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        水產(chǎn)品中特定腐敗菌分析技術(shù)的研究進(jìn)展

        2019-02-15 15:18:25邢家溧徐曉蓉丁源鄭睿行張書芬李湘江沈堅(jiān)李和生
        食品研究與開發(fā) 2019年4期
        關(guān)鍵詞:高通量單胞菌水產(chǎn)品

        邢家溧,徐曉蓉,丁源,鄭睿行,*,張書芬,李湘江,沈堅(jiān),李和生,*

        (1.寧波市食品檢驗(yàn)檢測研究院,浙江寧波315000;2.寧波大學(xué),浙江寧波315211)

        近年來,隨著人們生活水平的提高,人們的飲食習(xí)慣呈現(xiàn)出多元化的趨勢,從之前的單一飲食品種逐漸改變?yōu)楝F(xiàn)在的飲食品種多樣化,水產(chǎn)品在我國國民的膳食占比中的比例正在不斷增加[1]。除此之外,由于我國在近幾年來已經(jīng)成為了世界水產(chǎn)品養(yǎng)殖和貿(mào)易出口大國,水產(chǎn)品的養(yǎng)殖產(chǎn)量占全世界的70%,其出口額已連續(xù)6年位居世界第一[2],其產(chǎn)量已經(jīng)連續(xù)24年位居世界第一[3]。水產(chǎn)品不僅擁有豐富的營養(yǎng)優(yōu)質(zhì)蛋白,同時(shí)還具有比較鮮美的味覺享受,因此其備受消費(fèi)者們的青睞[4]。由于目前我國居民的人均收入在不斷的提高,所以人們對健康的生活理念也越來越看重,更多的消費(fèi)者已經(jīng)越來越重視食品的質(zhì)量安全問題[5]。但是新鮮的水產(chǎn)品中往往因?yàn)楹休^多的水分、可溶性蛋白質(zhì)和不飽和脂肪酸而容易氧化,再加上目前水產(chǎn)品保藏保鮮技術(shù)還不夠完善等問題,使得水產(chǎn)品相比于其他一般的動(dòng)物肉制品更容易腐敗變質(zhì)[6],從而會(huì)對經(jīng)濟(jì)造成較大的損失,引起不必要的浪費(fèi)[7-8]。除此以外,微生物也是大多數(shù)水產(chǎn)品腐敗的主要原因,從而縮短水產(chǎn)品的貨架期,如果能在水產(chǎn)品的貯藏過程中對其特定腐敗菌進(jìn)行控制即可有效延長貨架期[9]。水產(chǎn)品中優(yōu)勢腐敗菌種類一般與水產(chǎn)品類別有關(guān),不同類別之間存在較大差異,因此僅依靠傳統(tǒng)培養(yǎng)鑒定微生物的方法對于大批量研究水產(chǎn)品優(yōu)勢菌并不合理。所以,對水產(chǎn)品特定腐敗菌的分析技術(shù)進(jìn)行研究顯得尤為必要。這不僅能為水產(chǎn)品中優(yōu)勢菌的研究提供技術(shù)支持,也能提高水產(chǎn)品優(yōu)勢菌研究的效率,具有一定的經(jīng)濟(jì)效益。目前,國內(nèi)外研究水產(chǎn)品優(yōu)勢菌的技術(shù)主要有基因組指紋(polymerase chain reaction-repetitive extra-genic palindromic,Rep-PCR)分析技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)變性梯度凝膠電泳(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)分析技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)溫度梯度凝膠電泳(polymerase chain reaction-temperature gradient gel electrophoresis,PCR-TGGE) 分析技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)限制性片段長度多態(tài)性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCRRFLP)分析技術(shù)和高通量測序,本文就這幾種技術(shù)的應(yīng)用現(xiàn)狀及各自存在的優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行綜述,以期為水產(chǎn)品的優(yōu)勢菌研究提供一定的參考作用。

