曹亮亮

（南京市中醫(yī)院，江蘇 南京 210022）

天王補心丸由地黃、炒酸棗仁、麥冬、五味子、玄參、丹參、遠志等十多味藥材組方而成，可滋陰養(yǎng)血、補心安神，主用于心陰不足、心悸健忘、失眠多夢、大便干燥等。該方劑最早可追溯自宋代陳自明《婦人大全良方》卷六，后經明代薛已校注。明代洪九《攝生總要》中亦有記載“治心血不足，神志不寧，津液枯竭，健忘怔忡，大便不利，口舌生瘡等證?！爆F(xiàn)代醫(yī)學報道表明［1-3］，天王補心丸臨床可治療失眠、焦慮、抑郁、神經衰弱、甲狀腺功能亢進引起的眩暈等。2015 年版《中國藥典》一部成藥制劑中對其進行了收載，近年來亦有文獻采用高效液相聯(lián)合蒸發(fā)光散射檢測器、原子熒光光譜、電感耦合等離子體質譜、數字化指紋圖譜、毛細管電泳指紋圖譜等技術，對該方中藥味的成分進行了定性、定量檢測。本文查閱藥典及近年相關文獻，對天王補心丸鑒別、檢查、含有量測定、指紋圖譜方面的研究進展進行整理和綜述，以期為提高和完善天王補心丸的質量標準提供一定的參考和依據。

1 鑒別

2015 年版《中國藥典》一部［4］中，天王補心丸項下以原兒茶酸、石菖蒲和甘草的對照藥材為對照，對處方中的五味子、石菖蒲和甘草3 味藥進行薄層鑒別，并收載了方中11 個藥味的顯微特征；天王補心丸（濃縮丸）項下以當歸、桔梗的對照藥材為對照，對方中此2 味藥進行薄層鑒別，并收載了茯苓、黨參、麥冬、朱砂的顯微特征。

王慧［5］分別以棘苷、酸棗仁及遠志為對照，點樣于硅膠GF254薄層板，以乙酸乙酯-甲醇-水-冰醋酸（4∶1∶1∶0.5）為展開劑，分別噴以1% 三氧化鋁-乙醇溶液、5% 茴香醛-硫酸溶液，105 ℃加熱顯色，建立了天王補心丸中酸棗仁、遠志的定性鑒別方法；以麥冬、地黃、丹參為對照，GF254薄層板，甲苯-乙酸乙酯（9∶1）為展開劑，可見光檢視用以鑒別地黃、丹參，噴以10% 硫酸-乙醇溶液，105 ℃加熱顯色，以鑒別麥冬［5］；以天冬、黨參為對照，GF254薄層板，乙酸乙酯-甲醇-水（4∶1∶1）為展開劑，10%硫酸-乙醇溶液為顯色劑，105 ℃加熱顯色，以鑒別天冬、黨參［5］；以茯苓為對照，GF254薄層板，乙酸乙酯-甲醇-水（20∶1∶0.5）為展開劑，噴以10% 硫酸-乙醇溶液，105 ℃加熱顯色，以鑒別茯苓［5］；以柏子仁為對照，GF254薄層板，正己烷-乙酸乙酯（5∶1）展開，365 nm 紫外下檢視，以鑒別柏子仁［5］。李冰等［6］采用硅膠G 板，以麥冬對照藥材為對照，三氯甲烷-丙酮（4∶1）為展開劑，10%硫酸-乙醇顯色劑105 ℃加熱顯色，建立了麥冬的定性鑒別方法。

2 檢查

2015 年版《中國藥典》一部中天王補心丸檢查項注明：應符合丸劑項下有關的各項規(guī)定（通則0108），均為劑型常規(guī)檢查，無限量檢查項目。鄭新元等［7］模擬人體胃腸道環(huán)境，用人工胃液提取天王補心丸中可溶性鉛、砷、汞，采用電感耦合等離子體質譜法（ICP-MS）對其進行測定分析，建立了可溶性鉛、砷等有害元素的測定評價方法。

3 含有量測定

2015 年版《中國藥典》一部中天王補心丸含有量測定項下規(guī)定，本品含五味子以五味子醇甲（C24H32O7）計，水蜜丸每1 g 不得少于0.19 mg，小蜜丸每l g 不得少于0.13 mg，大蜜丸每丸不得少于1.22 mg；天王補心丸（濃縮丸）項下規(guī)定，本品每l g 含丹參以丹酚酸B（C36H30O16）計，不得少于1.0 mg。

