王恩典，周 明

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物科技學(xué)院，安徽 合肥 230036)

我國使用中草藥由來已久，近年來愈加重視其開發(fā)利用。牛膝(twotooth achyranthes root)主要有效成分為齊墩果酸[1]、蛻皮甾酮類[2]、多糖類[3]等,其中齊墩果酸有減輕肝、腎損傷和促進(jìn)肝細(xì)胞再生等作用[4]；蛻皮甾酮可阻止細(xì)胞凋亡，促進(jìn)組織修復(fù)，加快傷口愈合[5]，還有促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖等作用[6]；牛膝多糖具有增強(qiáng)動物體免疫功能，抑制腫瘤生長與增加白細(xì)胞數(shù)量等作用[7-8],因此牛膝被用于散淤血、消腫痛，補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨。麻黃(Chinese ephedra)含有麻黃堿、黃酮類、揮發(fā)油、多糖、酚酸類等多種有效成分[9]，具有發(fā)汗、平喘、消腫等功效，常被用于治感冒、胸悶、咳喘、浮腫等癥[10-12]。女貞子(ligustrum lucidum ait)主要活性成分包括齊墩果酸、熊果酸等[13]，齊墩果酸或熊果酸與抗原一起，可增加動物脾臟空斑形成數(shù)量和特異抗體滴度，也能提高正常小鼠血清抗體IgG水平，主要用于治療慢性氣管炎、肝炎、高血脂癥、糖尿病、不孕癥等[14]。

迄今為止，尚鮮見用牛膝、麻黃作為飼料添加劑的研究報道，女貞子在種雞等動物中的應(yīng)用研究也較少。因此，本研究用牛膝、麻黃、女貞子作為主要原料，在常規(guī)飼糧中分別添加1%牛膝復(fù)方制劑(TARCP)、1%女貞子復(fù)方制劑(LLACP)、0.5%麻黃復(fù)方制劑(CECP),考察其在種雞中的應(yīng)用效果。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

牛膝復(fù)方制劑(twotooth achyranthes root compound preparation，TARCP)：由牛膝(河南焦作產(chǎn)，購于安徽亳州中藥材市場)、維生素E、維生素C、白砂糖等組成。女貞子復(fù)方制劑(ligustrum lucidum ait compound preparation，LLACP)：由女貞子、枸杞子(購于安徽亳州中藥材市場)、維生素E、維生素C、白砂糖等組成。麻黃復(fù)方制劑(Chinese ephedra compound preparation，CECP)：由麻黃(購于安徽亳州中藥材市場)、甜菜堿、維生素E、維生素C等組成。

1.2 試驗設(shè)計

將384只海藍(lán)褐種母雞(選自安徽省長豐縣水家湖養(yǎng)雞場種雞群，產(chǎn)蛋日齡相同，產(chǎn)蛋率接近)分成4組，即對照組、TARCP組、LLACP組和CECP組；每組96只，分為12個重復(fù)，每重復(fù)8只雞。預(yù)試期7 d，用生產(chǎn)常規(guī)飼糧(雞場當(dāng)前所用飼糧，具體組分見表1)飼喂4組雞，統(tǒng)計產(chǎn)蛋率；根據(jù)產(chǎn)蛋率，對4組雞的雞群進(jìn)行必要的調(diào)整，使4組雞的產(chǎn)蛋率差異不顯著。而后，進(jìn)入正式試驗期，正試期8周(56 d)。對照組雞仍喂以生產(chǎn)常規(guī)飼糧，TARCP組雞喂以常規(guī)飼糧+1% TARCP，LLACP組雞喂以常規(guī)飼糧+1% LLACP，CECP組雞喂以常規(guī)飼糧+0.5% CECP(均為質(zhì)量分?jǐn)?shù)，全文同)。按雞場現(xiàn)行方案對4組雞進(jìn)行飼養(yǎng)管理。

表1 常規(guī)飼糧中的基礎(chǔ)原料及營養(yǎng)成分Table 1 Basic diet and nutrient composition in conventional diet

注：預(yù)混料主要由礦物質(zhì)、維生素、賴氨酸等組成。

Note：Premix mainly consists of minerals,vitamins,and lysine.

