紀(jì)經(jīng)良，李 穎

球蟲(chóng)病是由球蟲(chóng)原蟲(chóng)引起的一種雞腸道寄生蟲(chóng)病，主要影響雛雞，并通過(guò)接觸受感染的雛雞而傳播。寄生蟲(chóng)在上皮細(xì)胞中的增殖導(dǎo)致組織壞死，由此增加腹瀉、腸道出血的發(fā)生率，并可能導(dǎo)致消化過(guò)度，使雞的日增重、采食量和飼料轉(zhuǎn)化率降低，最終給家禽養(yǎng)殖業(yè)造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。應(yīng)用抗球蟲(chóng)藥和滅活疫苗是預(yù)防和控制該病的常用方法，但頻繁使用抗球蟲(chóng)藥物會(huì)導(dǎo)致抗藥性及艾美耳菌株的擴(kuò)散，同時(shí)疫苗生產(chǎn)成本很高。因此，需要開(kāi)發(fā)安全、廉價(jià)的方法來(lái)控制雞球蟲(chóng)病的發(fā)生。牛至精油以其抗菌、抗真菌和抗原生動(dòng)物活性而聞名（Botsoglou等，2002），其包含香芹酚和百里香酚，含量占到78%～82%。盡管有一些關(guān)于牛至油對(duì)家禽球蟲(chóng)病影響的可用信息（Tsinas等，2011），但需要更多的研究來(lái)評(píng)估其有效添加量。因此，本研究旨在通過(guò)比較牛至精油與抗球蟲(chóng)藥物對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能和球蟲(chóng)病預(yù)防的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)共選擇250只1日齡雌性肉雞，采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，共分為5組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只。試驗(yàn)處理包括陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照日糧+200 mg/kg抗球蟲(chóng)藥（殺球靈）、陽(yáng)性對(duì)照日糧+200或400 mg/kg牛至油。各階段肉雞的基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。雛雞在出生后7 d內(nèi)飼養(yǎng)在32℃、撒有木屑的水泥地板上，在第21天溫度降至23℃。試驗(yàn)前2 d采用連續(xù)光照，在3～42 d光照23 h，光照強(qiáng)度為20 lx。試驗(yàn)期間肉雞自由采食和飲水，按照常規(guī)免疫方法對(duì)雞只進(jìn)行免疫。

1.2 球蟲(chóng)感染 在試驗(yàn)第22天，除陰性對(duì)照組外的所有試驗(yàn)組均口服50倍劑量的滅活球蟲(chóng)疫苗，以造成輕度球蟲(chóng)病感染。每劑疫苗在0.01 mL蒸餾水中含有300～500個(gè)孢子卵囊，陰性對(duì)照組用0.5 mL蒸餾水假接種。

1.3 樣品收集與分析 每周按重復(fù)記錄肉雞體重和飼料消耗量，記錄死亡率并對(duì)死亡雞只進(jìn)行稱重。根據(jù)這些數(shù)據(jù)，計(jì)算各階段和整個(gè)試驗(yàn)期間肉雞的日增重、日采食量和料重比。在試驗(yàn)第28天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇2只雞，稱重，屠宰，收集十二指腸，并檢查腸道3個(gè)區(qū)域（上部、中部和盲腸）的球蟲(chóng)病變。根據(jù)病變嚴(yán)重程度，每只雞分別記錄為0分（無(wú)病變）、1分（輕度病變）、2分（中度病變）、3分（嚴(yán)重病變）或4分（極嚴(yán)重病變）。累積損害評(píng)分用于判斷整體的治療效果。

表1 1～42d基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

各組糞便樣本于攻毒后第28天采集，參考Landman（2003）的方法評(píng)估每克糞便卵囊計(jì)數(shù)，并對(duì)糞便及凋落物進(jìn)行評(píng)分。采用pH計(jì)測(cè)定分別在每個(gè)糞便樣品的5個(gè)位置測(cè)定pH，然后以平均值表示。

1.4 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計(jì) 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS軟件的單因素方差分析模型，對(duì)照組與處理組各種指標(biāo)的平均值差異性用Tukey法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以P＜0.05作為差異顯著判定標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 牛至油和球蟲(chóng)藥對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響本試驗(yàn)期間，各組肉雞的死亡率均＜1%，且與處理無(wú)關(guān)。在試驗(yàn)前3周及整改試驗(yàn)期間，各組肉雞生長(zhǎng)性能分別見(jiàn)表2和表3。在試驗(yàn)第28天，感染艾美球蟲(chóng)一周后，未感染組和感染組+牛至油較陽(yáng)性對(duì)照組顯著提高肉雞日增重（P＜0.05）。試驗(yàn)第29～35天時(shí)，未感染組肉雞平均日增重顯著高于其他組（P＜0.05），各感染組間日增重?zé)o顯著差異（P＞0.05）。各處理對(duì)各階段肉雞平均日采食量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表2 牛至油和球蟲(chóng)藥對(duì)1～21d肉雞生長(zhǎng)性能的影響

表3 牛至油和球蟲(chóng)藥對(duì)22～42d及1～42d肉雞生長(zhǎng)性能的影響

22～28 d各處理對(duì)肉雞料重比具有顯著影響，其中未感染組和感染組+400 mg/kg牛至油較陽(yáng)性對(duì)照組顯著改善料重比（P＜0.05），但感染組+200 mg/kg牛至油和陽(yáng)性對(duì)照組對(duì)料重比的影響無(wú)顯著差異（P＞0.05）。各組對(duì)1～21 d、22～42 d、1～42 d日增重和平均日采食量及1～21 d肉雞料重比均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。未感染組較陽(yáng)性對(duì)照組顯著改善22～42 d和1～42 d肉雞的料重比（P＜0.05）。

