羅麗花 舒嶠

【摘要】 目的：分析血清miR-141在糖尿病腎損傷患者中的表達(dá)及與遠(yuǎn)期預(yù)后的關(guān)系。方法：選取2017年1月-2019年6月于本院就診的72例糖尿病腎損傷患者作為觀察組，選取同期于本院進(jìn)行健康體檢的48例健康體檢者作為對照組，比較兩組血清miR-141表達(dá)水平在不同臨床病理參數(shù)情況下的表達(dá)水平，并分析觀察組不同腎臟損傷程度與血清miR-141表達(dá)水平的相關(guān)性，對觀察組血清miR-141表達(dá)水平與遠(yuǎn)期預(yù)后情況進(jìn)行評價。結(jié)果：觀察組收縮壓、舒張壓、血肌酐表達(dá)水平以及血清miR-141表達(dá)水平均明顯高于對照組，血紅蛋白與白蛋白表達(dá)水平均明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。糖尿病病史≥10年、尿蛋白≥3.0 g/L、血肌酐表達(dá)水平≥150 μmol/L以及血尿素氮表達(dá)水平≥7.5 mmol/L的患者血清miR-141表達(dá)水平均明顯高于未超過其標(biāo)準(zhǔn)的患者，eGFR≥60 mL/（min·1.73 m2）患者血清miR-141表達(dá)水平明顯低于未超過其標(biāo)準(zhǔn)患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。觀察組不同腎小球分級、IFTA分?jǐn)?shù)以及間質(zhì)炎癥分?jǐn)?shù)血清miR-141表達(dá)水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。腎小球分級Ⅳ級、IFTA 3分以及間質(zhì)炎癥2分高表達(dá)占比均明顯高于低表達(dá)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。觀察組27例患者在隨訪期間出現(xiàn)終末期腎病，其中血清miR-141低表達(dá)水平中占6例，血清miR-141高表達(dá)水平中占21例，血清miR-141高表達(dá)水平隨訪期間出現(xiàn)終末期腎病的風(fēng)險比低表達(dá)高3.5倍。結(jié)論：糖尿病腎損傷患者血清miR-141表達(dá)水平明顯高于正常人，且其表達(dá)水平與糖尿病腎損傷患者的腎損傷水平以及預(yù)后具有相關(guān)性;血清miR-141表達(dá)水平越高，糖尿病腎損傷患者腎損傷程度越嚴(yán)重，其預(yù)后程度越差，在臨床上具有一定預(yù)后價值。

【關(guān)鍵詞】 血清miR-141 糖尿病腎損傷 表達(dá) 遠(yuǎn)期預(yù)后

[Abstract] Objective： To analyze the correlation between serum miR-141 expression and long-term prognosis in patients with diabetic renal injury. Method： From January 2017 to June 2019， 72 patients with diabetic renal injury treated in our hospital were selected as the observation group， and 48 healthy subjects who came in the hospital for physical examination at the same time were selected as the control group. The expression levels of serum miR-141 under different clinical pathological parameters were compared between two groups. The correlation between the degree of renal injury and the expression level of serum miR-141 in the observation group was analyzed. The serum miR-141 expression level and long-term prognosis in the observation group were evaluated. Result： The systolic blood pressure， diastolic blood pressure， serum creatinine expression and serum miR-141 expression in the observation group were significantly higher than those in the control group （P<0.05）. The hemoglobin expression level and albumin expression level in the observation group were significantly lower than those in the control group （P<0.05）. The expression level of serum miR-141 in patients with a history of diabetes ≥10 years， proteinuria ≥3.0 g/L， serum creatinine expression levels ≥150 μmol/L， and blood urea nitrogen expression levels above?7.5 mmol/L were significantly higher than those in patients without exceeding the standard （P<0.05）. The expression level of serum miR-141 in patients with eGFR ≥60 mL/（min·1.73 m2） was significantly lower than that in patients who did not exceed the standard （P<0.05）. There were significant differences in serum miR-141 expression levels between the different glomerular grades， IFTA scores， and interstitial inflammation scores （P<0.05）. The glomerular grade Ⅳ， IFTA 3 points and interstitial inflammation 2 points in high expression were significantly higher than those in low expression （P<0.05）. There were 27 patients in the observation group who had end-stage renal disease during the follow-up period， included 6 cases of low expression of serum miR-141 and 21 cases of high expression of serum miR-141， and the risk of end-stage renal disease of high expression of serum miR-141 during follow-up was 3.5 times higher than that of low expression. Conclusion： The expression level of serum miR-141 in patients with diabetic renal injury is significantly higher than that in normal subjects， and its expression level is correlated with the level of renal injury and prognosis in patients with diabetic renal injury. The higher the expression level of serum miR-141， the more serious the degree of renal injury in patients with diabetic kidney injury， and the worse the prognosis， which has some clinical prognostic value.