1.3 觀測指標(biāo)及方法

1.3.1 雞群健康指標(biāo) 每天觀察記錄每組雞的健康狀況，如腹瀉情況、羽毛發(fā)育狀況、其他疾病等。

1.3.2 生產(chǎn)性能指標(biāo) 在正式試驗期內(nèi)，統(tǒng)計各組雞每周的產(chǎn)蛋率、產(chǎn)蛋質(zhì)量、飼糧消耗量，計算料蛋比(飼料質(zhì)量/產(chǎn)蛋質(zhì)量)和飼料轉(zhuǎn)化率(產(chǎn)蛋量/消耗飼料質(zhì)量×100%)，并測定種蛋的受精率。

1.3.3 血清生化指標(biāo) 在試驗期末，每組取8只雞，空腹心臟采血5 mL左右，制取血清，測定血糖(Glu)、血清總蛋白(TP)、尿素氮(UN)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)含量，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及總抗氧化力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量等。本試驗所采用的試劑盒均購于南京建成生化試劑公司，并按照說明書介紹的試驗方法測定上述所有血清生化指標(biāo)。

1.3.4 組織生化指標(biāo) 在試驗期末，每組取6只雞蛋(第8周產(chǎn)),測定雞蛋中SOD活性和MDA含量。每組取4只雞(在被采血的雞中選取)，采取胸肌、肝樣,測定其SOD活性和MDA含量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

應(yīng)用SPSS 22.0軟件One-Way ANOVA分析方法進(jìn)行單因子方差分析；用Duncan’s方法進(jìn)行多重比較，分析各組間數(shù)據(jù)的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 雞群健康狀況的觀測

試驗期間各組雞精神狀況良好，未見明顯的發(fā)病現(xiàn)象，但對照組雞脫毛明顯偏多。

2.2 3種復(fù)方保健劑對種雞生產(chǎn)性能的影響

3種復(fù)方保健劑對海藍(lán)褐種雞生產(chǎn)性能的影響見表2。

表2 3種復(fù)方保健劑對海藍(lán)褐種雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of three compound health care agents on production performance of Hy-line variety brown breeders

注：同行數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)；不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。

Note：Different lowercase letters indicate significant difference (P<0.05),and different capital letters indicate extremely significant difference (P<0.01).The same below．

由表2可見，TARCP、LLACP和CECP組雞產(chǎn)蛋率都較對照組高，其中LLACP組雞產(chǎn)蛋率顯著高于對照組(P<0.05)。TARCP、LLACP組雞產(chǎn)蛋量均顯著多于對照組，CECP組雞產(chǎn)蛋量極顯著多于對照組(P<0.01)。TARCP、CECP組雞對飼料的轉(zhuǎn)化率均顯著高于對照組。CECP組雞種蛋受精率極顯著高于對照組，TARCP、LLACP組雞種蛋受精率顯著高于對照組。

2.3 3種復(fù)方保健劑對種雞血清生化指標(biāo)的影響

由表3可見，4組雞血糖、血清尿素氮、甘油三酯含量和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性差異不顯著(P>0.05)。但LLACP組雞血清總蛋白含量顯著高于對照組(P<0.05)；LLACP組雞血清總膽固醇含量顯著高于其他3組(P<0.05)；TARCP組和CECP組雞血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著低于對照組和LLACP組(P<0.05)；TARCP、LLACP和CECP組雞血清超氧化物歧化酶活性均顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)高于對照組；LLACP組雞血清總抗氧化力顯著高于其他3組(P<0.05)；TARCP、LLACP和CECP組雞血清丙二醛含量極顯著低于對照組(P<0.01)。

表3 3種復(fù)方保健劑對海藍(lán)褐種雞血清生化指標(biāo)的影響Table 3 Effects of three compound health care agents on serum biochemical parameters of Hy-line variety brown breeder

2.4 3種復(fù)方保健劑對種雞組織生化指標(biāo)的影響

由表4可知，4組試驗雞肝中超氧化物歧化酶活性差異不顯著(P>0.05)；LLACP、CECP組試驗雞肝中丙二醛含量顯著低于對照組和TARCP組(P<0.05)。LLACP組雞胸肌中超氧化物歧化酶活性顯著高于TARCP、CECP組(P<0.05)，極顯著高于對照組(P<0.01)；LLACP組雞胸肌丙二醛含量極顯著低于對照組和TARCP組(P<0.01)，CECP雞胸肌丙二醛含量顯著少于對照組和TARCP組(P<0.05)。TARCP、LLACP組雞蛋中超氧化物歧化酶活性極顯著高于對照組和CECP組(P<0.01)；TARCP、LLACP、CECP組雞蛋中丙二醛含量極顯著低于對照組(P<0.01)。