2.2 牛至油和球蟲(chóng)藥對(duì)28 d肉雞球蟲(chóng)病評(píng)分、糞卵囊數(shù)、凋落物質(zhì)量和pH的影響 由表4可知，各處理組對(duì)上部和中部區(qū)域球蟲(chóng)病變?cè)u(píng)分具有顯著影響（P＜0.05），但對(duì)盲腸區(qū)域球蟲(chóng)病變無(wú)顯著影響（P＞0.05），其中未感染組較陽(yáng)性對(duì)照組顯著降低小腸上部區(qū)域病變?cè)u(píng)分（P＜0.05）。與未感染組相比，感染組+400 mg/kg牛至油或200 mg/kg球蟲(chóng)藥對(duì)小腸上部區(qū)域病變?cè)u(píng)分無(wú)顯著影響（P＞0.05）。與其他組相比，未感染組和感染組+200 mg/kg球蟲(chóng)藥組糞卵囊數(shù)最低（P＜0.05），但感染組+400 m/kg牛至油較陽(yáng)性對(duì)照組顯著降低糞卵囊數(shù)（P＜0.05）。陽(yáng)性對(duì)照組較其他組顯著提高凋落物和糞便評(píng)分及糞pH（P＜ 0.05）。

表4 牛至油和球蟲(chóng)藥對(duì)28d肉雞球蟲(chóng)病評(píng)分、糞卵囊數(shù)、凋落物質(zhì)量和pH的影響

3 討論

球蟲(chóng)病會(huì)導(dǎo)致肉雞嚴(yán)重的生長(zhǎng)問(wèn)題，如吸收不良、痢疾等。在本研究中，在感染球蟲(chóng)病的肉雞日糧中添加400 mg/kg牛至油可以減少球蟲(chóng)病對(duì)生長(zhǎng)性能的有害影響，這與Tsinas等（2011）的研究結(jié)果一致。由于本試驗(yàn)中肉雞受到輕度的球蟲(chóng)病感染，一周后，這些肉雞能抵抗球蟲(chóng)病的影響。Scheurer等（2013）指出，15 d感染球蟲(chóng)病時(shí)對(duì)第22～39天的處理組肉雞生長(zhǎng)性能參數(shù)沒(méi)有顯著影響。牛至油含有百里酚和香芹酚等酚類物質(zhì)，其可以通過(guò)改變陽(yáng)離子通透性與細(xì)胞膜相互作用，如H+和K+，離子梯度的耗盡導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)基本過(guò)程的破壞，允許細(xì)胞成分外漏，導(dǎo)致水環(huán)境失去平衡，細(xì)胞膜電位崩潰，抑制ATP合成，最終導(dǎo)致病毒細(xì)胞死亡（Ultee等，2002）。由此可以得出結(jié)論，牛至油通過(guò)縮短寄生蟲(chóng)的生命周期，可控制和預(yù)防球蟲(chóng)病，同時(shí)牛至油可以降低新生腸上皮細(xì)胞的污染，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力。

不同研究者用來(lái)判斷球蟲(chóng)病療效效果的一些指標(biāo)包括組織病變?cè)u(píng)分、每克糞中卵囊卵數(shù)和糞便評(píng)分。在本研究中，未受感染組的病灶評(píng)分高于0分，表明在研究期間這些肉雞也感染了球蟲(chóng)病，感染可能是由于來(lái)自受感染肉雞的交叉污染，因?yàn)楸狙芯渴鞘褂瞄_(kāi)放的圍欄進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，牛至油對(duì)球蟲(chóng)病感染組織病變?cè)u(píng)分有改善作用。由于牛至油所含的百里香酚和香芹酚的抗菌機(jī)制是破壞細(xì)胞膜、抑制ATP酶活性和釋放細(xì)胞內(nèi)ATP，這些物質(zhì)進(jìn)入磷脂雙分子層，并在脂肪酸鏈之間排列，使細(xì)胞膜具有通透性，同時(shí)這種修飾會(huì)導(dǎo)致膜膨脹、失穩(wěn)，增加膜的流動(dòng)性，從而增加被動(dòng)滲透率（Giannenas等，2013）。

球蟲(chóng)感染最重要的特征之一是由腹瀉引起的水樣排泄物導(dǎo)致的濕糞問(wèn)題。因此，添加抗球蟲(chóng)藥可能會(huì)改善凋落物的質(zhì)量。本研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加牛至油可以降低腸道損失，降低凋落物評(píng)分和糞中卵囊數(shù)，這與Abd El-Wahab等（2012）的報(bào)道一致。凋落物pH影響氨的釋放，應(yīng)低于7，以減少氨的揮發(fā)。此外，未經(jīng)酸化劑處理的凋落物的pH通常接近8或略高，在本研究中，由于球蟲(chóng)病引起的水樣凋落物增多，導(dǎo)致凋落物pH升高，而日糧添加400 mg/kg牛至油可降低肉雞凋落物得分和pH，減少球蟲(chóng)病對(duì)肉雞的危害。

4 結(jié)論

肉雞在22 d時(shí)受到艾美耳球蟲(chóng)感染主要影響22～28 d的生長(zhǎng)性能。日糧中添加400 mg/kg牛至油可以減輕球蟲(chóng)感染對(duì)肉雞的影響，其效果與抗球蟲(chóng)藥一致。根據(jù)本研究的結(jié)果及已知使用抗球蟲(chóng)藥物的危害，在肉雞日糧中添加400 mg/kg牛至油可能是抗球蟲(chóng)藥物的替代選擇。