河南省洛陽市食品藥品檢驗所（471000）許俊哲

高效液相色譜作為現(xiàn)代分離分析技術，隨著自身技術實踐能力的逐步強化，使之在優(yōu)化改進的前提下，在多領域檢驗中取得顯著成績。再者，高效液相色譜技術存在高分離效率、分離速度快、靈敏度高、自動化的特點，逐步成為藥品檢驗的核心技術，且在該領域占據(jù)決定性地位。由此可見，做好高效液相色譜技術的思考，是保證藥品檢驗工作有序施行的前提。

1 高效液相色譜技術

1.1 概念 高效液相色譜技術（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是以液體為主要流動相，通過高壓輸液系統(tǒng)，將隔離緩沖液和混合溶劑泵入色譜柱，使其能夠完成樣品檢測的方式。目前，該種檢測技術已在多領域得到使用，如化學、工業(yè)和生化、醫(yī)學、農業(yè)與商檢、法檢等，檢測化學、環(huán)境化學和生物化學必不可少的技術手段。

1.2 特點 對于高效液相色譜技術而言，呈現(xiàn)“三高、一廣、一快”的特點。即“三高”：高壓，流動相以液體為主，若要保證快速流經(jīng)色譜柱，則應施以加高壓處理；高效，分離效能相對較高，通過對流動相、固定相的選擇，起到分離效果；高靈敏度，可達到0.01ng，樣品量滿足μL數(shù)量級?！耙粡V”：范圍廣，70%以上有機化合物均可施以高效液相色譜檢驗?！耙豢臁保悍治隹旌洼d液快，常規(guī)情況下樣品分析時間約在15～30min，個別樣品則可在5min內完成，但最長不超過60min[1]。

1.3 構成 高效液相色譜儀由高壓輸液泵、色譜柱、進樣器、檢測器和餾分收集器構成。即高壓輸液泵主要用于樣品、流動相驅動，使其能夠通過色譜柱，包含往復泵及隔膜泵兩種；色譜柱是對樣品各物質的分析，長度約為10～30cm，內徑約為2～5mm；進樣器是將樣品泵入色譜系統(tǒng)的裝置，包含注射器、停留進樣和閥進樣、自動進樣器等；檢測器是將流出液濃度轉變?yōu)殡妼W信號、化學信號，涉及種類相對較多，如電化學和熒光檢測器；餾分收集器是對檢測器內信號予以直觀顯示的裝置。

2 高效液相色譜技術在藥品檢驗中的應用

2.1 藥品含量 由于高效液相色譜技術具有高分辨率、分析速度快的特點，可對樣品予以重復測定，且樣品檢測量相對極少，在藥品含量檢驗中尤為常見。目前，國內施行的《中國藥典》（2010年版）中關于高效液相色譜技術測定標準，和2005年版增加359個，即為694個。但《美國藥典》內測定標準則高達2000余個。此外，在維生素E、維生素D3、維生素K1等藥物含量檢驗中，若施以高效液相色譜一次測定，則可通過和2種及其以上檢測器間的串聯(lián)，將其含量予以精準測定。而四環(huán)素作為廣譜抗菌藥，以較強的經(jīng)濟價值，在藥品、食品添加劑等領域較為常見，有效的高效液相色譜技術可精準實現(xiàn)對其含量的測定[2]。

2.2 有關物質 現(xiàn)階段，藥品檢驗中有關物質的檢查標準愈發(fā)嚴格，即在藥物合成直至使用，需要經(jīng)過漫長的時間，而若在此環(huán)節(jié)滋生有關物質，則必將會在降低藥物效果的同時，引起機體安全問題。藥品生產期間，有關物質準許控制在標準劑量內，但仍以低毒性或無害為主導，以免對機體造成不良后果。原料核中間體作為有關物質檢驗的對象，如氫溴酸東茛菪堿、丁溴東莨菪堿等莨菪堿，輔之外標法檢驗，保證2倍對照液峰面積＜各雜質峰面積總和。此外，在卡馬西平等物質檢驗中，高效液相色譜技術的使用，可借助對高含量雜質的改變，預防相似藥物的紫外線對光譜予以吸收，以便提高檢驗的精確度。

2.3 中藥成分 常規(guī)情況下，成方制劑中藥成分相對較多，而有效的化學成本分解手段，可便于其結構的確定。同時，中藥作為相對復雜的體系，呈現(xiàn)平整性、整體性和多效性的特點，特別是在疑難雜癥救治中，中藥以自身獨特的優(yōu)勢，配伍諸多中藥成分，使藥效達至最佳狀態(tài)。然而，也正是由于配伍中藥較多，致使其化學成分相對復雜，若仍使用傳統(tǒng)成分分析技術，則難以對中藥成分予以分類測定。而高效液相色譜技術的選擇，能夠在彌補傳統(tǒng)成分分析技術缺陷的同時，提高中藥成分檢驗質量。

綜上所述，高效液相色譜技術以高靈敏性、高專屬性的優(yōu)勢，使其在藥物分離、成分定性和定量分析中得以廣泛使用。特別是在科技水平逐步發(fā)展的背景下，高效液相色譜技術也在快速完善，不僅可滿足藥品自動化檢驗的目的，還可在藥品鑒別、成分測定和有關物質檢查等領域取得優(yōu)異成績，為藥品檢驗工作的施行創(chuàng)造條件。