表4 3種復(fù)方保健劑對海藍(lán)褐種雞組織生化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of three compound health care agents on biochemical parameters in tissues of Hy-line variety brown breeder

3 討 論

3.1 復(fù)方保健劑對雞健康和產(chǎn)蛋性能的影響

在試驗期間，4組雞的精神狀況均較好，未見明顯的發(fā)病現(xiàn)象，但對照組雞脫毛明顯偏多?？梢妼φ战M雞皮膚和被毛處于亞健康狀態(tài)。本試驗所用的3種復(fù)方制劑均含有維生素E和維生素C，這兩種維生素對皮膚發(fā)育和組織結(jié)構(gòu)的完整性均有積極作用[15]。牛膝復(fù)方制劑和女貞子復(fù)方制劑含有生物活性成分齊墩果酸，齊墩果酸對組織的損傷有修復(fù)和保護(hù)作用[16]。因此TARCP、LLACP、CECP組雞皮膚健康狀況好于對照組，脫毛明顯少于對照組。

本研究結(jié)果表明,TARCP、LLACP、CECP組雞的產(chǎn)蛋率和產(chǎn)蛋量不同程度高于對照組，其中LLACP組雞的產(chǎn)蛋率顯著高于對照組(P<0.05)，TARCP、LLACP組雞的產(chǎn)蛋量顯著高于對照組(P<0.05)，CECP組雞的產(chǎn)蛋量極顯著高于對照組(P<0.01)。這與趙麗麗等[17]應(yīng)用女貞子提高蛋雞后期的產(chǎn)蛋性能結(jié)果相一致。

TARCP、LLACP、CECP組雞的飼料轉(zhuǎn)化率均高于對照組，且TARCP、CECP組的飼料轉(zhuǎn)化率顯著高于對照組(P<0.05)。原因可能是：TARCP、LLACP、CECP中的功能性成分齊墩果酸、蛻皮甾酮、枸杞多糖、枸杞素、環(huán)肽、麻黃堿、甜菜堿、維生素E和維生素C等能增強(qiáng)蛋白質(zhì)的合成，促進(jìn)脂類物質(zhì)在脂肪組織中沉積，保護(hù)修復(fù)組織細(xì)胞，改善雞體健康狀況，因而可提高雞的產(chǎn)蛋機(jī)能和飼料轉(zhuǎn)化率[18]。

盛東峰等[19]在皖西白鵝日糧中添加0.5%或1%女貞子粉，可顯著提高鵝的日增重。朱買勛等[20]在雛雞日糧中添加女貞子+絞股藍(lán)+黃芪,或女貞子+枸杞+黃芪，可顯著加快雛雞生長，極顯著提高飼料轉(zhuǎn)化率。勞雪芬等[21]在山羊日糧中添加富硒女貞子，可提高山羊產(chǎn)奶量。這些研究結(jié)果與本試驗中LLACP提高雞生產(chǎn)性能的結(jié)果相似，但是具體試驗對象及其生產(chǎn)性能類型不同。然而也有報道稱，女貞子在動物中應(yīng)用并未取得預(yù)期效果。例如，石莉莎等[22]在雛雞日糧中添加女貞子，對其日增重和飼料轉(zhuǎn)化率無顯著影響。

梁眷衡等[23]用麻黃復(fù)方制劑“咳喘消”作為治療藥物，發(fā)現(xiàn)患傳染性喉氣管炎病雞的治愈率極顯著提高。本試驗將CECP作為保健劑，進(jìn)一步考察了該制劑對種雞產(chǎn)蛋性能及種蛋受精率的作用。另外，本課題組將麻黃復(fù)方制劑應(yīng)用于豬的試驗，也取得了較好的效果，發(fā)現(xiàn)其可使豬增重顯著加快，飼料轉(zhuǎn)化率顯著提高[24]。

3.2 復(fù)方保健劑對雞組織生化指標(biāo)的影響

本研究結(jié)果表明，LLACP組雞血清總蛋白和總膽固醇含量顯著高于對照組(P<0.05)，其原因可能是麻黃復(fù)方制劑中含有的麻黃堿具有類似腎上腺素的作用，能促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成；另一個原因可能是麻黃復(fù)方制劑中含有的甜菜堿可減少蛋氨酸的消耗量，從而維持和促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成[25]。用麻黃復(fù)方制劑處理，雞血清總膽固醇含量顯著增多。這與在豬中的試驗結(jié)果[24]不同，其原因有待于進(jìn)一步研究。

