董文珠

【摘?要】 目的：研究高效液色譜法測(cè)定金羚感冒片中阿司匹林含量的分析方法。方法：對(duì)金羚感冒片應(yīng)用高效液色譜法進(jìn)行測(cè)定。從溶液制備、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)、檢測(cè)時(shí)間、回收率、精密度、穩(wěn)定性以及重復(fù)性等方面，分別進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果：HPLC法測(cè)定金羚感冒片中阿司匹林含量，供試品色譜圖與對(duì)照品色譜峰值相應(yīng)值，有相同色譜峰出現(xiàn)，色譜主峰和其他峰分離良好，分離度為10.8，達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求;精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性均良好;樣品平均回收率為99.11%，PSD=1.64%。金羚感冒片的阿司匹林含量符合規(guī)定。結(jié)論：HPLC法測(cè)定金羚感冒片中阿司匹林含量方面具有簡(jiǎn)便、快捷、結(jié)果準(zhǔn)確度高的特點(diǎn)。

【關(guān)鍵詞】 高效液色譜法;金羚感冒片;阿司匹林;含量測(cè)定

文章編號(hào)：WHR2019104047

金羚感冒片是一種臨床常見(jiàn)的中西結(jié)合的復(fù)方感冒藥，主要功效為清熱解毒，辛涼解表，主要用于傷風(fēng)感冒、上呼吸道感染治療。其主要成分為羚羊角粉、野菊花、忍冬藤、水牛角粉、北豆根、阿司匹林等。本次研究對(duì)該感冒片中的阿司匹林的含量進(jìn)行測(cè)量，實(shí)驗(yàn)采用了高效液相色譜法（HPLC法）進(jìn)行。

1?材料與方法

1.1?材料、儀器和試劑

金羚感冒片，國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS3-B-2172-96，（山東潤(rùn)華藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字Z37021121）;SSI高效液相色譜儀（SSI公司出品）， SSI500檢測(cè)器，ANASTAR液相色譜工作站;色譜柱：中國(guó)科學(xué)院大連物理化學(xué)研究所Kromasi1C18色譜柱（250mm×46mm， 5μm）。阿司匹林對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所），含量99.9%。甲醇為色譜純;水為二次純化水;其他均為分析純?cè)噭?/p>

1.2?方法與結(jié)果

1.2.1?色譜條件?色譜柱填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠，甲醇、水、冰醋酸的比例為26∶23∶1，作為流動(dòng)相。檢測(cè)波長(zhǎng)280nm，流速1mL·min-1。

1.2.2?溶液制備?對(duì)照品溶液：精密稱(chēng)取阿司匹林對(duì)照品50mg，放于100mL容量瓶中，加80mL流動(dòng)相，超聲處理20min后，取出待其冷卻。用流動(dòng)相稀釋到刻度，搖勻后進(jìn)行過(guò)濾，即得到對(duì)照品溶液[1]。

供試品溶液：取金羚感冒片500mg，研碎，精密稱(chēng)量后置于100mL容量瓶，加流動(dòng)相80mL，超聲處理20min后取出放冷。用流動(dòng)相稀釋到刻度，搖勻后進(jìn)行過(guò)濾，備用。

測(cè)定方法：精密吸取以上兩種溶液，各10μL，注入液相色譜儀，觀察和記錄譜圖，根據(jù)外標(biāo)法以峰面積進(jìn)行計(jì)算[2]。結(jié)果，供試品和對(duì)照品在相同流出時(shí)間色譜峰相同，主峰和其他色譜峰有著良好分離，分離度為10.8，符合實(shí)驗(yàn)要求，如圖1所示。

1.2.3?標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備?精密稱(chēng)取阿司匹林對(duì)照品18.4mg，置于25mL容量瓶中。用流動(dòng)相溶解后定容，搖勻，便得到1mL含有阿司匹林量為0.736mg的溶液。分別吸取0.2mL，0.4mL，0.6mL，0.8mL，1.0mL于容積為1mL的容量瓶中。分別用流動(dòng)相溶解后定容，搖勻后測(cè)定。記錄色譜圖與峰面積積分，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，橫軸：對(duì)照品質(zhì)量濃度，縱軸：積分，計(jì)算回歸方式為：Y=5014X-30779，r=0.9998。結(jié)果顯示，阿司匹林的線(xiàn)性關(guān)系在147.6～738mg·L-1的范圍內(nèi)具有良好的表現(xiàn)。

