陳新華 王洪峰 李慧璟

(長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長春 130117)

急性痛風性關(guān)節(jié)炎(AGA)是一種臨床常見的急性疼痛性疾病，常見癥狀有雙下肢關(guān)節(jié)活動功能受限，皮膚紅腫并伴有強烈的劇痛，其病情纏綿不愈，并發(fā)癥多，甚至威脅患者生命〔1〕。文獻表明〔2〕：AGA主要由先天性嘌呤代謝異常引起，主要機制為血清尿酸鹽形成結(jié)晶沉積于關(guān)節(jié)部位，關(guān)節(jié)部位因自我保護產(chǎn)生大量炎癥因子，故而出現(xiàn)大量的炎性反應(yīng)，使患者產(chǎn)生疼痛感〔3〕。針灸治療AGA具有無副作用，安全性高，價格低廉的特點，但由于針灸治療該病的方法各不相同，并且該病發(fā)作迅速，疼痛劇烈，故選取最有效的針灸療法勢在必行。本研究以選取優(yōu)選的針灸治療方法為目的，主要探討不同針灸療法對AGA模型大鼠炎癥因子的影響。

1 資料與方法

1.1動物與造模方法 選取健康SD成年大鼠64只，體重(200±20)g，雌雄各半，其中4只大鼠意外死亡故脫落，將剩余60只成年大鼠隨機分成空白組、模型組、針刺組、電針組、刺血組、艾灸組，10只/組。由長春市寬城區(qū)宏達動物養(yǎng)殖場提供，許可證號SCXK(遼)2015-0001。本研究參照梁莎等〔4〕采用的背側(cè)正中進針法建立AGA大鼠模型。稱取尿酸鈉0.2 g，加入無菌生理鹽水4 ml，制成5%尿酸鈉混懸液備用。大鼠10%水合氯醛0.35 ml/100 g腹腔注射麻醉。將大鼠右后肢踝關(guān)節(jié)擺放成直角，充分暴露踝關(guān)節(jié)與脛腓骨之間的間隙，75%酒精局部皮膚消毒，4號針頭以45%角從該間隙插入右后肢背側(cè)正中踝關(guān)節(jié)與脛腓骨之間的關(guān)節(jié)腔，注入5%尿酸鈉溶液50 μl。大鼠右后肢踝關(guān)節(jié)腫脹，關(guān)節(jié)活動受限，提示造模成功。

1.2試劑及主要儀器 尿酸鈉(規(guī)格型號：RB/1 g)；白細胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-10、腫瘤壞死因子(TNF)-α(規(guī)格型號均為96T)；蛋白濃度測定試劑盒(規(guī)格型號：P0006C-800次)；蛋白酶抑制劑混合物(規(guī)格型號：P1010-1ML)；以上均購自吉林省金泰化玻有限公司。

1.3試驗方法 空白組：不予任何處置，僅做同期對照觀察。模型組：模型建立成功后，不予任何處置，僅作同期對照觀察。各治療組均于造模成功后第2天開始治療。針刺組先將大鼠用鼠夾固定，參照《實驗針灸學(xué)》選取 “足三里”、“陰陵泉”穴，用0.25×0.25 mm毫針進行針刺，每日1次，每次20 min，連續(xù)治療7 d。電針組：固定與選穴同針刺組，針刺完畢后，連接電針治療儀，選用疏密波，頻率2 Hz/15 Hz，每日1次，每次20 min，連續(xù)治療7 d；刺血組：固定與選穴同針刺組，用三棱針在每個穴位上點刺，以出血1滴為度，每天刺血1次，連續(xù)7 d。艾灸組：固定與選穴同針刺組，用麥粒灸(每壯5 mg艾絨)灸“足三里”、“陰陵泉”各5壯，每日1次連續(xù)治療7 d。末次治療后，頸椎脫臼法處死大鼠，迅速打開大鼠右后肢脛跗關(guān)節(jié)，以眼科剪剪切軟骨及周圍肌肉組織，10%磷酸鹽緩沖液(PBS)快速洗滌，凍存于1.5 ml凍存管，保存于-80℃冰箱備用。取穴：足三里：小腿前外側(cè)，當犢鼻下10 cm(3寸)，距脛骨前緣一橫指(中指)。陰陵泉：小腿內(nèi)側(cè)，當脛骨內(nèi)側(cè)踝后方凹陷處。

1.4觀察指標及檢驗方法 (1)踝關(guān)節(jié)周徑測量(周長法)：各組在造模前及造模的第1～7天分別用長2～3 cm的紙條測量造模踝關(guān)節(jié)周徑。(2)各組白細胞介素(IL)-1β、腫瘤壞死因子(TNF)-α、IL-4、IL-10蛋白表達水平的檢測：取出滑膜組織，分別測定IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10的含量，按試劑盒說明書進行操作。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0軟件進行χ2檢驗、t檢驗、秩和檢驗、方差分析。