3.1 酸棗仁 天王補心丸方中酸棗仁具養(yǎng)心安神之功效，其中的酸棗仁皂苷A、棘苷成分的鎮(zhèn)靜、催眠作用已有諸多報道。何新榮等［8］采用高效液相色譜法聯(lián)合蒸發(fā)光散射檢測器（HPLC-ELSD）對天王補心丸中酸棗仁皂苷A 含有量進行測定，測得3 批天王補心丸中酸棗仁皂苷A 含有量分別為0.274 2、0.271 8、0.275 0 mg／g，酸棗仁皂苷A 的線性范圍為22.5～360 μg／mL（R2=0.999 6），平均回收率99.24%（RSD=1.37%），與此同時還對樣品中酸棗仁皂苷B 進行了檢測，但可能由于其含有量較低［9-10］且蒸發(fā)光散射檢測靈敏度限制而未能測出。謝媛媛等［11］建立了高效液相技術測定天王補心丸中棘苷含有量的方法，測得自制模型制劑及4 個批號市售樣品中棘苷的含有量分別為0.115、0.052、0.051、0.049、0.038 mg／g，棘 苷 線 性 范 圍 為0.002 5～0.075 0 g／L（r=1.000 0），平均回收率100.5%（RSD=1.6%）。

3.2 丹參 楊芳等［12］運用反相高效液相色譜法測定了3個批次樣品中丹參素的含有量，分別為0.031 4、0.040 9、0.047 7 mg／g，在0.15～1.5 μg 范圍內呈良好的線性關系（r=0.999 6），平均回收率99.1%（RSD=1.8%）。孫雪［13］建立了測定天王補心丸中丹參素鈉含有量的高效液相方法，丹參素鈉在12.8～128.0 μg／mL 范圍內呈良好的線性關系（r=0.999 1），平均回收率94.6%（RSD=1.9%）。張化然［14］測定了7 批樣品中丹酚酸B 的含有量，其范圍為3.24～3.38 mg／8 丸。孫裕等［15］測定了10 批天王補心丸（濃縮丸）中丹酚酸B 含有量，其范圍為0.421 8～2.042 0 mg／g。張玲等［16］運用薄層掃描技術測定了天王補心丸中原兒茶醛的含有量，方法簡便快速，靈敏度高，重復性好。

3.3 五味子 秦明秀等［17］測定了3 個批次天王補心丸中五味子甲素的含有量，分別為0.11、0.09、0.08 mg／g，在0.101 3～1.013 0 μg 范圍內呈良好的線性關系（r=0.999 9），平均回收率101.2%（RSD=1.5%）。孫小玲等［18］建立了快速高分辨液相色譜（RRLC）同時測定天王補心丸中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素6 種主要木脂素成分的方法，在測定范圍內均呈良好的線性關系（r＞0.999 0），平均回收率分別為 100.1%、99.3%、97.8%、99.1%、98.8%、97.5%，RSD 分別為1.1%、1.8%、2.3%、2.5%、1.6%、2.1%，該方法能獲得比普通色譜柱更高的柱效，縮短分析時間，且比超高效液相操作簡單、易行。熊建國等［19］測定了4 批天王補心丸中五味子醇甲的含有量，分別為0.377 8、0.380 7、0.380 4、0.377 0 mg／g。

3.4 地黃 楊仕林等［20］采用反相高效液相色譜技術建立了天王補心丸中梓醇含有量的測定方法，在2.004～20.046 μg／mL范圍內呈良好的線性關系（r=0.999 3），平均加樣回收率99.9%（RSD=2.2%，n=9），3 批樣品中每丸平均含有量分別為1.1、0.98、0.98 mg。

3.5 遠志 董曉兵等［21］建立了高效液相技術測定天王補心丸中細葉遠志皂苷含有量的方法，其線性范圍為10～500 μg／mL，平均回收率97.5%（RSD 均小于3.0%），最低檢出質量濃度為5.50 μg／mL，靈敏度較高。同時也運用蒸發(fā)光散射檢測器進行了考察，結果發(fā)現(xiàn)該方法靈敏度低，不如紫外檢測器。

3.6 當歸 劉旺培等［22］建立了高效液相法測定天王補心丸中阿魏酸含有量的方法，在0.091 2～2.280 0 μg／mL 范圍內呈良好的線性關系（r=0.999 8），精密度、穩(wěn)定性、重復性試驗的RSD＜3.0%，平均加樣回收率98.96%，RSD 0.26%，可作為天王補心丸中阿魏酸的質量控制方法。

