李天芝，于新友

(山東綠都生物科技有限公司，山東 濱州 256600)

豬塞內(nèi)卡病毒病是由A型塞內(nèi)卡病毒引起的豬的一種高度接觸傳染性疾病。各品種和日齡豬均可感染，成年豬感染后受到的危害較輕，母豬僅表現(xiàn)為口、蹄部位出現(xiàn)水皰，育肥豬生產(chǎn)停滯，飼料轉(zhuǎn)化率降低，仔豬感染后可表現(xiàn)為腹瀉及神經(jīng)癥狀，死亡率高。2002年，美國(guó)遺傳治療公司科研人員從人胚胎視網(wǎng)膜細(xì)胞系（PER.C6）中首次分離到SVA，研究證明該病毒對(duì)人和動(dòng)物無(wú)致病性[1]。2014年，巴西科研工作者首次報(bào)道了SVA可導(dǎo)致豬發(fā)病，隨后美國(guó)、澳大利亞、意大利、巴西、哥倫比亞、泰國(guó)等均有相關(guān)報(bào)道。2015年，我國(guó)廣東地區(qū)豬場(chǎng)發(fā)生豬塞內(nèi)卡病毒病，臨床表現(xiàn)為母豬發(fā)燒不食、口鼻及蹄部出現(xiàn)水皰，伴有產(chǎn)房仔豬急性死亡，隨后湖南、河南、福建、黑龍江等地均有相關(guān)報(bào)道。

1 病原學(xué)

SVA屬于小RNA病毒科、塞內(nèi)卡病毒屬[2]。病毒粒子呈二十面體結(jié)構(gòu)，無(wú)囊膜，直徑約為25～30 nm。SVA只有一種血清型，不同的毒株致病性不同[3]。SVA基因組為線性單股正鏈RNA，全長(zhǎng)約7.3 kb，包括5′端非編碼區(qū)(5′-Untranslated region，5′-UTR)、3′端 非 編 碼 區(qū)(3′-Untranslated region，3′-UTR)和中間的1個(gè)開(kāi)放閱讀框（ORF）。其中5′-UTR長(zhǎng)度約670 bp，由7個(gè)簡(jiǎn)單結(jié)構(gòu)和2個(gè)復(fù)雜的莖環(huán)結(jié)構(gòu)組成，無(wú)帽子結(jié)構(gòu)，存在一種VPg病毒多肽，通過(guò)共價(jià)鍵與末端核苷酸相連接。3′-UTR長(zhǎng)度約71 bp，由2個(gè)莖環(huán)結(jié)構(gòu)形成吻合環(huán)，其后連接有多聚腺苷酸poly(A)尾巴。ORF編碼2 180個(gè)氨基酸的多聚蛋白，多聚蛋白由病毒編碼的蛋白酶加工成成熟蛋白，多聚蛋白具有標(biāo)準(zhǔn)的L-4-3-4 布局，即先導(dǎo)蛋白（L）、P1（裂解 VP1、VP2、VP3和VP4四種結(jié)構(gòu)蛋白）、P2（裂解成2A、2B和2C三種非結(jié)構(gòu)蛋白）、P3（裂解成3A、3B、3C和3D四種非結(jié)構(gòu)蛋白）。其中VP1和VP3是主要的抗原表位區(qū)域，VP1蛋白免疫原性較強(qiáng)，可刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體。VP2和VP4蛋白的某些區(qū)域參與病毒核酸的包裝。對(duì)SVA殺滅效果較好的消毒劑主要有過(guò)氧乙酸、氫氧化鈉溶液、次氯酸鈉和2%的甲醛溶液，可選取這些消毒劑進(jìn)行消毒。SVA可在人胚胎視網(wǎng)膜細(xì)胞(PER.C6)、豬睪丸細(xì)胞(ST)、豬腎細(xì)胞（PK-15）、人肺癌細(xì)胞（NCI-H1299）、幼倉(cāng)鼠腎細(xì)胞（BHK-21）等多種細(xì)胞上增殖培養(yǎng)，產(chǎn)生明顯的細(xì)胞病變。

2 流行病學(xué)

SVA主要感染豬，也可以感染牛、鼠等其他動(dòng)物。早期分離的病毒株對(duì)豬無(wú)明顯致病作用，目前已經(jīng)證明SVA對(duì)豬有致病作用，致病性強(qiáng)弱與毒株有關(guān)。病豬和帶毒豬是主要傳染源，尤其是處于病毒血癥期的感染豬。SVA潛伏期為4～5 d，各品種和日齡豬均可感染，在首次感染的豬場(chǎng)，病情相對(duì)較嚴(yán)重，母豬發(fā)病率高達(dá)90%，死亡率一般較低，約為0.2%，臨床主要表現(xiàn)為鼻部及蹄冠部出現(xiàn)水皰及糜爛，病情持續(xù)約2周。4日齡內(nèi)仔豬發(fā)病率高達(dá)70%[4]，死亡率約15%～30%，斷奶仔豬發(fā)病率在0.5%～5%，育肥豬發(fā)病率約5%～30%。該病一年四季均可發(fā)生，春、秋季節(jié)多發(fā)[5]。該病僅能水平傳播，目前尚無(wú)垂直傳播的證據(jù)。病毒通過(guò)病豬唾液、糞便、尿液等分泌物和排泄物排出體外，污染飼料、飲水、圈舍及牧場(chǎng)等，從而感染其他健康豬只。豬場(chǎng)內(nèi)蒼蠅和鼠類在該病的傳播過(guò)程中起著非常重要的作用。目前該病大多為散發(fā)，未造成大規(guī)模流行。

