金花淑 蔡克瑞 金在順 胡江平

【摘要】目的 研究HSP60在各級(jí)胃淋巴瘤中的表達(dá)及其臨床意義。方法 應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)胃淋巴瘤標(biāo)本中HSP60的表達(dá)。結(jié)果 HSP60在胃淋巴瘤中達(dá)程度隨著胃淋巴瘤病理級(jí)別的升高而增多， 不同級(jí)別之間存在顯著性差異。結(jié)論 檢測(cè)胃淋巴瘤組織中HSP60能夠快速、準(zhǔn)確地反映腫瘤細(xì)胞的增殖狀態(tài)及評(píng)價(jià)預(yù)后， 對(duì)判定胃淋巴瘤的惡性程度及指導(dǎo)治療有一定意義。

【關(guān)鍵詞】胃淋巴瘤;免疫組化;HSP60

【中圖分類號(hào)】R735.2【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】ISSN.2095.6681.2019.33..01

胃淋巴瘤是一種來(lái)源于胃粘膜下層淋巴組織的惡性腫瘤，是淋巴結(jié)外常見(jiàn)的淋巴瘤。好發(fā)于青壯年男性。發(fā)病部位以胃竇部及幽門(mén)前區(qū)最多見(jiàn)，病灶可單發(fā)或多發(fā)。該病的臨床癥狀缺乏特異性，與胃癌相似。手術(shù)前診斷較困難，胃鏡檢查和胃腸道鋇餐檢查再結(jié)合活檢病理有助于該病的明確診斷。熱休克蛋白（Heat shock protein， HSP） 是一類廣泛存在于生物體內(nèi)具有高度保守性的蛋白質(zhì)，有研究表明，在惡性腫瘤時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的HSP表達(dá)也會(huì)相應(yīng)的增高[1]。我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法，檢測(cè)胃淋巴瘤標(biāo)本中HSP60蛋白的表達(dá)， 分析不同病理學(xué)分級(jí)中HSP60的表達(dá)水平， 并對(duì)其意義進(jìn)行初步探討。

1 資料與方法

1.1? 一般資料

共收集胃淋巴瘤標(biāo)本16例，來(lái)源于2008年9月～2017年9月牡丹江市腫瘤醫(yī)院、牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬紅旗醫(yī)院、牡丹江市第一人民醫(yī)院、哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院等，其中男12 例， 女4例，年齡在25～50歲之間，平均年齡為42歲，選取的樣本經(jīng)過(guò)病理學(xué)檢查確診病例，對(duì)其重新進(jìn)行切片、染色和免疫組化研究。按WHO對(duì)其進(jìn)行病理學(xué)分級(jí)，共分四級(jí)，每個(gè)級(jí)別選取4例。

1.2? 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑

全能顯微鏡BX43（ OLYMPUS， 日本），DAB顯色劑（ 武漢 博士德生物技術(shù)有限公司）、SP通用試劑盒、兔抗人HSP60 （ Cell Signaling， 美國(guó)）。

1.3? 免疫組織化學(xué)方法

切片經(jīng)脫蠟、抗原修復(fù)、滴加一抗、二抗、顯色等步驟。

1.4? 結(jié)果判定

胃淋巴瘤免疫組化染色陽(yáng)性表現(xiàn)為細(xì)胞質(zhì)染色呈現(xiàn)棕褐色或棕黃色均質(zhì)或顆粒狀。每組隨機(jī)選取每張切片的5個(gè)視野， 使用彩色顯微圖像分析儀進(jìn)行組織化學(xué)定量灰度分析，通過(guò)測(cè)定其陽(yáng)性染色的積分光密度值（IOD）來(lái)反映HSP60的表達(dá)，根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，判定胃淋巴瘤病理學(xué)分級(jí)與HSP60表達(dá)的關(guān)系。

1.5? 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用“x±s”表示，不同級(jí)別間比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05表明差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

鏡下可見(jiàn)，HSP60在胃淋巴瘤中的表達(dá)陽(yáng)性時(shí)細(xì)胞質(zhì)中呈現(xiàn)棕黃色顆粒狀，少數(shù)細(xì)胞膜著色，細(xì)胞核未見(jiàn)著色。不同級(jí)別的淋巴瘤HSP60表達(dá)存在顯著差異（P<0.05），見(jiàn)表1。

3 討 論

HSP是機(jī)體在應(yīng)激狀態(tài)下，細(xì)胞內(nèi)生成的一種高度保守的蛋白質(zhì)。HSP60是HSPs家族中的重要成員， 屬于分子伴侶家族，其表達(dá)程度與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[2]。本研究結(jié)果顯示， HSP60 在胃淋巴瘤各級(jí)別中都有表達(dá)，且隨著惡性程度的升高， 其表達(dá)也增多， 表明HSP60的表達(dá)與胃淋巴瘤的發(fā)展過(guò)程存在正相關(guān)關(guān)系。而且，不同分級(jí)胃淋巴瘤中HSP60的表達(dá)存在明顯的差異，且隨著分級(jí)其表達(dá)逐漸增高，這也表明HSP60過(guò)度表達(dá)可能不僅參與腫瘤細(xì)胞的增殖，可能還對(duì)腫瘤細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用。其原因可能是在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，機(jī)體出現(xiàn)了基因的損傷和蛋白質(zhì)的異常堆積，同時(shí)快速生長(zhǎng)的腫瘤細(xì)胞造成局部組織的缺血缺氧，HSP60被誘導(dǎo)大量合成。胃淋巴瘤組織中高表達(dá)的HSP60也可能與其容易發(fā)生的轉(zhuǎn)移相關(guān)，HSP60可作為胃淋巴瘤時(shí)一項(xiàng)輔助性檢查指標(biāo)，對(duì)于判定腫瘤的分級(jí)分期有著重要的指導(dǎo)意義。

參考文獻(xiàn)

[1] Borchel A，Komisarczuk AZ，Rebl A，et al.Systematic identification and characterization of stress-inducible heat shock proteins（HSPs） in the salmon louse （Lepeophtheirus salmonis）.Cell Stress Chaperones，2018，23（1）：127-139.

[2] Zhao L， Liu Y，Sun X，et al.Serum proteome analysis for profiling protein markers associated with lymph node metastasis in colorectal carcinoma[J].J Comp Pathol，2011，144（2-3）：187-194.

本文編輯：李 豆