3.7 其他 朱砂是天王補心丸重要藥味，對心悸易驚、失眠多夢、小兒驚風等證療效甚好，但其主要成分為硫化汞（HgS），若劑量超標會對神經、腎臟及生殖系統(tǒng)產生不良反應。羅沉等［23］建立氫化發(fā)生-原子熒光光譜技術測定天王補心丹中汞含有量，檢出限為0.038 7 μg／L（RSD 均小于1.5%），加樣回收率106.0%～113.7%，方法簡便快捷，重復性好。鄭興［24］利用電感耦合等離子體質譜法測定了3個不同廠家天王補心丸中22 種微量元素的含有量，發(fā)現(xiàn)不同廠家樣品中元素種類總體相似，可為探討其與藥效的相關性提供依據。

4 指紋圖譜

中藥數字化指紋圖譜是借助合理的數學建模規(guī)范處理中藥色譜指紋圖譜，將中藥中許多復雜的化學和生物活性特征的綜合信息轉變?yōu)榱炕臄底?，建立一系列參數和相應的一整套比較規(guī)則和計算公式，從而進行中藥的質控、質檢的一種技術［25-27］。王熒熒等［28］以12 批市售天王補心丸制劑為研究對象，采用高效液相數字化指紋圖譜技術對其進行分析，圖譜數據導入“中藥色譜指紋圖譜超信息特征數字化評價系統(tǒng)3.0”軟件進行評價，并采用系統(tǒng)指紋定量法鑒定12 批樣品的化學成分數量、分布比例和化學成分整體含有量差異，結果發(fā)現(xiàn)，用宏定性相似度Sm 和宏定量相似度Pm 評價出12 批市售制劑的藥效物質工藝收率總體偏低，可為其處方改進提供參考。

王熒熒等［29-30］率先采用正方形優(yōu)化法選擇背景電解質，利用色譜指紋圖譜指數（F）優(yōu)化試驗條件，對12 批天王補心丸進行聚類分析，確定用其中11 批生成對照毛細管電泳指紋圖譜，以此圖譜為標準，采用系統(tǒng)指紋定量法評價樣品質量；以阿魏酸為參照峰，確定了14 個共有峰，建立了天王補心丸毛細管電泳指紋圖譜，可為其質量控制提供了新思路。

劉萍等［31］運用二極管陣列檢測器（PDA）與蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）串聯(lián)-高效液相技術建立天王補心丸的指紋圖譜，將全方組與缺桔梗組、桔梗組與單獨桔梗組、單獨酸棗仁組指紋圖譜進行比較，同時比較各組樣品提取率，發(fā)現(xiàn)全方組提取率明顯高于缺桔梗組，桔梗+酸棗仁組提取率明顯高于桔梗組、酸棗仁組；HPLC-PDA、HPLCELSD 指紋圖譜中各組分分離度較好，具有理想的相關性和互補性。以上從化學成分角度闡述了桔梗在方中的舟揖作用，證實了天王補心丸中配伍桔梗能增加其他藥味活性成分的溶出，起到了助溶作用。

5 總結與展望

近年來文獻在《中國藥典》質量標準的基礎上，對天王補心丸從薄層鑒別、檢查、含有量測定等角度都有一定程度上更加全面的補充研究與探索。鑒別方面增加了方中其他藥味（如酸棗仁、地黃、麥冬等），檢查方面關注了重金屬、砷鹽等，含有量測定方面針對藥典之外的功效明確成分（如酸棗仁皂苷A、棘苷、梓醇、6 種木脂素等）建立了簡便快捷、重復性好的測定方法。同時，運用數字化指紋圖譜、毛細管電泳指紋圖譜等技術建立了天王補心丸較為全面的質量控制和評價方法。

然而，目前關于天王補心丸藥效物質基礎的研究較為缺乏，對其化學成分和藥理作用的探索仍處于起步階段，導致其質量標準的制訂缺乏更堅實的理論基礎與臨床依據。當前隨著代謝組學、基因組學、腸道菌群等新技術的發(fā)展，可有助于探索天王補心丸藥效代謝途徑，為深入的功效物質基礎研究提供思路，便于更好地完善其質量控制方法，從而為臨床安全有效的應用提供科學依據。