        1 特定腐敗菌

        1.1 特定腐敗菌的概念及特征

        20世紀(jì)末特定腐敗菌(specific spoilage organism,SSO)的概念被首次提出,國外研究人員[10-13]對造成水產(chǎn)品品質(zhì)下降的微生物進(jìn)行研究后,發(fā)現(xiàn)不同的水產(chǎn)品含有的菌相是有差異的,并且起腐敗作用的菌類也并非是水產(chǎn)品含有的所有微生物。研究表明,引起水產(chǎn)品腐敗的微生物只是所含有微生物中的某幾類在參與腐敗的過程,這就是該水產(chǎn)品的特定腐敗菌[14]。Dalgaard等[15]認(rèn)為食品的種類不同,其所受的環(huán)境影響因子也不同,這意味著只有適合該環(huán)境條件的特定腐敗菌才會(huì)比其他微生物更容易生長,在水產(chǎn)品的腐敗過程中不僅能夠逐漸占據(jù)優(yōu)勢地位,還具有較強(qiáng)腐敗活性,從而加快水產(chǎn)品的腐敗。特定的微生物針對特定食品的腐敗,即該食品特定的腐敗微生物[16]。水產(chǎn)品腐敗變質(zhì)的主要表現(xiàn)為其攜帶的特定致腐微生物在生長和代謝過程中生成了一些不良物質(zhì),從而使得水產(chǎn)品在感官上出現(xiàn)了不被消費(fèi)者所接受的氣味、觸感和色澤,這些物質(zhì)主要包括會(huì)產(chǎn)生異味的胺類、硫化物、有機(jī)酸等[17]。

        1.2 水產(chǎn)品中的特定腐敗菌

        新鮮水產(chǎn)品中的特定腐敗菌,其含有的細(xì)菌總數(shù)在貯藏前期所占的比例并不大,但是在貯藏過程中會(huì)由于SSO適應(yīng)了所處的環(huán)境,細(xì)菌數(shù)目會(huì)隨貯藏時(shí)間的延長而增加,直至細(xì)菌對數(shù)增長期的出現(xiàn),以至于在貯藏的中后期水產(chǎn)品中的菌落總數(shù)呈迅速增加狀態(tài)[18]。不同的水產(chǎn)品中含有不同的SSO,有試驗(yàn)結(jié)果表明,造成新鮮水產(chǎn)品腐敗的SSO主要是附于其表面的腐敗微生物,這類微生物多為水產(chǎn)品捕撈之前所處環(huán)境中存在的細(xì)菌,其中淡水環(huán)境中主要包括黃綠假單胞菌、桿菌、棒狀桿菌、黃桿菌、芽孢桿菌和沙雷氏菌等;海水產(chǎn)品含有的腐敗菌主要為假單胞菌、無色桿菌、黃桿菌、弧菌、腸桿菌等[19],但是一般情況下,處于相同環(huán)境中的同種水產(chǎn)品含有的特定腐敗菌也許只存在一種。

        水產(chǎn)品經(jīng)捕撈上岸后,為了保證其新鮮度通常都會(huì)被貯藏在溫度較低的環(huán)境中,通過早前的研究發(fā)現(xiàn),低溫貯藏水產(chǎn)品的腐敗菌主要有:磷發(fā)光桿菌(Photobacterium phosphoreum)、腐敗希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens)、假單胞菌屬(Pseudomonas spp.)等[20-21]。這幾種細(xì)菌都屬于革蘭氏陰性桿菌,其中腐敗希瓦氏菌和磷發(fā)光桿菌都具備將氧化三甲胺(trimetlylamine oxide,TMAO) 還原成三甲胺(trimetlylamine,TMA)的能力,導(dǎo)致水產(chǎn)品出現(xiàn)魚腥惡臭味[6]。一些水產(chǎn)品可能只含有其中的一種SSO,不同棲息水域的不同的水產(chǎn)品所含有的特定腐敗菌種類可能存在較大差異。

        2 水產(chǎn)品特定腐敗菌分析技術(shù)的研究

        微生物群落多樣性由物種多樣性、遺傳多樣性和功能多樣性組成[22]。其中遺傳多樣性是研究微生物類別的重要關(guān)鍵點(diǎn)。由于細(xì)菌的16S核糖體脫氧核糖核酸(16S ribosome deoxyribonucleic acid,16SrDNA)的保守區(qū)具備共通性,因此可用于設(shè)計(jì)通用引物。此外,其可變區(qū)的特異性可用來鑒別菌種種類。換言之,16SrDNA是樣品總細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)分析的分子基礎(chǔ)。所以采用16SrDNA作為目的序列對各樣品中的微生物進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析、鑒定和比對是較為快速與簡便的方法[23]。16S核糖體核糖核酸(16S ribosome ribonucleic acid,16SrRNA)基因存在于所有的細(xì)菌中,功能同源并且分子大小適宜操作,序列變化與進(jìn)化距離相等,在系統(tǒng)進(jìn)化中既高度保守又有可變性,這些特點(diǎn)使其在細(xì)菌鑒定、分類和菌落多樣性的研究中被廣泛應(yīng)用[24]。由于16SrRNA和16SrDNA的保守性和特異性,隨著聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)的發(fā)展,兩者相互促進(jìn)成為在微生物多樣性的研究中常用來作為物種鑒定的重要手段[9]。

