劉恩昌

淺談布魯氏菌病檢測與防控

劉恩昌

（山東省昌樂縣畜牧獸醫(yī)局 262400）

布魯氏菌病(簡稱“布病”)是一種重要的具有人畜共患特性的傳染病，具有多樣性的特點(diǎn)。根據(jù)布病致病性特點(diǎn)以及宿主特異性，將布魯氏菌病分為六種，分別是羊種、牛種、豬種、沙林鼠種、綿羊種和犬種。近年來又增添了一種海洋哺乳動(dòng)物類布魯氏菌，與上面六種具有不同的致病特性和分子特征。布魯氏菌屬具有高度同源性，同源性大于90%。除綿羊種和沙林鼠種，其他五種對人類都具有致病性。布菌感染動(dòng)物機(jī)體后其首要侵入網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬細(xì)胞和胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞。家畜感染后會出現(xiàn)流產(chǎn)、附睪炎等癥狀。自然條件下，布病是以水平或垂直方式傳播的，宿主之間主要以分泌物接觸傳播以及性繁殖傳播。人類主要通過接觸未經(jīng)過巴氏滅菌的被病原體污染的奶制品或其他動(dòng)物制品感染，人感染后早期出現(xiàn)類似感冒癥狀，這也是容易被忽視的原因，如得不到及時(shí)治療會轉(zhuǎn)入慢性感染期甚至形成重癥，出現(xiàn)波浪熱、乏力、關(guān)節(jié)炎、睪丸炎等癥狀，嚴(yán)重者會喪失勞動(dòng)能力，目前為止，還沒有出現(xiàn)人感染人的情況。布魯氏菌病不僅嚴(yán)重危害著畜牧養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，給社會帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，還嚴(yán)重威脅著人類的健康和社會的生物安全。

1 流行情況

進(jìn)入21世紀(jì)，布魯氏菌病在全球呈現(xiàn)疫情反彈，每年有超過50萬的新發(fā)病例。目前該病在170多個(gè)國家和地區(qū)流行，遍布五大洲，而且在不同的國家以及同一個(gè)國家的不同地區(qū)發(fā)病率存在著巨大差異。全世界共有17個(gè)國家和地區(qū)宣布根治了布魯氏菌病，但大部分發(fā)展中國家卻依然存在著疫情。我國到2012年為止，除了澳門和臺灣地區(qū)疫情未知外，各省市都上報(bào)了布病疫情，2000年以來布病成為發(fā)病速度最快的傳染病之一。研究調(diào)查顯示，我國布病疫情主要分布在北部和西部，東部和南部呈現(xiàn)零星分布，同時(shí)疫情有從北向南擴(kuò)張的趨勢。布病不僅威脅著人類的健康，對畜牧業(yè)的發(fā)展也產(chǎn)生了極大地影響。據(jù)調(diào)查，受布病影響我國吉林、黑龍江兩省在2000~2006年間，每年的布病造成的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)近兩千萬元人民幣；廣西新疆兩省區(qū)10年間因布病造成的經(jīng)濟(jì)損失總額近1億兩千萬人民幣。各方面的調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，我國的布病疫情呈擴(kuò)散趨勢，防控形勢非常的嚴(yán)峻。因此，安全有效的布病防控疫苗的研制工作已經(jīng)迫在眉睫。

2 布魯菌病檢測方法

布病檢測主要采用病原學(xué)檢測和血清學(xué)檢測方法，在實(shí)際檢測工作中，受實(shí)驗(yàn)室生物安全級別限制開展試驗(yàn)。

2.1 病原學(xué)檢測方法 細(xì)菌分離培養(yǎng)、涂片染色鏡檢等是病原學(xué)檢測常用的方法。細(xì)菌分離培養(yǎng)是指將病料接種于培養(yǎng)基開展細(xì)菌培養(yǎng)，對比培養(yǎng)細(xì)菌與布魯菌的形態(tài)、生豬特性等鑒定布魯菌；涂片染色鏡檢是指將病畜分泌物、乳、流產(chǎn)物等涂片進(jìn)行染色，根據(jù)菌落顏色鑒定布魯菌。由于病原學(xué)檢測操作復(fù)雜、試驗(yàn)要求性高，很難在基層廣泛開展，并且需在BSL-2級以上實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