[Key words] serum miR-141 Diabetic renal injury Expression Long-term prognosis

First-authors address： Ganzhou Peoples Hospital， Ganzhou 341000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.36.003

糖尿病腎損傷是以持續(xù)性蛋白尿、進(jìn)展性腎小球過濾率降低以及血壓出現(xiàn)升高為臨床特征的糖尿病并發(fā)癥，也是造成終末期腎病的主要病因之一[1-2]。糖尿病造成的腎臟損傷會累及生物機(jī)體腎臟的所有結(jié)構(gòu)，作為糖尿病導(dǎo)致的全身微血管并發(fā)癥之一，糖尿病腎損傷在臨床癥狀以及病情發(fā)展等方面均區(qū)別于其他原因所造成的腎臟損害[3-5]。既往研究表明，血清microRNA在糖尿病腎損傷病情的發(fā)生與發(fā)展中具有至關(guān)重要的作用，血清microRNA能夠參與到腎損傷炎癥反應(yīng)、其生物機(jī)體腎間質(zhì)纖維化以及腎小球損傷的過程中，已經(jīng)逐漸成為現(xiàn)代臨床醫(yī)務(wù)人員與?？茖W(xué)者的關(guān)注重點之一[6-9]。既往研究中，多研究血清miR-133b、miR-21、miR-29等因子，關(guān)于血清miR-141的研究較少[10]。故本次研究選取本院就診的72例糖尿病腎損傷患者與同期于本院進(jìn)行健康體檢的48例健康體檢者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，目的在于分析血清miR-141在糖尿病腎損傷患者中的表達(dá)及遠(yuǎn)期預(yù)后的相關(guān)性?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月-2019年6月于本院就診的72例糖尿病腎損傷患者作為觀察組。觀察組納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）診斷符合《2型糖尿病的診治進(jìn)展》中對2型糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[11];（2）經(jīng)腎活檢確診為糖尿病腎損傷;（3）年齡32～80歲。觀察組排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并其他嚴(yán)重腎臟疾病;（2）合并血尿;（3）短期內(nèi)出現(xiàn)大量蛋白尿。選取同期于本院進(jìn)行健康體檢的48例健康體檢者作為對照組，均無心、腦、肝以及腎等病變，且無代謝性疾病。所有入組研究人員或研究人員家屬均需知情并簽署知情同意書，本次研究內(nèi)容經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)會批準(zhǔn)執(zhí)行。

1.2 方法 采集入組兩組入院第1天空腹靜脈血5 mL放置于未添加抗凝劑的離心管中，于室溫靜置0.5 h，于4 ℃環(huán)境下3 000 r/min離心15 min后取上清放置于離心管中，離心管放置于-80 ℃冰箱內(nèi)保存。選取美國ABI實時定量PCR儀器進(jìn)行擴(kuò)增并對血清標(biāo)本中的miR-141表達(dá)水平進(jìn)行定量分析，采用專業(yè)試劑對總RNA進(jìn)行提取，并采用紫外分光光度計測定其在不同數(shù)值下的吸光值，并將其樣本用于后續(xù)操作。反應(yīng)條件為95 ℃預(yù)變性10 min，95 ℃變性15 s，60 ℃ 1 min，共進(jìn)行45個循環(huán)，實驗重復(fù)3次。

