陳虹宇， 劉 麗

(中國刑事警察學(xué)院痕跡檢驗技術(shù)系， 遼寧沈陽 110854)

0 引言

指紋作為“證據(jù)之王”，在串并案件、身份識別等方面有重要作用。故意殺人、搶劫、強奸等暴力犯罪現(xiàn)場往往會遺留有犯罪嫌疑人或者被害人血指印?，F(xiàn)場遺留的血指印通常分為兩類：一類是可見血指印，指乳突紋線明顯可見的指?。涣硪活愂菨撛谘赣?即血潛指印)，指含血量較少或遺留在深色、有背景干擾的表面上微弱或不清晰指印[1]。對于滲透性客體上的血潛指印，基層刑事技術(shù)部門通常采用四甲基聯(lián)苯胺法、無色孔雀綠顯現(xiàn)法、隱色龍膽紫法等進行顯現(xiàn)[2-4]。但上述方法顯現(xiàn)出的指印紋線均呈深色，與深色客體或復(fù)雜背景(如彩色畫報紙、黑色襯墊紙等)的反差不明顯，因此，上述方法只能對淺色或背景簡單的客體表面血指印進行顯現(xiàn)，有較大的局限性。目前，通過對原有顯現(xiàn)方法進行改進或?qū)ふ腋哽`敏的新型顯現(xiàn)方法擴大指印顯現(xiàn)范圍，已成為血潛指印顯現(xiàn)的研究重點[5-7]。

紙張作為生活必需品，常以票據(jù)、合同、借條、報紙、雜志等形式在暴力犯罪案件現(xiàn)場出現(xiàn)，并且常常為犯罪嫌疑人所接觸而易在其上形成血潛指印。紙張的多孔結(jié)構(gòu)決定了其能吸收遺留在表面的血潛指印中所含的物質(zhì)(如水、血紅蛋白、氨基酸、油脂等)，因此紙張上血潛指印的顯現(xiàn)主要依靠指印物質(zhì)與顯現(xiàn)試劑之間的相互作用來實現(xiàn)。茚二酮(1,2-indanedione，IDO)與DFO(1,8-diazafluoren-9-one)因極易與血潛指印中的氨基酸相互作用，是理想的顯現(xiàn)血潛指印的試劑，適用于滲透性客體表面的血潛指印顯現(xiàn)[8，9]。此外，兩種試劑均能與氨基酸反應(yīng)生成熒光物質(zhì)。因此，實驗可以利用多波段光源對已顯血潛指印激發(fā)，由此產(chǎn)生的強烈熒光可以排除客體深色背景或復(fù)雜背景的干擾。

為系統(tǒng)比較茚二酮、DFO顯現(xiàn)試劑，對紙張類客體表面的血潛指印的顯現(xiàn)效果以有效提高紙張類客體血潛手印的顯現(xiàn)率，本研究配制茚二酮、DFO顯現(xiàn)試劑，并將其應(yīng)用于黑色卡紙、報紙、畫報紙、格線稿紙、便利貼紙等5類紙張客體表面的血潛指印顯現(xiàn)。實驗獲得了令人滿意的效果，茚二酮、DFO顯現(xiàn)試劑能較好的顯現(xiàn)深色背景或復(fù)雜背景紙類客體。此外，茚二酮試劑的顯現(xiàn)效果普遍優(yōu)于DFO試劑，但是對于很少血量指印以及陳舊血潛指印顯現(xiàn)，DFO具有明顯的優(yōu)勢。

1 實驗部分

1.1 試劑與材料

茚二酮(1,2-indanedione，C9H6O2)、DFO(1,8-diazafluoren-9-one，C11H6N2O)均購于蘇州市貝克生物科技有限公司，石油醚(C7H7BrMg)、甲醇(CH3OH)均購于天津恒興化學(xué)試劑制造有限公司；無水乙醇(CH3CH2OH)、1,1,2-三氯三氟乙烷(1,1,2-trichlorotrifluoroethane，C2Cl3F3)均購于國藥集團化學(xué)試劑有限公司；丙酮(CH3COCH3)、乙酸乙酯(CH3COOC2H5)、冰乙酸(CH3COOH)均購于天津博迪化工股份有限公司。實驗所用試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

