許新建 郜興梅
(1.如皋市搬經(jīng)鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,江蘇如皋 226500;2.如皋市磨頭鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,江蘇如皋 226500)
病鴨大多精神萎靡,食欲減退,縮頸嗜睡,眼角和鼻孔有黏性分泌物,糞便稀,色灰白或發(fā)綠,部分病鴨張口呼吸。病情嚴(yán)重的患鴨多在4日內(nèi)死亡,死亡率15%左右。
從病鴨發(fā)病后癥狀態(tài)臨床表現(xiàn)的癥狀,懷疑是大腸桿菌病。剖檢部分病、死鴨,主要病變是心包膜、心內(nèi)膜、肝被膜及氣囊膜表面有黃白色纖維性滲出物,腹腔有滲出液,味惡臭?;鉴喐闻K腫大,青銅綠色,脾臟腫大、發(fā)黑。此時(shí)初步診斷為大腸桿菌感染。
2.2.1 病原分離及鏡檢
用無(wú)菌接種環(huán)沾取鴨的肝臟新鮮剖面,分別劃線接種于10塊伊紅美藍(lán)平板和10塊麥康凱瓊脂平板,37℃培養(yǎng)24h。伊紅美蘭瓊脂有7塊培養(yǎng)良好,菌落黑色,帶金屬光澤。菌落直徑約為1~2mm,邊緣整齊。麥康凱瓊脂有8塊培養(yǎng)良好,菌落淺紅色。在伊紅美藍(lán)平板和麥康凱瓊脂平板上挑取可疑菌落在普通瓊脂斜面上進(jìn)行純培養(yǎng),37℃培養(yǎng) 18h。15塊平板有13塊培養(yǎng)效果好。菌落灰白色,圓形、隆起、濕潤(rùn)光滑。然后分別挑取純培養(yǎng)物涂片、干燥,革蘭氏染色后鏡檢。鏡下細(xì)菌菌體淡紅色,兩端鈍圓,表面見有鞭毛及大量菌毛。將分離到的13個(gè)菌株在斜面瓊脂中培養(yǎng)后冷藏保存。
2.2.2 生化鑒定
將分離到的13個(gè)菌株進(jìn)行生化試驗(yàn),所有菌株在肉湯中生長(zhǎng)良好,肉湯均勻渾濁,管底形成沉淀。所有菌株均能發(fā)酵麥芽糖、甘露醇、葡萄糖。3個(gè)菌株能發(fā)酵乳糖。所有菌株均不能產(chǎn)生H2S、不分解尿素、不液化明膠。V-P 試驗(yàn)陰性,M-R 試驗(yàn)和吲哚試驗(yàn)陽(yáng)性。經(jīng)分離培養(yǎng)和生化鑒定,這13個(gè)菌株可確定為埃希氏大腸桿菌。
2.2.3 大腸桿菌血清型鑒定
用大腸桿菌 O 因子血清(O1~O163)鑒定分離到的13 株致病性大腸桿菌,結(jié)果有9個(gè)菌株分屬3種血清型O1(3)、O78(5)O109(1),以此作為制備該鴨場(chǎng)“自家苗”的多價(jià)抗原。
對(duì)分離到13個(gè)菌株用圓紙片擴(kuò)散試驗(yàn)法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。結(jié)果顯示,13株大腸桿菌分離株對(duì)慶大霉素、氨芐青霉素耐藥。而對(duì)頭孢噻肟、頭孢曲松、安普霉素、氟苯尼考敏感度較高,對(duì)多粘菌素、新霉素、甲砜霉素、阿米卡星中度敏感度,對(duì)諾氟沙星、環(huán)丙沙星、阿莫西林、林可霉素、利福平敏感度最低。根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果決定選用頭孢曲松和氟苯尼考作為治療藥物。
大腸桿菌是一種環(huán)境性疾病,預(yù)防是關(guān)鍵。所以吩咐畜主搞好飼養(yǎng)管理,注意鴨場(chǎng)環(huán)境衛(wèi)生。如及時(shí)清理糞便和更換墊料,經(jīng)常清掃鴨舍,保持舍內(nèi)干燥衛(wèi)生。每隔 3~5d 對(duì)鴨舍進(jìn)行帶鴨消毒。保證舍內(nèi)通風(fēng)良好,以降低鴨舍內(nèi)有害氣體的濃度。保證飼料、飲水的清潔,并注意每天飲水槽的清洗和戲水池水的定期替換。
由于大腸桿菌病極易產(chǎn)生耐藥性,且常呈多種耐藥,用藥物控制該病不但費(fèi)用高、效果不佳,而且會(huì)造成藥物殘留和降低畜產(chǎn)品的質(zhì)量。決定自制大腸桿菌疫苗緊急接種。利用之前確定O1、O78、O109這三種菌株,在無(wú)菌試劑瓶中用滅菌的生理鹽水20倍稀釋,經(jīng)0.4%的甲醛溶液滅活24 h,然后按每只鴨子0.2ml的劑量肌肉注射,收到一定的效果?;疾▲喿影l(fā)病率由之前的50%降低至10%左右,病鴨死亡率由15%降至5%。對(duì)癥狀明顯的患鴨,接種疫苗10日后使用敏感藥物進(jìn)行治療。
目前因飼養(yǎng)管理?xiàng)l件的限制,環(huán)境中的大腸桿菌極易對(duì)鴨蛋或鴨肉制品造成污染,消費(fèi)者一旦食用了含有對(duì)人類同樣具有致病性的細(xì)菌污染的鴨蛋或鴨肉,就會(huì)造成人的大腸桿菌感染。
大腸桿菌很容易產(chǎn)生耐藥性,可由染色體或質(zhì)粒介導(dǎo),它可以通過(guò)菌毛將耐藥質(zhì)粒傳遞給其他大腸桿菌,再加上臨床上用藥的不合理致使大腸桿菌的耐藥性日益嚴(yán)重。長(zhǎng)期低劑量使用藥物很容易使該菌產(chǎn)生耐藥。建議在治療起初加大劑量,待病鴨癥狀消失后停止給藥。
大腸桿菌血清型很復(fù)雜,各地區(qū)或養(yǎng)殖場(chǎng)存在一定的差異,針對(duì)該菌研制疫苗最好先確定本地區(qū)或養(yǎng)殖場(chǎng)的優(yōu)勢(shì)菌株,并以此作為疫苗“種子”。由于時(shí)間緊,也缺乏制備疫苗的技術(shù)和設(shè)備,自制的疫苗沒(méi)有經(jīng)過(guò)田間試驗(yàn)和科學(xué)論證。