1.2.4?精密度實(shí)驗(yàn)?在以上的色譜條件下，重復(fù)5次將對(duì)照品溶液注入測(cè)定儀，結(jié)果阿司匹林的RSD為0.18%，提示精密度試驗(yàn)良好。

1.2.5?重復(fù)性試驗(yàn)

制備供試品溶液：選取同一樣品5份，分別制備。

制備對(duì)照品溶液：精密稱(chēng)取阿司匹林對(duì)照品12.5mg，放置在25mL的容量瓶，用流動(dòng)相稀釋?zhuān)玫胶?.5mL阿司匹林的對(duì)照品溶液1mL。

方法：分別精密吸取供試品和對(duì)照品的溶液，各有10μL，用液相色譜儀分析，記錄阿司匹林峰面積積分，計(jì)算含量。結(jié)果，金羚感冒片的阿司匹林含量，RSD=0.34%，重復(fù)性良好。

1.2.6?穩(wěn)定性試驗(yàn)?取10μL對(duì)照品溶液，分別在0h，2h，4h，6h，8h時(shí)注入液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定，觀察并記錄阿司匹林峰面積積分，進(jìn)行穩(wěn)定性觀察[3]。結(jié)果發(fā)現(xiàn)室溫下放置8h，阿司匹林溶液峰值面積未發(fā)生明確的改變，RSD=0.18%。表明對(duì)照品溶液的8h穩(wěn)定性良好。

1.2.7?回收率試驗(yàn)?制備供試品溶液：將金羚感冒片稱(chēng)取出等量的5份，研碎，各有300mg，分別放置在5個(gè)具塞錐形瓶，均加入阿司匹林對(duì)照品，加流動(dòng)相超聲處理20min后取出放冷，用流動(dòng)相稀釋到刻度，搖勻后進(jìn)行過(guò)濾，作為供試品溶液。

測(cè)定方法：分別各吸取10μL供試品和對(duì)照品溶液，進(jìn)行液相分析，觀察色譜圖，對(duì)回收率進(jìn)行計(jì)算。結(jié)果如表1所示。

1.2.8?樣品測(cè)定?取金羚感冒片3份，各含有50mg的阿司匹林，放置在100mL的容量瓶，加80mL流動(dòng)相，用超聲處理20min后，取出待冷卻，用流動(dòng)相稀釋到刻度，搖勻后進(jìn)行過(guò)濾，備用。分別取供試品溶液和對(duì)照品溶液10μL，用液相色譜儀分析，記錄色譜圖，用峰值面積對(duì)含量進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果3份含量為100.43%，99.26%，99.84%。含量符合規(guī)定。

2?討論

金羚感冒片為中西藥復(fù)方制劑，而中藥提取中雜質(zhì)引入是不能避免的，因而測(cè)定時(shí)對(duì)色譜條件，流動(dòng)相有所要求。本研究的色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇、水、冰醋酸的比例為26∶23∶1，作為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)280nm，流速1mL·min-1。實(shí)驗(yàn)在室溫的條件下進(jìn)行，以達(dá)到有效分離。結(jié)果顯示，相同保留時(shí)間時(shí)，供試品的色譜圖上出現(xiàn)了與對(duì)照品相同色譜峰，主峰和其他色譜峰分離良好。精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性均良好;樣品平均回收率為99.11%，PSD=1.64%。3份含有50mg阿司匹林的金羚感冒片檢出阿司匹林的含量為100.43%，99.26%，99.84%。含量均符合規(guī)定。以上結(jié)果提示HPLC法是檢測(cè)金羚感冒片中阿司匹林含量的有效方法，具有便捷、準(zhǔn)確等特點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)

[1] 王淼.HPLC法同時(shí)測(cè)定阿司匹林維生素C泡騰片中藥物含量[J].海峽藥學(xué)，2018，30（11）：65-68.

[2] 國(guó)無(wú)雙，佘東來(lái)，趙春杰，汪娟.HPLC法測(cè)定硫酸氫氯吡格雷阿司匹林片中氯吡格雷異構(gòu)體的含量[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，33（06）：450-453，458.

[3] 藍(lán)獻(xiàn)泉，譚小勇，黃紅雯.HPLC法同時(shí)測(cè)定復(fù)方阿魏酸鈉阿司匹林膠囊中阿魏酸鈉、桂利嗪、阿司匹林、維生素B1[J].藥物分析雜志，2014，34（12）：2247-2250.