3 臨床癥狀與病理變化

早期的SVA分離株對(duì)豬無(wú)明顯的致病性，感染豬不出現(xiàn)臨床癥狀。近年來(lái)，越來(lái)越多的SVA分離株可以導(dǎo)致豬發(fā)病，潛伏期一般為4～5 d，母豬和仔豬發(fā)病率較高，仔豬受到的危害較嚴(yán)重。母豬感染后表現(xiàn)為精神不振，采食量減少，體溫升高到40.3～40.8℃，嗜睡，站立困難，跛行，病豬鼻鏡、鼻孔、口腔黏膜和蹄部冠狀帶皮膚出現(xiàn)潮紅，后發(fā)白，并逐漸形成的水皰，與口蹄疫的水皰相比，水皰皮厚，水皰液渾濁。乳房不會(huì)出現(xiàn)水泡，蹄部病變主要在蹄墊、懸蹄，且病變部位看起來(lái)陳舊，很少出血，蹄殼出血5～6 d后水皰破裂糜爛，形成結(jié)痂，一般病豬多在感染后2周內(nèi)康復(fù)，大多愈后良好，病豬很少死亡。病理變化主要表現(xiàn)為豬心臟出血、充血，肺氣腫，肝臟出現(xiàn)局灶性壞死，腎臟出現(xiàn)局灶性淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞浸潤(rùn)，小腸黏膜壞死、脫落。育肥豬癥狀及病變與母豬類似，死亡率極低，臨床多見(jiàn)跛行癥狀。新生仔豬感染SVA后的癥狀與大豬不同，臨床上一般很少見(jiàn)鼻吻部及蹄部出現(xiàn)水皰，主要表現(xiàn)為腹瀉、神經(jīng)癥狀及高死亡率等，尤其是4日齡內(nèi)仔豬死亡率可高達(dá)70%。病變化主要表現(xiàn)為豬胃內(nèi)殘留大量乳汁，腸內(nèi)充滿黏稠狀液體，腸黏膜無(wú)明顯可見(jiàn)病變。

4 診斷

根據(jù)流行情況、臨床癥狀及病理變化可作出初步判斷，同時(shí)注意要同一些類似癥狀的疾病作出鑒別診斷，如口蹄疫、豬傳染性水皰病、豬水皰性皮疹、豬水皰性口炎等，但一般情況下很難鑒別。但豬傳染性水皰病、豬水皰性皮疹、豬水皰性口炎在我國(guó)豬場(chǎng)很少發(fā)病，當(dāng)豬場(chǎng)已使用商品化口蹄疫疫苗后，疫苗尚在保護(hù)期內(nèi)，豬出現(xiàn)水皰病變的，可懷疑本病。與豬口蹄疫相比該病僅發(fā)生于豬場(chǎng)的某一階段，臨床癥狀相對(duì)較溫和，流行時(shí)間短，主要危害免疫力弱的豬群，口蹄部水皰創(chuàng)面陳舊，無(wú)出血，成年豬發(fā)病后一星期內(nèi)基本愈合，不會(huì)死亡。如要進(jìn)行確診，最好采用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法進(jìn)行確診。

常用的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法有病原分離鑒定、血清學(xué)診斷和分子生物學(xué)檢測(cè)，病原分離時(shí)采取病豬扁桃體、淋巴結(jié)、水泡皮等病料，按1:4加入滅菌PBS，研磨后，離心，取上清液，0.22μm濾器過(guò)濾除菌后，接種豬睪丸細(xì)胞、豬腎細(xì)胞等單層細(xì)胞，觀察細(xì)胞病變。常用血清學(xué)檢測(cè)方法有免疫組化、血清中和試驗(yàn)、ELISA。SVA感染約5 d后豬體內(nèi)產(chǎn)生抗體。免疫組化一般選用SVA特異的單克隆抗體對(duì)患病動(dòng)物的組織切片進(jìn)行染色，藉此觀察SVA的組織嗜性及其在組織中的分布情況。血清中和試驗(yàn)要求較高，基層實(shí)驗(yàn)室很難應(yīng)用推廣，瓊擴(kuò)法適合基層應(yīng)用，但檢測(cè)敏感性太低，ELISA適合大量臨床樣品的檢測(cè)，適合基層應(yīng)用。分子生物學(xué)檢測(cè)方法在診斷該病上有明顯的優(yōu)勢(shì)，常用的方法有PCR方法和熒光PCR檢測(cè)方法，尤其是熒光PCR檢測(cè)方法，敏感性高、特異性好。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，現(xiàn)在已經(jīng)有適合基層使用便攜式的熒光定量PCR儀，操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)速度快。VP1、VP2是SVA的保守基因，一般選此基因設(shè)計(jì)引物，建立PCR檢測(cè)方法。可采集水皰皮、水泡液、扁桃體、淋巴結(jié)、血液等作病料，病料采集一定要把握時(shí)機(jī)，水泡液中病毒只在發(fā)病初期半個(gè)月內(nèi)能檢測(cè)到，而血液中的病毒則在發(fā)病后1周內(nèi)才能檢測(cè)到，扁桃體中的病毒可持續(xù)6周，病料一定要新鮮，及時(shí)送達(dá)相關(guān)檢測(cè)機(jī)構(gòu)或用適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的熒光PCR儀器及配套的試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。