1.3 觀察指標(biāo) 收集兩組臨床資料，包括年齡、性別、糖尿病病程、身體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）、空腹血糖、糖化血紅蛋白、血肌酐、血尿素氮、24 h尿蛋白定量、估算腎小球濾過率（estimated glomerular filtration rate，eGFR）、血清鈣以及血清miR-141等指標(biāo)的表達(dá)水平。觀察組并根據(jù)《急性腎損害分類和診斷標(biāo)準(zhǔn)更新》中的腎小球分級、間質(zhì)性纖維化和小管萎縮（IFTA）評分及間質(zhì)炎癥對腎臟損傷情況進(jìn)行評估，評分或級別越高說明腎臟病理損傷情況越嚴(yán)重[12]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 20.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，多組間比較采用方差分析，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，組內(nèi)比較采用配對t檢驗;計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床資料比較 兩組性別、年齡比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;觀察組收縮壓、舒張壓、血肌酐及血清miR-141表達(dá)水平均明顯高于對照組，血紅蛋白與白蛋白表達(dá)水平均明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 觀察組不同指標(biāo)水平患者血清miR-141表達(dá)水平比較 觀察組尿蛋白水平（2.98±0.95）g/L。觀察組不同年齡階段、性別、BMI、血清鈣表達(dá)水平、糖化血紅蛋白表達(dá)水平患者miR-141表達(dá)水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;糖尿病病史≥10年、尿蛋白≥3.0 g/L、血肌酐表達(dá)水平≥150 μmol/L以及血尿素氮表達(dá)水平≥7.5 mmol/L的患者血清miR-141表達(dá)水平明顯高于未超過其標(biāo)準(zhǔn)的患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;eGFR≥60 mL/（min·1.73 m2）的患者血清miR-141表達(dá)水平明顯低于未超過其標(biāo)準(zhǔn)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3 觀察組患者不同腎臟損傷程度的血清miR-141表達(dá)水平比較 觀察組患者不同腎小球分級、IFTA分?jǐn)?shù)及間質(zhì)炎癥分?jǐn)?shù)血清miR-141表達(dá)水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表3。

2.4 觀察組血清miR-141表達(dá)水平與腎臟損傷程度的關(guān)系 血清miR-141表達(dá)水平<5.81為低表達(dá)，≥5.81為高表達(dá);腎小球分級Ⅳ級高表達(dá)占比明顯高于低表達(dá)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;IFTA?3分高表達(dá)占比明顯高于低表達(dá)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;間質(zhì)炎癥2分高表達(dá)占比明顯高于低表達(dá)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表4。

2.5 觀察組血清miR-141表達(dá)水平與遠(yuǎn)期預(yù)后的關(guān)系分析 觀察組27例在隨訪期間出現(xiàn)終末期腎病，其中血清miR-141低表達(dá)水平中占6例，血清miR-141高表達(dá)水平中占21例，血清miR-141高表達(dá)水平隨訪期間出現(xiàn)終末期腎病的風(fēng)險比低表達(dá)高3.5倍。

3 討論

糖尿病腎損傷是臨床上糖尿病患者最常見且最嚴(yán)重的慢性并發(fā)癥，既往研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病腎損傷在老年人中的發(fā)病率在逐年升高，逐漸成為危害老年人的重大疾病之一[13-14]?，F(xiàn)臨床上對糖尿病腎損傷的診斷以及預(yù)后仍然是?？漆t(yī)務(wù)人員與學(xué)者研究的重點問題之一[15]。糖尿病腎病作為糖尿病全身微血管并發(fā)癥之一，但目前缺乏有效診斷糖尿病腎病的治療手段，臨床上主要依賴藥物進(jìn)行延緩病情的發(fā)展或者通過血液凈化以及腎移植等腎臟代替治療維持患者生命，故探索疾病的早期標(biāo)志物以及有效治療手段對改善糖尿病損傷患者的預(yù)后具有至關(guān)重要的作用[16-18]。其血清miRNA作為一種內(nèi)源性的非編碼微小RNA，主要廣泛存在于生物機(jī)體內(nèi)真核細(xì)胞中，長度約22個核苷酸，通過轉(zhuǎn)錄后參與到不同生物學(xué)過程中[19-20]。既往研究表明，血清miR-141在局灶節(jié)段性腎小球硬化中表達(dá)與微小病變性腎病相比較存在不同程度的增加，且高度提示血清miR-141的表達(dá)水平與糖尿病患者腎功能狀態(tài)以及腎小球損傷程度具有密切關(guān)系。