        2.1 Rep-PCR指紋分析技術(shù)

        近年來利用細(xì)菌基因組指紋分析方法,即細(xì)菌基因組重復(fù)序列PCR技術(shù)(repetitive extra-genic palindromic,Rep-PCR)擴(kuò)增細(xì)菌基因組中廣泛分布的短重復(fù)序列,通過瓊脂糖電泳條帶比較分析,揭示基因組間的差別[9]。Rep-PCR可以采用多種引物進(jìn)行擴(kuò)增[25-27],與擴(kuò)增序列進(jìn)行比對,聚類分析其指紋數(shù)據(jù),用來擴(kuò)充菌株指紋圖譜。如大腸埃希氏菌[9](E.coli)[28]、嗜糞紅球菌(Rhodococcus coprophilus)和脆弱擬桿菌HSP40噬菌體(Bacteroides fragilis HSP40 phages)[29],雙歧桿菌屬[30](Bifidobacterium spp)、產(chǎn)氣莢膜梭菌[31-33](Clostridium perfringens),F(xiàn)+RNA 糞便大腸桿菌噬菌體(faecali+RNA coliphages,F(xiàn)+RNA coliphages)[34]并結(jié)合微生物源示蹤技術(shù)(microbial source tracking,MST)[35-36],已演變?yōu)闄z測細(xì)菌的一種重要分子技術(shù)。Lin C W等[37]利用脈沖場凝膠電泳(pulse-field gel electrophoresis,PFGE)和3種簡單的Rep-PCR方法[即腸細(xì)菌重復(fù)基因間共有序列 PCR(enterobacterial repetitive intergenic consensus-PCR,ERIC-PCR),以BOX插入因子(細(xì)菌基因組重復(fù)序列)為基礎(chǔ)的PCR技術(shù)BOX-PCR和重復(fù)基因外回文PCR(Rep-PCR)對評估20株嗜麥芽窄食單胞菌分離株遺傳相關(guān)性進(jìn)行了比較。在該研究中發(fā)現(xiàn),與PFGE相比,ERIC-PCR表現(xiàn)出較低的區(qū)分能力,但是BOX-PCR與Rep-PCR對近親遺傳相關(guān)的分離物具有比較明顯的區(qū)分程度。這表明BOX-PCR與Rep-PCR是評估嗜麥芽窄食單胞菌分離菌株遺傳相關(guān)性較為簡單便捷的方法,該研究為探索嗜麥芽窄食單胞菌的流行病學(xué)提供了更為簡便的分析技術(shù)。Mohammadjavad Paydar[38]等利用Rep-PCR分析技術(shù)對采購于馬來西亞不同地點(diǎn)的150份海鮮樣本的副溶血性弧菌分離株進(jìn)行了分析,這些海鮮樣品包括魚、小蝦、明蝦、蜊、牡蠣、蛤和烏賊。試驗(yàn)結(jié)果表明,使用Rep-PCR技術(shù)來表征副溶血性弧菌分離株可以觀察到41個(gè)Rep譜,并且所有分離株在80%的相似性下被分類為11個(gè)不同的簇,該研究中副溶血性弧菌的DNA指紋圖譜顯示了分離株間的高度遺傳多樣性,并且Rep-PCR能夠區(qū)分具有不同病毒型的分離株。這表明Rep-PCR技術(shù)不僅可以用來區(qū)分不同分離株的細(xì)菌,還可以用來區(qū)分不同病毒型的分離株,并且操作方法相對來說較為簡便,可以為水產(chǎn)品特定腐敗菌分離菌株的研究提供一定的參考價(jià)值。

        2.2PCR-DGGE和PCR-TGGE分析技術(shù)