5 防控措施

實(shí)行自繁自養(yǎng)全進(jìn)全出的飼養(yǎng)模式，慎重引種，不從疫區(qū)引進(jìn)種豬，引種時(shí)需加強(qiáng)檢疫，并進(jìn)行嚴(yán)格隔離觀察，及時(shí)淘汰感染豬。豬場(chǎng)要遠(yuǎn)離牛、羊養(yǎng)殖場(chǎng)，嚴(yán)格控制入場(chǎng)車輛、設(shè)備、人員和食物等，切實(shí)、嚴(yán)格執(zhí)行消毒措施，防止病原隨車輛、設(shè)備等輸入場(chǎng)區(qū)。對(duì)內(nèi)部人員及車輛的有效管理，可防止疾病的水平傳播。搞好環(huán)境衛(wèi)生，加強(qiáng)消毒，不同階段豬分開(kāi)飼養(yǎng)，避免隨意混群。做好防蚊蠅和滅鼠工作，防止貓、狗等其他動(dòng)物進(jìn)入豬場(chǎng)。

加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，飼喂優(yōu)質(zhì)全價(jià)配合飼料，不飼喂霉變飼料，豬場(chǎng)提供適宜的溫度、濕度，加強(qiáng)通風(fēng)，保持舍內(nèi)空氣新鮮。降低豬群飼養(yǎng)密度，減少豬群應(yīng)激。

對(duì)免疫口蹄疫疫苗后仍出現(xiàn)類似癥狀的病例，一定要提高警惕，及時(shí)上報(bào)當(dāng)?shù)孬F醫(yī)部門，并送相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)確診，病豬要及時(shí)隔離，豬場(chǎng)做好封鎖，防止疫情外傳，對(duì)病死豬要做焚燒、深埋等無(wú)害化處理工作，豬群飼料中添加阿莫西林，恩諾沙星，以預(yù)防細(xì)菌繼發(fā)感染，飲水中添加電解多維，黃芪多糖等，增強(qiáng)豬只抗病力。豬場(chǎng)要做好清潔工作，定期用雙氧水、過(guò)氧乙酸、2%氫氧化鈉、稀硫酸、醛類、次氯酸鹽的消毒，防止疫情擴(kuò)散。

6 小結(jié)

SVA是豬的一種新發(fā)傳染病，癥狀表現(xiàn)與豬口蹄疫等疾病類似，臨床上很難鑒別，SVA危害雖不及口蹄疫病毒，但其感染仔豬導(dǎo)致仔豬死亡率升高，造成經(jīng)濟(jì)損失，給養(yǎng)豬業(yè)高效綠色健康發(fā)展帶來(lái)了新的挑戰(zhàn)。但是其是否會(huì)隨貿(mào)易而擴(kuò)散并形成大范圍流行尚不可知。但防患于未然，需引起對(duì)SVA的重視，謹(jǐn)防其擴(kuò)散形成流行。當(dāng)前對(duì)該病的相關(guān)研究還很少，尚無(wú)有效的藥物治療，也無(wú)可用的疫苗可使用，豬場(chǎng)一定要做好生物安全措施，減少外來(lái)病原的傳入，加強(qiáng)對(duì)豬只飼養(yǎng)管理工作，提高豬群自身免疫力，增強(qiáng)豬只抵抗力。養(yǎng)殖戶一定要對(duì)這種疾病有一定的認(rèn)識(shí)，對(duì)疑似病例做好實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，確診后，及時(shí)采取生物安全防控。目前SVA已在我國(guó)多個(gè)省份有豬場(chǎng)發(fā)病相關(guān)報(bào)道，為更好地控制該病，科研人員應(yīng)加快開(kāi)展對(duì)更方便、快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法和相應(yīng)的疫苗研發(fā)，以便預(yù)防該病的發(fā)生，及時(shí)診斷該病，并采取相應(yīng)的措施，降低豬場(chǎng)損失。