李永貴，尹弢，張錫霞，徐偉娜，王晶△

(1.山東省藥學科學院 山東省化學藥物重點實驗室 ，濟南 250101；2.山東省藥學科學院 山東省醫(yī)用高分子材料重點實驗室 ， 濟南 250101)

1 引 言

一次性使用輸液器是一種用量大、使用面廣的一次性醫(yī)用器具[1-2]。一直以來其制作材質向著優(yōu)質、無毒、安全的方向發(fā)展[2]，但由于受生產工藝及技術的限制，在一次性輸液器生產工藝中，不可避免的引入一些對人體有一定傷害的化學溶劑，而對這些溶劑的檢測、控制也成為一次性輸液器安全生產的重要環(huán)節(jié)[3]。

環(huán)己酮在一次性使用輸液器生產過程中作為粘合劑，廣泛應用于輸液器各部件的連接[4-6]。環(huán)已酮是一種化學溶劑，有強烈的刺激性，其沸點高，不易完全清除，容易殘留在一次性輸液器的結合部位及內腔內，最終在臨床使用過程中遷移至藥液中并進入人體，從而對人的身體健康造成威脅[7-9]。所以，準確檢測一次性使用輸液器中殘留環(huán)己酮及臨床使用過程遷移環(huán)己酮對輸液器的質量控制和人類身體健康具有重要意義。

2 儀器與試劑

安捷倫7890B氣相色譜儀，氫火焰離子化器(FID)(美國，Agilent 公司)，BT125D電子天平(德國，Sartorius 公司)。

環(huán)己酮(對照品，中國生物制品研究院)，一次性使用輸液器，正己烷(色譜純，山東禹王實業(yè)有限公司化工分公司)，異丙醇(色譜純，山東禹王實業(yè)有限公司化工分公司)，無水乙醇(色譜純，山東禹王實業(yè)有限公司化工分公司)，實驗室用去離子水。

3 方法與結果

3.1 色譜條件

色譜柱：GsBP-5毛細管柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm)，氫火焰離子化器(FID)，進樣口溫度200℃，檢測器溫度250℃，柱溫90℃，分流比5:1，進樣量1.0μL，載氣為氮氣，流速2 mL/min。

3.2 溶液制備

對照品儲備液：精密稱取環(huán)己酮對照品約24.48 mg，置25 mL量瓶中，用無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。

對照品溶液：精密量取對照品儲備液5 mL置100 mL量瓶中，無水乙醇稀釋刻度搖勻。

空白溶液：無水乙醇、正己烷、異丙醇。

環(huán)己酮浸提溶液：取一次性使用輸液器2套，去掉外包裝，剪碎，置200 mL圓底燒瓶中，分別用無水乙醇、正己烷、異丙醇3種溶劑150 mL，加熱回流1 h，進行浸提，將浸提液冷卻，備用。

環(huán)己酮遷移溶液：取無水乙醇、乙醇水溶液(密度：0.9377 mg/mL)各250 mL，分別與一次性使用輸液器連接，調節(jié)滴速，使藥液在12 h內滴完，將流出的藥液收集于500 mL量瓶，備用。

3.3 專屬性試驗

精密量取3.2項下空白溶液及環(huán)己酮對照溶液各1.0 μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，見圖1。結果表明，在本色譜條件下，各空白溶液無干擾，專屬性良好。

3.4 檢測限及定量限

精密量取3.2項下對照品儲備液，用無水乙醇稀釋制成不同濃度梯度的溶液，按3.1項下色譜條件進行測定，分別取1.0 μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，測得檢測限0.40 ng(S/N≈3)，定量限0.99 ng(S/N≈10)。

3.5 線性試驗

精密量取對照品儲備液5 mL置50 mL量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度搖勻，作為線性試驗儲備液。精密量取線性試驗儲備液0.1、1、2、5 mL，分別置10 mL量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。按3.1項下色譜條件精密量取上述線性溶液及線性試驗儲備液各1.0 μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積，以濃度C為橫坐標，峰面積A為縱坐標做線性回歸，求得回歸方程A=2.7635C+0.03，R2=0.9999，說明環(huán)己酮在0.98～97.91 μg/mL濃度范圍內呈良好的線性關系，結果見表1，圖2。

圖1 環(huán)己酮對照品溶液圖譜

圖2環(huán)己酮線性回歸圖

Fig2Cyclohexanonestandardcurve

3.6 精密度試驗

精密量取3.2項下環(huán)己酮對照品溶液1.0 μL，按3.1項下色譜條件連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖及峰面積，計算環(huán)己酮峰面積的RSD為1.44%，表明本研究儀器精密度良好。

3.7 溶液穩(wěn)定性試驗

精密量取3.2項下環(huán)己酮對照品溶液1.0 μL，按3.1項下色譜條件分別于0、2、4、6、8、24 h進樣，記錄色譜圖及峰面積，環(huán)己酮峰面積的RSD為1.50%，表明環(huán)己酮對照品溶液室溫放置24 h，樣品穩(wěn)定。

3.8 回收率試驗[10]

精密稱取環(huán)己酮適量，配制成濃度為對照品溶液80%、100%、120%的溶液各3份，按3.1項下色譜條件分別取1.0 μL注入氣相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積，以峰面積按外標法計算，平均回收率為99.80%，RSD為0.87%，結果見表2。

表2 環(huán)己酮回收率試驗結果

3.9 樣品測定

3.9.1浸提試驗測定結果 取3.2項下環(huán)己酮浸提溶液按3.1項下色譜條件進行測定，分別取上述溶液各1.0 μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積，測定結果見表3。

表3 環(huán)己酮測定結果

3.9.2遷移試驗測定結果 取3.2項下環(huán)己酮遷移溶液按3.1項下色譜條件進行測定，分別取上述溶液各1.0 μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積，測定結果見表4。

表4 環(huán)己酮測定結果

4 討論

本研究建立了環(huán)己酮測定的氣相方法，方法簡單快速、回收率高，可以較好的用于一次性輸液器中環(huán)己酮的遷移檢測。本研究根據(jù)毒理學數(shù)據(jù)NOEL(不產生反應的量)計算限度，參考ICH Q3C中PDE(每日最大攝入量)的計算公式：

以可允許的最低值計算，得到PDE=76.75 mg/天，參考ICH3化學溶劑殘留量的限度，環(huán)己酮屬于無足夠毒性資料的溶劑，對于此類溶劑，其限度數(shù)值為：50 mg/套/天。本研究分別采用了溶劑浸提及模擬臨床滴注兩種方法獲取遷移溶液。浸提溶劑法考慮溶劑的極性影響分別選擇無水乙醇、正己烷、異丙醇；模擬臨床滴注法考慮輸液器臨床使用時多數(shù)藥物以水作為溶劑，部分藥物含有少量醇類，滴注溶劑參考臨床使用藥物溶劑，采用無水乙醇及乙醇水溶液(密度：0.9377 mg/mL)作為溶劑，滴注試驗設置為12 h。結果表明通過浸提與模擬滴注兩種方法檢測的環(huán)己酮遷移量均小于50 mg/套。說明一次性使用輸液器中環(huán)己酮遷移量在人體安全范圍之內。