2.2 血清學(xué)檢測方法 血清學(xué)檢測方法比較多，我國大多數(shù)市縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室采用的是虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)篩查，對篩查的陽性樣本再進(jìn)行試管凝集試驗(yàn)(SAT)確診，在省級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室及海關(guān)檢疫等部門運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)較為常見，此外還有操作較為復(fù)雜的補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)和專用于檢測奶牛布病的乳環(huán)試驗(yàn)(MRT)。受試驗(yàn)方法系統(tǒng)自身缺陷和操作便捷與否等因素影響，每一種方法在敏感性、特異性、操作簡便、快速等方面都存在某方面或多方面的不足，即沒有一種方法是既快速又操作簡單，且敏感性和特異性都具備的。比如：環(huán)境溫度或緩沖液pH值異常會影響RBT的準(zhǔn)確性；SAT試驗(yàn)設(shè)計(jì)本身缺陷使得結(jié)果有一定的假陽性和假陰性存在；MRT檢測對象具有局限性，只適用于奶牛；CFT操作較為繁瑣，ELISA雖然在敏感性和特異性等技術(shù)指標(biāo)上表現(xiàn)較好，但試劑盒依賴于國外進(jìn)口，增加試驗(yàn)成本。研究表明，幾種血清學(xué)方法套用對布病檢測效果較好,目前采用RBT初篩，SAT復(fù)檢是我國基層檢測機(jī)構(gòu)運(yùn)用最廣泛的布病檢測方法。

3 布魯菌病防控

（1）家畜中布病易感動(dòng)物主要有羊、牛、豬、犬，染疫動(dòng)物也是引起人和健康畜感染布病的傳染源，畜牧獸醫(yī)行業(yè)、從事養(yǎng)殖活動(dòng)及乳肉加工等人員是感染布病的高危人群。因此，布病的防控不能局限于養(yǎng)殖鏈條的某一個(gè)環(huán)節(jié)，而是要采取綜合防控措施以保障公共衛(wèi)生安全。具體措施包括：一是重視知識宣傳，利用各種媒體等方式，向社會廣泛宣傳布病的防治知識，以提高人民群眾自主防控意識；二是建立畜牧獸醫(yī)與衛(wèi)生疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)信息暢通機(jī)制，加強(qiáng)畜間與人間布病防控配合與協(xié)調(diào)，實(shí)現(xiàn)聯(lián)防聯(lián)控；三是夯實(shí)動(dòng)物檢疫監(jiān)管，督導(dǎo)養(yǎng)殖人員履行引種主動(dòng)報(bào)檢的義務(wù)，落實(shí)好產(chǎn)地檢疫制度，阻斷輸入性疫情發(fā)生；四是切實(shí)做好布病基線調(diào)查工作，根據(jù)非控制區(qū)、控制區(qū)、穩(wěn)定控制區(qū)和凈化區(qū)的界定標(biāo)準(zhǔn)，做好各縣分區(qū)防控界定，奶畜按照不免疫的原則開展凈化工作，非控制區(qū)的牛羊?qū)嵭袕?qiáng)制免疫，逐步從免疫凈化過渡到非免疫凈化，達(dá)到控制區(qū)標(biāo)準(zhǔn)及其以上標(biāo)準(zhǔn)的地區(qū)，采取“非免疫+檢測+撲殺”的凈化措施，檢出陽性的牛羊堅(jiān)決撲殺，同時(shí)按照病死畜禽處置等條例做好無害化處置工作，同群陰性牛羊要嚴(yán)格進(jìn)行隔離觀察，加強(qiáng)圈舍環(huán)境、養(yǎng)殖設(shè)施設(shè)備等消毒，提高飼養(yǎng)管理和生物安全水。（2）對于布魯氏菌的防治，疫苗有著舉足輕重的作用。布菌疫苗分為人用疫苗和畜用疫苗。到目前為止，還沒有安全有效的人用疫苗。人感染后，要長期服用抗生素，大多會預(yù)后不良，同時(shí)還會引起嚴(yán)重的后遺癥。我國目前所用的人用布病疫苗是104M，接種前需要進(jìn)行皮膚變態(tài)實(shí)驗(yàn)，而且免疫時(shí)效短，免疫次數(shù)有限，安全性低，僅限于高危人群。畜用疫苗，目前廣泛使用的是弱毒活疫苗，世界范圍內(nèi)廣泛是用的有2種，牛種S19和羊種Rev.1，S19疫苗主要用于6~8月犢牛，Rev.1用于綿羊和山羊，基于人們地不斷探索，各個(gè)國家研制出了自己使用的疫苗，如俄羅斯的牛種布菌82活疫苗；美國等北美國家已經(jīng)將RB51疫苗株作為替代S19的官方疫苗株，我國的豬型S2和羊型M5疫苗，由于產(chǎn)權(quán)方面原因未成功引進(jìn)RB51疫苗株。這些疫苗的使用使得布病在一定程度上得到了控制，但同時(shí)存在技術(shù)缺陷如毒力強(qiáng)，安全性差，可能導(dǎo)致孕畜流產(chǎn)；疫苗接種后產(chǎn)生與感染相類似的血清學(xué)反應(yīng)，造成診斷困難。

（2019–09–12）

S852.61+4

B

1007-1733(2019)10-0032-02