        基因指紋技術(shù)還包括變性梯度凝膠電泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)和溫度梯度凝膠電泳[39](temperature gradient gel electrophoresis,TGGE),其原理是利用DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的特異性和穩(wěn)定性結(jié)合變性聚丙烯酞胺凝膠電泳方法來分析細(xì)菌16SrDNA片斷擴(kuò)增產(chǎn)物,分析微生物區(qū)系多樣性與優(yōu)勢性[40]。DGGE技術(shù)雖然從發(fā)明[41]到首次應(yīng)用之間經(jīng)歷了短短幾十年[42],但其在微生物群落的多樣性和種群差異性的檢測方面都有著十分顯著的優(yōu)勢。單獨(dú)采用聚丙烯酞胺凝膠電泳只能依據(jù)雙鏈DNA分子的正負(fù)性分離出差別較明顯的條帶,但片段長短相同,堿基排列順序不同的DNA分子卻無法被辨別,這就為鑒別微生物群落多樣性造成諸多不便。但考慮到DGGE/TGGE技術(shù)因?yàn)榧尤肓艘欢康淖冃栽噭纾耗蛩睾腿ルx子甲酞胺或者是設(shè)置一系列的溫度梯度,以此就能達(dá)到把相同大小片段但堿基組成不同的DNA片段區(qū)分開的目的。這是由于不同細(xì)菌的DNA片段有其特定的DNA解鏈區(qū)域及解鏈規(guī)律[43-44]。DGGE的方法己經(jīng)成功應(yīng)用于對養(yǎng)殖雜色鮑腸道微生物菌群的分析中[45]。如比較健康鮑腸道和病鮑腸道微生物組成和差異的研究中比較分析4個(gè)成長階段中雜色鮑腸道微生物組成和差異[46]。張新林等[47]利用PCR-DGGE技術(shù)對三文魚在冷鏈貯運(yùn)4℃條件下的腐敗機(jī)制,通過DGGE指紋圖譜顯示,三文魚在貯藏期間微生物多樣性逐漸降低,通過分析得知假單胞菌屬和希瓦氏菌在貯藏過程中漸漸成為優(yōu)勢腐敗菌。該試驗(yàn)結(jié)果表明通過PCRDGGE技術(shù)可以確定4℃三文魚的特定優(yōu)勢腐敗菌。王慧敏等[48]利用PCR-DGGE分析技術(shù)和傳統(tǒng)菌落計(jì)數(shù)方法對處于微凍和冷藏環(huán)境中的鱸魚的優(yōu)勢腐敗菌進(jìn)行了分析對比。從DGGE圖譜和菌落計(jì)數(shù)中都表明,鱸魚在上述兩種環(huán)境中產(chǎn)H2S菌和假單胞菌都呈現(xiàn)出最快的增長速率,并且發(fā)現(xiàn)鱸魚的SSO為腐敗希瓦氏菌和假單胞菌。由此可見,PCR-DGGE技術(shù)在水產(chǎn)品優(yōu)勢腐敗菌分析方面已經(jīng)具備了較為成熟的應(yīng)用實(shí)例,這表明PCR-DGGE的應(yīng)用能夠?yàn)榻⑽⑸锷L貨架期模型提供理論基礎(chǔ)。但是目前利用PCRTGGE技術(shù)來分析水產(chǎn)品優(yōu)勢菌群的研究還比較欠缺,但是對其他食品的研究還是存在應(yīng)用實(shí)例的,例如顧彩東[49]應(yīng)用PCR-TGGE技術(shù)比較了不同熱處理對牛乳殺菌效果;葉姜瑜等[50]利用PCR-TGGE技術(shù)對處理聚甲醛廢水的污水反應(yīng)器中的微生物群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分析,并且取得較理想的試驗(yàn)結(jié)果,這些例子表明利用PCR-TGGE分析技術(shù)對水產(chǎn)品中的優(yōu)勢菌群進(jìn)行分析也具有較大的應(yīng)用前景,可以為水產(chǎn)品菌群的分析提供進(jìn)一步的技術(shù)支持。