2 結(jié) 果

2.1各組大鼠踝關(guān)節(jié)周徑比較 除空白組外,其余各組造模前及造模后第1～7天關(guān)節(jié)腫脹程度差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。造模前各組關(guān)節(jié)腫脹周徑差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。第1～7天模型組及各治療組關(guān)節(jié)腫脹周徑均顯著長于造模前(P<0.05)。第2天刺血組、針刺組、電針組關(guān)節(jié)腫脹周徑均顯著短于模型組(P<0.05)，刺血組關(guān)節(jié)腫脹周徑顯著短于針刺組及電針組(P<0.05)。第3天艾灸組關(guān)節(jié)腫脹周徑顯著短于模型組(P<0.05)。第5天各治療組關(guān)節(jié)腫脹周徑均顯著短于模型組(P<0.05)。第6、7天刺血組、針刺組、電針組關(guān)節(jié)腫脹周徑均顯著短于模型組(P<0.05)。見表1。

表1 各組大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹周徑比較

與造模前比較：1)P<0.05；與模型組比較：2)P<0.05；與刺血組比較：3)P<0.05

2.2各組大鼠炎癥因子蛋白表達比較 與空白組比較，模型組IL-1、IL-4、IL-10、TNF-α蛋白表達均顯著升高(P<0.05)。除針刺組IL-4蛋白表達外，其他各組IL-1、IL-4、IL-10、TNF-α蛋白表達與模型組比較均顯著降低(P<0.05)。見表2。

表2 各組間蛋白表達比較

與模型組比較：1)P<0.05，2)P<0.01，3)P<0.001；與空白組比較：4)P<0.05

3 討 論

痛風是由于尿酸鹽沉積于關(guān)節(jié)處引起疼痛的一類代謝性疾病〔5〕。常見癥狀為發(fā)作時劇烈疼痛、關(guān)節(jié)出現(xiàn)紅腫等〔6〕，被稱為“不能走路的疾病”〔7〕。近幾年由于生活富足，痛風的發(fā)病率也逐漸增加，現(xiàn)已成為全球疾病的沉重負擔之一〔8〕。痛風的致病因素有很多，如年齡、性別、飲食習(xí)慣等〔9～11〕，但局部關(guān)節(jié)處尿酸鹽的形成與累積是其中的關(guān)鍵因素〔12〕。西醫(yī)常用別嘌呤醇治療此病，但效果不明顯且患者有抗藥性等副作用〔13～19〕。

中醫(yī)認為痛風發(fā)病機制為“風、濕、寒、熱”4種〔20〕。AGA在中醫(yī)當中通常又稱為“痹癥”，而痹癥常從脾胃論治，“脾主四肢肌肉”且脾胃為后天之本，氣血生化之源，針刺足太陰脾經(jīng)合穴陰陵泉和足陽明胃經(jīng)合穴足三里的第一層意義便在于此。第二，表里經(jīng)配伍可以更加有效地使疾病恢復(fù)平衡狀態(tài)，一陰一陽，一外一內(nèi)，起到協(xié)同作用。第三，合穴為經(jīng)氣深入臟腑的起始部位，針刺合穴可以調(diào)理臟腑，使疾病通過臟腑的調(diào)節(jié)達到標本兼治的目的，故本研究選取足三里和三陰交兩者配伍。

針灸療法在治療本病時有顯著的療效，如李琴〔21〕采用中藥配合刺絡(luò)放血法治療AGA在臨床上取得顯著療效，其研究主要以刺血來緩解患者的疼痛，以中藥達到長期止痛治病的療效。兩者配合從急緩兩方面同時入手，達到“急則治其標，緩則治其本”的目的。羅繼保等〔20〕對近10年刺血療法治療AGA進行文獻總結(jié)，發(fā)現(xiàn)刺血療法可與其他療法相配伍，但卻無法被其他療法所取代，根本原因在于刺血療法有通經(jīng)絡(luò)，調(diào)氣血，調(diào)虛實的作用。電針療法和艾灸療法在臨床中常輔助治療AGA。針灸療法在臨床上雖得到廣泛運用，但并未出現(xiàn)對各個療法比較的研究，所以本研究對此展開實驗，通過實驗可以發(fā)現(xiàn)：(1)若不給予治療，AGA可以在急性期的部分時間恢復(fù)，但無法恢復(fù)至正常，并且恢復(fù)后癥狀加重。(2)AGA發(fā)作時刺血法通過調(diào)控IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10蛋白的表達，可以達到更好的治療效果。(3)在治療過程中不同的針灸療法會有一段時間的瓶頸期，經(jīng)過此段時間繼續(xù)治療，治療方法仍對癥狀有進一步的改善。