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        日糧添加益生菌對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、免疫功能和腸道菌群的影響

        2019-01-25 09:21:08劉鳳美
        中國(guó)飼料 2018年24期
        關(guān)鍵詞:枯草芽孢乳酸菌

        劉鳳美,張 磊,黃 彬

        (1.開封市畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心,河南開封 475000;2.開封市畜牧工作站,河南開封 475000)

        隨著人們對(duì)安全、環(huán)保和可持續(xù)發(fā)展的認(rèn)識(shí)不斷深入,濫用抗生素的危害已成為共識(shí),抗生素的限用、禁用在飼料行業(yè)中已是大勢(shì)所趨(張兆順等,2012)。但抗生素禁用以后,面對(duì)集約化高效生產(chǎn)的需要,如何尋找抗生素的替代品成了飼料研究的熱點(diǎn)。益生菌是一類活的微生物制品,飼料工業(yè)中通常經(jīng)過分離、培養(yǎng)、發(fā)酵等工藝制得,作為添加劑在飼料生產(chǎn)中使用。益生菌進(jìn)入動(dòng)體后可以在腸道內(nèi)定植,增加有益菌數(shù)量,抑制有害菌生長(zhǎng),起到調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡的作用,并促進(jìn)腸道消化酶的分泌,提高營(yíng)養(yǎng)素的吸收利用,從而改善動(dòng)物生產(chǎn)性能,并具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的效果(唐志剛,2010 ;Gaskins 等,2002)。與抗生素不同,使用益生菌不產(chǎn)生耐藥菌和藥物殘留,無毒無害,對(duì)環(huán)境沒有污染,是一類比較理想的抗生素替代品(謝全喜等,2012)。因此,本試驗(yàn)旨在通過在肉雞日糧中添加乳酸菌、枯草芽孢桿菌和復(fù)合菌,研究不同的益生菌對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、免疫功能和腸道菌群的影響,為促進(jìn)益生菌在畜禽養(yǎng)殖業(yè)中的推廣應(yīng)用提供相應(yīng)的理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料 本試驗(yàn)選用乳酸菌、枯草芽孢桿菌和復(fù)合菌作為研究的菌種,其中復(fù)合菌是以乳酸菌和枯草芽孢桿菌按照1 ∶1 的比例均勻混合而成,所有益生菌制劑的有效活菌含量均大于5×109CFU/g,購(gòu)自西安某生物科技有限公司。

        1.2 日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平 根據(jù)NRC(1994)肉雞營(yíng)養(yǎng)需要,以及我國(guó)《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(2004)配制試驗(yàn)所需的基礎(chǔ)日糧,采用玉米- 豆粕型日糧,其成分和營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

        1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選取1 日齡雄性AA 肉雞480 羽,隨機(jī)分為4 組,每組6 個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)20 只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧(A 組),試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%的乳酸菌(B 組)、0.5%的枯草芽孢桿菌(C 組)和0.5% 的混合菌(D 組)。為保證益生菌制劑的活性和效果,試驗(yàn)料均在每天早上使用攪拌機(jī)混合后使用。整個(gè)試驗(yàn)飼養(yǎng)周期為42 d。

        表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

        1.4 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)在全封閉雞舍內(nèi)進(jìn)行,采用3 層階梯式籠養(yǎng),1 ~21 日齡時(shí)每籠飼養(yǎng)肉雞10只,22 ~42 日齡時(shí)每籠飼養(yǎng)肉雞5 只。雞舍內(nèi)的環(huán)境條件按照《AA 肉仔雞飼養(yǎng)管理手冊(cè)》的要求設(shè)定,肉仔雞自由采食和飲水。每天定時(shí)投料,注意觀察雞群健康狀況,并準(zhǔn)確記錄各組飼料消耗量。其他免疫程序按照雞場(chǎng)常規(guī)操作進(jìn)行。

        1.5 樣品采集與分析

        1.5.1 生產(chǎn)性能測(cè)定 第21 天和第42 天,以重復(fù)為單位對(duì)肉雞進(jìn)行空腹稱重,肉雞稱重前禁食12 h,自由飲水。根據(jù)試驗(yàn)期間的記錄計(jì)算肉雞在各階段的平均日增重、平均日采食量和料重比。

        1.5.2 免疫功能指標(biāo)測(cè)定

        (1)免疫器官指數(shù) 第21 天和第42 天每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取3 只肉雞(禁食12 h,自由飲水),空腹稱重后翅下靜脈采血,屠宰。仔細(xì)摘取肉雞胸腺、脾臟和法氏囊,并剔除脂肪和結(jié)締組織,然后稱重,免疫器官指數(shù)計(jì)算公式如下:

        免疫器官指數(shù)= 免疫器官鮮重(g)/ 宰前空腹體重(kg)。

        (2)血清免疫球蛋白含量 將試驗(yàn)采集的血液放置在促凝管中,室溫靜置20 min 后,3000 r/min離心15 min,取上層血清,采用南京建成的ELISA試劑盒測(cè)定IgA、IgG 和IgM 的含量。

        1.5.3 腸道菌群測(cè)定 解剖上述屠宰的肉雞,取盲腸冷藏保存待用。在無菌環(huán)境中準(zhǔn)確稱取1 g 盲腸內(nèi)容物,加入9 mL 滅菌的生理鹽水,振蕩15 min,進(jìn)行10-1倍稀釋;接著,吸取1 mL 10-1倍稀釋液,再加入9 mL 滅菌的生理鹽水,振蕩15 min,進(jìn)行10-2倍稀釋,并依次進(jìn)行10-3~10-6倍稀釋(蔣正宇等,2005)。將稀釋液分別于特定的培養(yǎng)基中培養(yǎng)(大腸桿菌用伊紅美藍(lán)瓊脂,沙門氏菌用SS 瓊脂,乳酸桿菌用MRS 瓊脂),其中,大腸桿菌、沙門氏菌在37℃生化培養(yǎng)箱中有氧培養(yǎng)24 h后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),乳酸桿菌在37℃生化培養(yǎng)箱中厭氧培養(yǎng)48 h 后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),菌群數(shù)量以1 g腸道內(nèi)容物中細(xì)菌個(gè)數(shù)的對(duì)數(shù)值[l g(CFU/g)]來表示(王曉霞等,2006)。

        1.6 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2016 初步整理后,采用SPSS 22.0 軟件中的0ne-way ANOVA進(jìn)行單因素方差分析,采用Duncan’s 進(jìn)行多重比較,P <0.05 為差異顯著。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”來表示。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 益生菌對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響 由表2 可知,日糧添加益生菌可以顯著提高肉雞的平均日增重和日采食量(P <0.05)。具體來說,與對(duì)照組相比,乳酸菌、枯草芽孢桿菌和復(fù)合菌均能顯著提高21 日齡時(shí)肉雞的平均日增重和日采食量(P<0.05),且復(fù)合菌對(duì)日增重的提高效果顯著優(yōu)于枯草芽孢桿菌和乳酸菌(P <0.05),但各處理組21 日齡時(shí)肉雞料重比之間無顯著性差異(P >0.05);42 日齡時(shí),試驗(yàn)組的平均日增重和日采食量顯著高于對(duì)照組(P <0.05),且枯草芽孢桿菌對(duì)平均日增重的改善效果顯著優(yōu)于乳酸菌(P<0.05),而復(fù)合菌對(duì)平均日增重的提高顯著優(yōu)于枯草芽孢桿菌(P <0.05)。此外,復(fù)合菌組肉雞的平均日采食量還要顯著高于乳酸菌和枯草芽孢桿菌(P <0.05),但料重比顯著高于其他3 組(P<0.05)。

        表2 益生菌對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響

        2.2 益生菌對(duì)肉雞免疫功能的影響 如表3 所示,不管是21 日齡還是42 日齡,與對(duì)照組相比,各試驗(yàn)組均顯著提高了肉雞的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)(P <0.05),且復(fù)合菌的效果要優(yōu)于乳酸菌和枯草芽孢桿菌(P <0.05)。

        表3 益生菌對(duì)肉雞免疫器官指數(shù)的影響

        從表4 可以看出,益生菌還對(duì)肉雞血清免疫球蛋白的水平產(chǎn)生了一定的影響。與對(duì)照組相比,乳酸菌、枯草芽孢桿菌和復(fù)合菌均提高了肉仔雞21 日齡時(shí)血清中IgG 的水平(P <0.05),且枯草芽孢桿菌IgG 的水平顯著高于乳酸菌(P <0.05),而復(fù)合菌IgG 的水平又顯著高于枯草芽孢桿菌(P <0.05);42 日齡時(shí),枯草芽孢桿菌IgG 的水平要顯著高于對(duì)照組和乳酸菌組(P <0.05),復(fù)合菌IgG 的水平又顯著高于枯草芽孢桿菌(P <0.05)。

        表4 益生菌對(duì)肉雞血清免疫球蛋白的影響 ng/mL

        2.3 益生菌對(duì)肉雞腸道菌群的影響 由表5 可知,不論是21 日齡還是42 日齡,與對(duì)照組相比,日糧中添加乳酸菌、枯草芽孢桿菌和復(fù)合菌均可顯著降低腸道有害菌大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量(P <0.05),提高腸道有益菌乳酸菌的數(shù)量(P<0.05),綜合來看,復(fù)合菌的使用效果要優(yōu)于單純的乳酸菌或枯草芽孢桿菌。