        2.3 PCR-RFLP分析技術(shù)

        限制性片段長度多態(tài)性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)技術(shù)是在1980年由人類遺傳學(xué)家Bostein提出[9]。RFLP是進(jìn)行基因組研究的基礎(chǔ),目前主要被廣泛應(yīng)用于基因定位、生物進(jìn)化、基因組遺傳圖譜構(gòu)建等的研究[9]。限制性內(nèi)切酶的特異性對微生物基因組DNA片段的有效切割產(chǎn)生了阻礙作用。但是將PCR技術(shù)與RFLP分析有機(jī)地結(jié)合在一起則可以得到簡單有效的分子圖譜,該技術(shù)稱為PCRRFLP。用于這一目的的特定基因主要為核糖體RNA基因,其中又以16SrDNA PCR-RFLP的方法最為簡便且成熟,因此被廣泛應(yīng)用。其中對根瘤基因、固氮基因、冷藏豬肉的菌相[51]和江口菌相[52]研究都取得了較好的成效。除此之外,Juvonen等[53]利用特異組PCR-RFLP和實(shí)時(shí)PCR的方法來檢測和鑒別啤酒中含有厭氧腐敗菌梭狀芽胞桿菌。該試驗(yàn)主要通過設(shè)計(jì)16SrRNA基因324-bp可變區(qū)的一對特異性引物,并用凝膠電泳和SYBR Green I染料進(jìn)行實(shí)時(shí)PCR來評估終點(diǎn)PCR,試驗(yàn)的目的是為了開發(fā)和評估用于檢測和區(qū)分啤酒中腐敗菌的群體特異性PCR方法,該試驗(yàn)結(jié)果表明,利用PCR方法測得的試驗(yàn)結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果相比很大程度上一致,但是PCR方法更為敏感,該開發(fā)的PCR方法可以在單個(gè)反應(yīng)中檢測到9種所有啤酒腐敗菌,并且能夠在組群水平之下進(jìn)行分化,減少了分析時(shí)間,如果把這一方法加以改進(jìn)后應(yīng)用于水產(chǎn)品的腐敗菌種鑒別和分析將會(huì)提高水產(chǎn)品中腐敗菌分析的效率。潘子強(qiáng)等[54]利用16SrDNA克隆文庫結(jié)合RFLP技術(shù)探討了導(dǎo)致冷藏真空包裝脆肉鯇魚的SSO。試驗(yàn)結(jié)果表明,冷藏腐敗的真空包裝脆肉鯇魚中含有12種不同分型的細(xì)菌類別,該條件下的SSO主要為分型1和2,占克隆子數(shù)的58.92%;通過序列比對以及構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹分析顯示,大部分克隆子的序列與氣單胞菌(Aeromonas sp.)的16SrDNA序列有著最大的相似性,這表明真空包裝脆肉鯇魚冷藏的SSO是氣單胞菌(Aeromonas sp.)。這說明利用16SrDNA結(jié)合RFLP技術(shù)可以簡單快速的確定水產(chǎn)品中的SSO。

        2.4 高通量測序技術(shù)

        高通量測序技術(shù)主要包括羅氏454公司的GS FLX測序平臺(tái)、Illumina公司的Solexa Genome Analyzer測序平臺(tái)和ABI公司的Solid測序平臺(tái)[55]。高通量測序技術(shù)具有產(chǎn)出量高、耗費(fèi)少、測序精確且自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)[24]。454測序技術(shù)以焦磷酸測序?yàn)樵?,它不同于其他高通量測序平臺(tái)的顯著特點(diǎn)是讀長較長。目前GS FLX測序系統(tǒng)的序列讀長已不低于400 bp,對于從頭測序等需要長reads的操作,它是較為理想的選擇。Solid是借助于連接反應(yīng)進(jìn)行的測序平臺(tái),其基本原理是通過把四色熒光標(biāo)記的寡核苷酸進(jìn)行多次連接合成,進(jìn)而代替?zhèn)鹘y(tǒng)的聚合酶連接反應(yīng)。超高通量是Solid系統(tǒng)最顯著的特征。Solexa Genome Analyzer測序平臺(tái)是采用測序、合成同時(shí)進(jìn)行的原理,實(shí)現(xiàn)樣本制備的機(jī)械化和大規(guī)模的平行測序,是一種較低運(yùn)行成本,較高性價(jià)比的高通量測序技術(shù)。