BS223S型電子分析天平(德國賽多利斯基公司)、移液槍(1 000～5 000 μL，大龍興創(chuàng)實驗儀器有限公司)用于茚二酮、DFO試劑的配制；高低溫濕熱試驗箱(東莞市正航儀器設(shè)備有限公司)用于血潛指印顯現(xiàn)中的加熱過程。YZ-SPL13F手持氙燈多波段光源(北京博瑞恩特科技有限公司)、佳能100D型單反數(shù)碼相機(佳能公司)用于已顯血潛指印的熒光激發(fā)與拍照固定。

1.3 實驗步驟

1.3.1 顯現(xiàn)試劑的配制

茚二酮的配制：將0.1 g茚二酮粉末溶于1 mL冰乙酸、9 mL乙酸乙酯中，再加入90 mL三氟三氯乙烷，攪拌均勻，置于棕色瓶中避光密封保存。

DFO的配制：取0.05 g DFO，溶于10 mL甲醇溶液中，攪拌并水浴加熱至溶解，然后加入2 mL冰醋酸，攪拌均勻，再加入10 mL乙酸乙酯和78 mL三氟三氯乙烷，置于棕色瓶中避光密封保存。

圖1 茚二酮和DFO顯現(xiàn)血潛指印的原理圖

1.3.2 血潛指印樣本的捺印

所有的新鮮血液均由同一志愿者提供。首先用棉簽蘸取等量新鮮血液，將血液均勻涂抹于手指，再用手指分別在相應(yīng)客體上以相同且均勻的力度連續(xù)按捺，留下血液濃度由深至淺的成串新鮮血手印，選取較淺的血指印樣本用于比較茚二酮、DFO試劑的顯現(xiàn)效果。

1.3.3 血潛指印樣本的固定與顯現(xiàn)

為了避免溫濕度變化帶來的干擾，本實驗血潛指印樣本均存放于溫度15 ℃，濕度65%的環(huán)境下。顯現(xiàn)前，需對血指印進行固定，利用一次性滴管吸取適量乙醇溶液滴加至血潛指印樣本上，放在陰涼干燥處陰干，重復(fù)以上操作3次。

實驗中利用茚二酮、DFO對不同紙類客體表面的血潛指印進行溶液滴顯。將顯現(xiàn)后的血潛指印樣本放入高低溫濕熱箱內(nèi)，設(shè)定溫度為90 ℃，加熱20 min。將多波段光源調(diào)至合適波段照射觀察已顯血潛指印，用單反數(shù)碼相機對多波段光源激發(fā)后的已顯血潛指印進行拍照固定。

2 結(jié)果與討論

2.1 茚二酮和DFO顯現(xiàn)血潛指印的原理

血液主要由血細(xì)胞(約占血液的45%)和血漿(約占血液的55%)組成。血細(xì)胞含有血小板、紅血球和白血球。血漿內(nèi)含有90%～91%的水分、6.5%～8.5%的蛋白質(zhì)(如白蛋白、球蛋白、纖維蛋白原、脂蛋白等)、各種營養(yǎng)成分以及2%的低分子物質(zhì)(如無機鹽、氧、激素、酶、抗體和細(xì)胞代謝產(chǎn)物等)[10，11]。茚二酮與DFO顯現(xiàn)血潛指印的原理相似(圖1)：在加熱條件下，能與氨基酸分子中的α-氨基和α-羥基同時反應(yīng)，經(jīng)氧化、脫氫、脫羧作用生成絡(luò)合物，且該絡(luò)合物在適宜波段的光源的激發(fā)下能發(fā)出強烈的橙色熒光[12]。實驗中茚二酮、DFO顯現(xiàn)的血潛指印采用510 nm、490 nm波段的光源激發(fā)，并用590 nm長通橙色濾光鏡、數(shù)碼相機對已顯血指印進行拍照固定。