本研究結(jié)果表明，TARCP、CECP組雞血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著低于對照組，其原因是牛膝復(fù)方制劑含有齊墩果酸和蛻皮甾酮，其中齊墩果酸具有保護(hù)肝、腎和促進(jìn)肝細(xì)胞再生等作用[4]；蛻皮甾酮可防止細(xì)胞凋亡、加快組織修復(fù)、促進(jìn)組織傷口愈合[5]，還能刺激成骨細(xì)胞增殖等[6]。CECP組雞血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著低于對照組，其原因可能是麻黃復(fù)方制劑的有效成分特別是維生素C、維生素E對肝、心肌等組織細(xì)胞有保護(hù)作用。TARCP、LLACP、CECP組雞血清超氧化物歧化酶活性均顯著或極顯著高于對照組；LLACP組雞血清總抗氧化力顯著高于對照組。其原因是3種復(fù)方制劑均含有維生素E、維生素C和齊墩果酸等成分，而這些成分在雞體內(nèi)均具有抗氧化作用。正因如此，TARCP、LLACP、CECP組雞血清中的丙二醛極顯著少于對照組。

本試驗應(yīng)用LLACP可使種雞血清總蛋白含量顯著增加，谷草轉(zhuǎn)氨酶活性下降。這與朱買勛等[20]在雛雞日糧中添加女貞子+絞股藍(lán)+黃芪或女貞子+枸杞+黃芪、勞雪芬等[21]在山羊日糧中添加富硒女貞子所取得的效果基本一致。TARCP可使種雞血清總蛋白含量小幅增加，尿素氮、甘油三酯、總膽固醇、谷草轉(zhuǎn)氨酶含量和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性不同程度下降。這個結(jié)果稍遜于本課題組在犢牛中所做的試驗：牛膝復(fù)方制劑可使?fàn)倥Ｑ骞缺D(zhuǎn)氨酶活性、甘油三酯含量分別顯著和極顯著降低；犢牛血清總蛋白、IgG含量分別顯著和極顯著提高[26]。與此類似，麻黃復(fù)方制劑對育肥豬血清生化指標(biāo)如血清總蛋白、甘油三酯、總膽固醇、尿素氮含量和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性等的影響[24]強(qiáng)于該制劑對本試驗中種雞血清生化指標(biāo)的影響。其主要原因可能是不同種類試驗動物敏感性有所差異。

LLACP組雞胸肌和雞蛋中超氧化物歧化酶活性極顯著高于對照組；LLACP、CECP組雞肝中丙二醛含量顯著少于對照組；LLACP、CECP組雞胸肌丙二醛含量極顯著少于對照組；TARCP、LLACP、CECP組雞蛋丙二醛含量極顯著少于對照組。從邏輯上說，正是由于試驗組雞組織中超氧化物歧化酶活性增強(qiáng)，所以相應(yīng)組織中丙二醛含量減少。

3.3 復(fù)方保健劑對種蛋受精率的影響

婁艷等[27]研究表明，齊墩果酸可增強(qiáng)更年期鼠卵巢、腎上腺的機(jī)能，促進(jìn)體內(nèi)雌激素的合成和分泌，并對自由基引起的損傷有一定的修復(fù)作用。本研究結(jié)果表明，CECP組雞種蛋受精率極顯著高于對照組，LLACP、TARCP組雞種蛋受精率顯著高于對照組。其原因可能是3種復(fù)方制劑均含有維生素E，另外牛膝復(fù)方制劑和女貞子復(fù)方制劑還含有齊墩果酸，這些功能性成分均有助于維持和促進(jìn)生殖機(jī)能。

4 結(jié) 論

3種復(fù)方制劑能顯著提高種雞的產(chǎn)蛋機(jī)能和飼料轉(zhuǎn)化率，顯著或極顯著提高種蛋受精率，顯著或極顯著提高種雞的抗氧化能力。綜合分析種雞的產(chǎn)蛋性能、飼料利用效率、血清生化參數(shù)、組織生化指標(biāo)和種蛋受精率等指標(biāo)認(rèn)為，3種復(fù)方制劑在種雞中的應(yīng)用效果大致為：LLACP>CECP>TARCP。