        高通量測序技術(shù)目前己經(jīng)被廣泛的運(yùn)用于微生物的研究中。如張芹等[56]利用高通量測序技術(shù)研究高糖飲食對小鼠腸道菌群的影響。江艷華等[57]通過高通量測序?qū)A藏于4、15、25℃的蝦夷扇貝柱菌群結(jié)構(gòu)及優(yōu)勢腐敗菌進(jìn)行了分析,試驗(yàn)結(jié)果表明,4℃的SSO為發(fā)光桿菌屬(Photobacterium)、別弧菌屬(Aliivibrio)和假交替單胞菌屬(Pseudoalteromonas),分別占46.91%、36.82%、11.01%;15℃的SSO為發(fā)光桿菌屬(Photobacterium,46.97%)和別弧菌屬(Aliivibrio,43.33%),25℃的SSO為發(fā)光桿菌屬(Photobacterium,41.94%)、別弧菌屬(Aliivibrio,23.10%)、梭桿菌屬(Fusobacterium,10.60%)和乳酸菌屬(Lactobacillus,18.61%)。曹榮等[58]基于高通量測序?qū)洳?、4、8 d牡蠣的菌群進(jìn)行了分析,試驗(yàn)結(jié)果表明,牡蠣冷藏初期的SSO主要以弧菌屬(Vibrio)、希瓦氏菌屬(Shewanella)和交替假單胞菌屬(Pseudoalteromonas),分別占28.3%,10.3%和7.2%;而在冷藏后期,Vibrio的比例迅速下降,而Shewanella和Pseudoalteromonas在冷藏后期仍然為SSO。這說明利用高通量測序可以對水產(chǎn)品在不同貯藏環(huán)境中的優(yōu)勢菌群進(jìn)行分析,并且準(zhǔn)確性高,在后續(xù)研究中可以結(jié)合微生物動(dòng)力學(xué)規(guī)律用以構(gòu)建進(jìn)行貨架期預(yù)測的數(shù)學(xué)模型。

        3 結(jié)論

        水產(chǎn)食品從捕撈上岸到食用這一過程中會(huì)由于很多因素影響其貨架期,其中起關(guān)鍵作用的主要是微生物的生長和代謝過程中產(chǎn)生的一些化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致水產(chǎn)品發(fā)生腐敗變質(zhì),但是并非所有的微生物都會(huì)對水產(chǎn)食品的腐敗作出貢獻(xiàn),只有其中的一小部分細(xì)菌即SSO才是引起水產(chǎn)品變質(zhì)的根本原因。因此,水產(chǎn)品在貯藏過程中為了延長貨架期,對其含有的特定腐敗菌進(jìn)行鑒定并控制是非常有必要的,這表明對水產(chǎn)品中特定腐敗菌的分析技術(shù)進(jìn)行研究、創(chuàng)新也是一個(gè)不可或缺的重要過程。

        通過對水產(chǎn)品中特定腐敗菌的分析技術(shù)進(jìn)行研究,可以更好地預(yù)測并延長水產(chǎn)食品的貨架期,對提高水產(chǎn)品品質(zhì)具有重要的意義。但是對特定腐敗菌進(jìn)行研究分析的方法仍存在一些不足之處,例如DGGE方法在應(yīng)用過程中由于樣品處理方法過于繁瑣,對微生物的檢測靈敏度和測序通量都較低等因素不足以簡便而全面地檢測水產(chǎn)品中的微生物多樣性,除此之外,單一的技術(shù)方法在分析水產(chǎn)品特定腐敗菌時(shí)存在研究結(jié)果不理想、分析不全面的缺點(diǎn)。因此在研究過程中如何選擇省時(shí)、省力、性價(jià)比高的分析方法是一個(gè)值得探討的問題,未來可以考慮將兩種或兩種以上的分析技術(shù)相結(jié)合或者開發(fā)出更為合理、更有應(yīng)用前景的水產(chǎn)品SSO的分析技術(shù)方法。

        4 展望

        通過水產(chǎn)品SSO隨時(shí)間變化的趨勢與描述微生物動(dòng)力學(xué)生長的數(shù)學(xué)方程如:Logistic方程、Gompertz方程等相結(jié)合可以制作水產(chǎn)品剩余貨架期的預(yù)測模型,由預(yù)測模型編制出相應(yīng)的軟件,用于提醒消費(fèi)者該水產(chǎn)品的食用期限,避免浪費(fèi),并且提高了通過感官來辨別水產(chǎn)品新鮮度的準(zhǔn)確性和有效性。雖然在研究過程中面臨著種種挑戰(zhàn),但是非常有應(yīng)用前景。

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