血清miR-141屬于miR-200家族，既往研究表明血清miR-141參與了糖尿病腎損傷腎間質(zhì)纖維化的過程中，且在腎組織內(nèi)的水平會出現(xiàn)升高，與本次研究中兩組血清miR-141表達(dá)水平比較的結(jié)果一致。同時其觀察組血清miR-141明顯高于對照組（P<0.05），認(rèn)為血清miR-141在糖尿病不斷發(fā)展至糖尿病腎損傷的過程中發(fā)揮了重要的作用。且提示血清miR-141的表達(dá)水平在不同腎臟疾病中均存在一定異質(zhì)性。本次研究比較兩組收縮壓、舒張壓、血肌酐、血紅蛋白及白蛋白表達(dá)水平均存在一定差異（P<0.05），說明收縮壓、舒張壓、血肌酐、血紅蛋白及白蛋白表達(dá)水平在糖尿病不斷發(fā)展至糖尿病腎損傷的過程中發(fā)揮一定作用，臨床醫(yī)務(wù)人員可密切觀察入院患者的相關(guān)指標(biāo)。糖尿病病史≥10年、尿蛋白≥3.0 g/L、血肌酐表達(dá)水平≥150 μmol/L以及血尿素氮表達(dá)水平≥7.5 mmol/L的患者血清miR-141表達(dá)水平明顯高于未超過其標(biāo)準(zhǔn)的患者（P<0.05），eGFR≥60 mL/（min·1.73 m2）的患者血清miR-141表達(dá)水平明顯低于未超過其標(biāo)準(zhǔn)的患者（P<0.05），說明血清miR-141表達(dá)水平在一定程度上能夠反應(yīng)糖尿病腎損傷患者病情的嚴(yán)重程度，且能夠體現(xiàn)出血清miR-141的表達(dá)水平在反應(yīng)患者腎功能上存在一定價值，能夠作為臨床反應(yīng)糖尿病腎損傷患者的腎功能的潛在指標(biāo)，考慮腎小球細(xì)胞自身可合成并釋放一定量的miRNA，當(dāng)患者機(jī)體內(nèi)腎小球受到一定損傷時，會將miRNA釋放至患者機(jī)體內(nèi)的血液中，進(jìn)而出現(xiàn)外周血外周血紅腫miRNA的表達(dá)水平升高。糖尿病腎損傷的主要治療目的是改善腎臟損傷與提高預(yù)后效果，本次研究采取腎小球分級、IFTA評分以及間質(zhì)炎癥評分3個指標(biāo)對腎臟損傷程度進(jìn)行評價，比較觀察組患者不同腎小球分級、IFTA不同分?jǐn)?shù)以及間質(zhì)炎癥不同分?jǐn)?shù)血清miR-141表達(dá)水平，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;且腎小球分級Ⅳ級、IFTA 3分以及間質(zhì)炎癥2分高表達(dá)占比明顯高于低表達(dá)（P<0.05），說明血清miR-141表達(dá)水平越高糖尿病腎損傷患者的損傷程度越嚴(yán)重。觀察組27例在隨訪期間出現(xiàn)終末期腎病，其中血清miR-141低表達(dá)水平中占6例，血清miR-141高表達(dá)水平中占21例，血清miR-141高表達(dá)水平隨訪期間出現(xiàn)終末期腎病的風(fēng)險比低表達(dá)高3.5倍，證實血清miR-141表達(dá)水平與患者的預(yù)后具有一定相關(guān)性。

綜上所述，糖尿病腎損傷患者血清miR-141表達(dá)水平明顯高于正常人，且其表達(dá)水平與腎損傷水平以及預(yù)后具有相關(guān)性;血清miR-141表達(dá)水平越高，腎損傷程度越嚴(yán)重，其預(yù)后越差，在臨床上具有一定預(yù)后價值。但本次研究具有樣本量較小且為單中心取樣等局限性，進(jìn)一步研究可加大樣本量并選取多中心樣本進(jìn)行研究。

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（收稿日期：2019-11-19） （本文編輯：程旭然）