2.2 茚二酮和DFO對不同紙張上血潛指印顯現(xiàn)效果比較

實驗分別使用茚二酮和DFO對黑色卡紙、報紙、畫報紙、格線稿紙、便利貼5類紙張客體上血潛指印進行顯現(xiàn)(每種方法對每類客體上的血潛手印顯現(xiàn)5次)。顯現(xiàn)后對手印的顯現(xiàn)效果進行觀察，并選擇合適濾光鏡，利用單反數(shù)碼相機照相固定。實驗結(jié)果顯示(見表1，圖2)，茚二酮顯現(xiàn)的指印紋線連貫，其顯現(xiàn)效果普遍優(yōu)于DFO，兩種試劑對畫報紙上血潛指印的顯現(xiàn)效果均優(yōu)于其他4種客體。從承痕體角度來分析，造成上述顯現(xiàn)效果差異的原因是畫報紙相對于其他客體對血液的吸收滲透性更好，能使血液均勻分散于紙張中，使得其可以與顯現(xiàn)試劑充分反應(yīng)[13]。對于茚二酮試劑，由于報紙的背景熒光干擾指印紋線特征，其在報紙上的血潛指印顯現(xiàn)效果不佳；受報紙、黑色襯墊紙、紫色便利貼背景熒光嚴(yán)重干擾， DFO試劑顯現(xiàn)的指印紋線輪廓、大部分細(xì)節(jié)被遮蓋。

表1 茚二酮與DFO對不同紙張上血潛指印顯現(xiàn)效果比較

注：評價方式采用3分制評分，其中“0”代表未顯現(xiàn)出紋線或紋線很淺；“1”代表顯出指印輪廓，有少量細(xì)節(jié)特征；“2”代表顯出部分紋線，有若干細(xì)節(jié)特征，顯現(xiàn)效果較好；“3”代表紋線清晰連貫，指印顯現(xiàn)效果很好。

圖2 茚二酮和DFO對不同紙類客體表面血潛指印的顯現(xiàn)效果圖(虛線方框為細(xì)節(jié)特征統(tǒng)計區(qū))：(a)茚二酮；(b)DFO

為探究茚二酮和DFO試劑顯現(xiàn)后的指印可鑒定率，實驗對已顯指印(共50枚)相同部位(圖2白色虛線方框內(nèi))的細(xì)節(jié)特征數(shù)進行統(tǒng)計。結(jié)果如圖3所示，其中統(tǒng)計的細(xì)節(jié)特征包含起點、終點、分歧、結(jié)合、小勾、小點、小棒、小眼、小橋。整體來看，茚二酮顯現(xiàn)的血潛指印的細(xì)節(jié)特征數(shù)目更多，故其顯現(xiàn)后的指印可鑒定率相對較高。茚二酮和DFO試劑顯現(xiàn)的畫報紙上血潛指印的細(xì)節(jié)特征數(shù)目最多。對于DFO顯現(xiàn)的襯墊紙、便利貼紙上的血潛指印細(xì)節(jié)特征個數(shù)分別為1、0，說明DFO法不適宜顯現(xiàn)襯墊紙、便利貼上的血潛指印。

圖3 相同部位細(xì)節(jié)特征數(shù)目統(tǒng)計示意圖

2.3 茚二酮和DFO對連續(xù)捺印指紋顯現(xiàn)效果比較

實驗分別在黑色卡紙、畫報紙、報紙、格線稿紙、紫色便利貼紙5類紙張客體上以相同的力度連續(xù)捺印5次，每種客體上做10組連續(xù)捺印。使用茚二酮、DFO分別對血潛指印進行顯現(xiàn)。統(tǒng)計5種客體上不同捺印次數(shù)的血潛指印的顯出率，比較兩種試劑的顯現(xiàn)靈敏度，統(tǒng)計結(jié)果如表2所示。

對于畫報紙，茚二酮能較好的顯現(xiàn)前2次捺印的血潛指印，第3次捺印的血潛指印的顯出率高達60%，第5次捺印的指印無法顯出；而DFO對第1次捺印的血潛指印的顯出率低于茚二酮，但是仍能顯出第5次捺印的血潛指印。對于報紙，茚二酮同樣能顯現(xiàn)第3次捺印的血潛指印，但相較畫報紙顯現(xiàn)率較低；DFO法同樣能顯現(xiàn)第5次捺印的指印，顯出率低于畫報紙上的指印。對于黑色襯墊紙，茚二酮只能顯現(xiàn)前3次捺印的血潛指印，但是第3次血潛指印的顯出率較低；由于背景熒光的干擾，DFO在其上的顯現(xiàn)率為0%。對于格線稿紙，茚二酮能顯現(xiàn)第3次捺印的血潛指??；而DFO能顯現(xiàn)第4次捺印的指印。對于紫色便利貼紙，由于背景熒光的強烈干擾，茚二酮法和DFO法對指印的顯出率都不高，從表中也可看出，紙張背景熒光的干擾強烈影響DFO法在其上的顯現(xiàn)效果。綜上，在顯現(xiàn)新鮮微弱血潛指印時，DFO法的顯現(xiàn)效果要優(yōu)于茚二酮法。