        表5 益生菌對(duì)肉雞腸道菌群的影響 lg CFU/g

        3 討論

        已有研究表明,益生菌通過增加腸道內(nèi)有益菌的生長(zhǎng),抑制有害菌的增殖,促進(jìn)腸道消化酶的分泌等途徑來提高飼料養(yǎng)分的吸收,改善飼料利用率(唐志剛等,2010);此外,在腸道內(nèi)定植的益生菌能合成氨基酸、維生素等多種營(yíng)養(yǎng)素,還會(huì)分泌未知的促生長(zhǎng)因子,從而提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能(廖玉英等,2014)。曲湘勇等(2005)的研究表明,在黃羽肉雞日糧中添加乳酸菌,肉雞日增重得到顯著提高,料重比顯著降低;陸銀等(2013)的研究表明,在AA 肉雞日糧中添加以枯草芽孢桿菌、糞腸球菌和蠟樣芽孢桿菌組成的復(fù)合菌,可以顯著提高肉雞21 ~35 日齡的生產(chǎn)性能。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),使用乳酸菌、枯草芽孢桿菌或兩者的復(fù)合菌均可顯著提高肉雞的平均日增重和日采食量,比較而言,使用復(fù)合菌的效果優(yōu)于單一菌種,這與郭欣怡等(2016)的研究結(jié)果一致,這表明益生菌的使用應(yīng)注意合理的組合搭配,往往會(huì)有更好的促生長(zhǎng)效果。

        肉雞免疫器官如胸腺、脾臟和法氏囊的發(fā)育情況,與其相對(duì)重量有關(guān),相對(duì)重量的增加,在一定程度上表明機(jī)體免疫功能的增強(qiáng)(唐志剛等,2010)。益生菌在腸道定植時(shí),除了合成分泌相關(guān)營(yíng)養(yǎng)素,還可以作為抗原物質(zhì)刺激機(jī)體免疫器官的發(fā)育(張菊等,2012)。在本試驗(yàn)中,與對(duì)照組相比,乳酸菌、枯草芽孢桿菌和復(fù)合菌均能夠顯著提高肉雞的免疫器官指數(shù),促進(jìn)胸腺、脾臟和法氏囊的發(fā)育。此外,家禽體內(nèi)的免疫球蛋白如IgA、IgG 和IgM,能幫助機(jī)體抵抗外界的侵害,也能在一定程度上反映出機(jī)體免疫功能的情況(張凱等,2011)。在本試驗(yàn)中,雖然血清中IgA 和IgM 水平在各處理組之間無顯著性變化,但添加乳酸菌、枯草芽孢桿菌和復(fù)合菌均可顯著提高肉雞血清中IgG 水平,且以復(fù)合菌的效果最優(yōu),這表明益生菌的確可以一定程度上改善肉雞的免疫功能,提高其抗病力。

        通過飼喂動(dòng)物益生菌,除了自身在腸道定植,還能通過合成分泌抗菌素、有機(jī)酸等物質(zhì)對(duì)有害菌的生長(zhǎng)進(jìn)行抑制,調(diào)節(jié)腸道微生物區(qū)系的平衡(白耀輝等,2011)。研究表明,腸道中的乳酸菌通過代謝產(chǎn)生乳酸來降低腸道的pH,從而抑制有害菌如大腸桿菌等的增殖,而枯草芽孢桿菌在腸道中可以創(chuàng)造出厭氧環(huán)境,有利于乳酸菌生長(zhǎng),從而進(jìn)一步加強(qiáng)乳酸菌的功能(任景樂等,2014 ;王虹玲等,2014)。在本試驗(yàn)中,使用乳酸菌、枯草芽孢桿菌和復(fù)合菌均能顯著降低腸道中有害菌大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量,增加有益菌乳酸菌的數(shù)量,且復(fù)合菌的效果更優(yōu),這表明乳酸菌和枯草芽孢桿菌具有協(xié)同促進(jìn)的效果。

        4 小結(jié)

        綜上所述,日糧中添加乳酸菌、枯草芽孢桿菌或二者混合的復(fù)合菌均可顯著提高肉雞的平均日增重和日采食量,改善其生產(chǎn)性能,促進(jìn)機(jī)體免疫器官的發(fā)育,提高免疫抗病功能,并促進(jìn)有益菌增殖,抑制有害菌生長(zhǎng),調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡。與單菌種相比,復(fù)合菌的使用效果更佳,這可能是由于其具有優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)、協(xié)同促進(jìn)的作用。

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