guān)分析， chemerin與BUN(r=0.312，P<0.05)、Cr(r=0.359，P<0.05)、CysC (r=0.336，P<0.05)、 24 h U-mAlb (r=0.518，P<0.05) 呈正相關(guān)。chemerin與HbA1c無(wú)相關(guān)性 (r=0.244，P>0.05)。

2.3 多元線性回歸分析

多元線性回歸分析顯示，血清chemerin水平與24 h U-mAlb獨(dú)立相關(guān)(β=0.401，P=0.004)(表2)。

表2 多元線性回歸分析結(jié)果

3 討論

CysC于1979年首次被發(fā)現(xiàn)，1985年被提出作為腎小球?yàn)V過(guò)率標(biāo)記物，它是由122個(gè)氨基酸組成的13.3 KD的非糖基化的堿性蛋白質(zhì)，具有相對(duì)小的分子量和相對(duì)較高的等電位點(diǎn)，能夠通過(guò)腎小球自由濾過(guò)，在腎小管上皮細(xì)胞被重吸收，然后分解、代謝。CysC基因及其啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)分析顯示，該基因是一種管家型基因，即使在炎癥條件下也能穩(wěn)定產(chǎn)生。血或尿中CysC是一種已應(yīng)用與臨床的評(píng)估腎功能的內(nèi)源性標(biāo)志物[5-8]。本研究也同樣觀察到在2型糖尿病腎病患者中，CysC不同程度增高，且與BUN、Cr、24 h U-mAlb呈正相關(guān)。

chemerin是Nagpal等于1997年治療銀屑病時(shí)發(fā)現(xiàn)的一種脂肪因子，主要在脂肪、胰腺、肝臟、肺臟、腎上腺、卵巢、腎臟等表達(dá)。研究[9-11]表明，chemerin通過(guò)募集炎性細(xì)胞、氧化應(yīng)激、參與糖脂代謝及影響腎臟血流動(dòng)力學(xué)等諸多效應(yīng)參與DKD的發(fā)生和發(fā)展?；仡櫺苑治? 082名受試者的研究[12]表明，血清chemerin水平與eGFR之間有呈密切的負(fù)相關(guān)，血清chemerin水平的升高與患病腎臟對(duì)chemerin的腎清除受損有關(guān)。在本研究中,同樣觀察到DKD患者微量蛋白尿組及大量蛋白尿組chemerin明顯較對(duì)照組升高，且隨著尿蛋白量增加而升高。進(jìn)一步的相關(guān)分析顯示，chemerin和CysC均與Cr、24 h U-mAlb密切相關(guān)；多元回歸分析顯示，血清chemerin水平與24 h U-mAlb獨(dú)立相關(guān)。這表明chemerin水平的監(jiān)測(cè)在DKD診斷中同樣具有重要的臨床診斷參考價(jià)值，可與CysC一樣作為DKD診斷的生物學(xué)標(biāo)志物。在DKD的診斷除了結(jié)合病史外，需動(dòng)態(tài)聯(lián)合監(jiān)測(cè)U-mAlb、尿蛋白與肌酐比值、血Cr、血清CysC水平加以判斷。聯(lián)合診斷能更好的早期診斷DKD，從而使患者得到干預(yù)及治療，延緩其進(jìn)展至終末期腎病，減輕患者的痛苦及醫(yī)療負(fù)擔(dān)。

本研究尚存在一定不足，由于受到住院時(shí)限影響，未能動(dòng)態(tài)檢測(cè)尿微量白蛋白及血清學(xué)指標(biāo)，只是從橫斷面進(jìn)行初步的臨床觀察研究。后續(xù)擬進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察。

綜上所述，血清chemerin、CysC與DKD的24 h U-mAlb密切有關(guān)，兩者均可作為DKD診斷的參考指標(biāo)，血清chemerin可作為DKD診斷的新標(biāo)志物。臨床可選擇聯(lián)合檢測(cè)血清chemerin、CysC、24 h U-mAlb和Cr，早期篩查、診斷DKD。