表2 茚二酮和DFO在不同紙張上顯現(xiàn)靈敏度的比較

2.4 對不同遺留時間血潛指印顯現(xiàn)效果比較

隨著時間推移，遺留在客體表面的指印物質(zhì)中所含的水分易蒸發(fā)、氨基酸易水解，因此指印遺留在客體表面后最佳的顯現(xiàn)時間是2～48 h，通常遺留時間在48 h以上的指印被稱為陳舊指印[14，15]。檢驗顯現(xiàn)試劑靈敏度的重要指標(biāo)之一是對陳舊血潛指印的顯現(xiàn)效果。為考察茚二酮和DFO的時效性，實驗在畫報紙、報紙、黑色卡紙、格線稿紙、紫色便利貼紙5類紙張上分別捺印20枚血指印，采用茚二酮和DFO顯現(xiàn)10枚捺印于每類客體表面上的血指印，對顯現(xiàn)后的結(jié)果進行統(tǒng)計，實驗結(jié)果見表3。由表可得，茚二酮法顯現(xiàn)新鮮血潛指印時顯現(xiàn)效果顯著優(yōu)于DFO法，但是對于遺留時間較長的陳舊血指印，DFO法優(yōu)于茚二酮法。

表3 茚二酮和DFO對不同遺留時間血潛指印顯現(xiàn)效果的比較

注：評價方式采用3分制評分，其中“0”代表未顯現(xiàn)出紋線或紋線很淺；“1”代表顯出指印輪廓，有少量細(xì)節(jié)特征；“2”代表顯出部分紋線，有若干細(xì)節(jié)特征，顯現(xiàn)效果較好；“3”代表紋線清晰連貫，指印顯現(xiàn)效果很好。

圖4 茚二酮和DFO不同紙類客體表面陳舊血潛指印的顯現(xiàn)效果圖：(a)畫報紙；(b)報紙；(c)黑色襯墊紙；(d)格線稿紙；(e)紫色便利貼紙

如圖3所示，為茚二酮、DFO顯現(xiàn)遺留時間為7天的血潛指印效果圖。DFO法在畫報紙、報紙以及格線稿紙上的顯現(xiàn)效果明顯優(yōu)于茚二酮法顯現(xiàn)的指印，顯現(xiàn)的指印有少量的細(xì)節(jié)特征，部分紋線流暢清晰，而茚二酮法對黑色襯墊紙上的血潛指印顯現(xiàn)具有優(yōu)勢。兩種方法均對于紫色便利貼上血潛指印的顯現(xiàn)效果不佳。

綜上，當(dāng)血潛指印遺留時間較短時，茚二酮法更加適合顯現(xiàn)；當(dāng)遺留時間達到7天時，黑色襯墊紙、紫色便利貼上的血潛指印應(yīng)采用茚二酮法進行顯現(xiàn)，而畫報紙、報紙、格線稿紙上的血潛指印應(yīng)采用DFO法顯現(xiàn)。

3 結(jié)論

實驗利用茚二酮、DFO試劑顯現(xiàn)不同類紙張客體上的血潛指印，系統(tǒng)比較了兩種試劑在不同客體上的顯現(xiàn)效果，進一步探究兩種試劑對新鮮少量血潛指印、陳舊血潛指印的顯現(xiàn)效果。結(jié)果顯示，DFO在黑色襯墊紙、紫色便利貼紙上的顯現(xiàn)效果不佳，茚二酮對新鮮血潛指印的顯現(xiàn)效果普遍優(yōu)于DFO試劑，而DFO對于畫報紙、報紙、格線稿紙上的新鮮微弱血潛指印以及陳舊血潛指印(遺留時間達7天)的顯現(xiàn)具有優(yōu)勢。該實驗可為紙張類客體表面血潛指印的顯現(xiàn)試劑選取提供依據(jù)。