孫 斌 曾林勝 李 江 林福建 劉曉玲 黃友貞 緱方良

絕大多數(shù)分子生物學(xué)指標(biāo)，如雌激素受體(Ertrogen Receptor，ER)、孕激素受體(Progestrogen Receptor，PR)、原癌基因(Her-2)及增殖細(xì)胞核抗原(Ki-67)作為乳腺癌預(yù)后的重要預(yù)測因子，醫(yī)學(xué)界對(duì)之相關(guān)研究較為廣泛。乳腺癌同其他上皮性腫瘤一樣存在異質(zhì)性，且決定乳腺癌分子分型的ER、 PR、Her-2及Ki-67 這四種特征性分子病理學(xué)指標(biāo)在腫瘤組織中的分布均存在異質(zhì)性[1]。在乳腺癌超聲影像特征與生物學(xué)指標(biāo)相關(guān)性研究方面，鮮有病灶局部超聲影像學(xué)表現(xiàn)，對(duì)照相應(yīng)病灶局部的生物學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性報(bào)道。本研究旨在探討乳腺癌邊緣超聲特征與相應(yīng)病灶邊緣ER、PR、Her-2、Ki-67表達(dá)相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

收集本院2016年3月—2018年9月經(jīng)活檢病理證實(shí)為乳腺癌的患者120例。所有入選患者均未進(jìn)行新輔助化療及內(nèi)分泌治療，超聲檢查后再在超聲引導(dǎo)下獲得病灶邊緣病理結(jié)果及生物學(xué)指標(biāo)表達(dá)情況。

1.2 儀器與方法

1.2.1 超聲檢查及評(píng)估指標(biāo) 應(yīng)用Philips iU22彩色超聲診斷儀, 探頭頻率5～12 MHz。依據(jù)2013超聲乳腺成像報(bào)告及數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)[2](The Sonograghic Breast Imaging Reporting and Data System,BI-RADS US)邊緣各項(xiàng)指標(biāo)(邊緣光整、邊緣模糊、邊緣成角、邊緣微小分葉、邊緣毛刺征)，由同一高年資醫(yī)師評(píng)估記錄相應(yīng)指標(biāo)變化，后立即由同一高年資醫(yī)師在超聲引導(dǎo)下對(duì)相應(yīng)病灶邊緣進(jìn)行粗針(18G或16G)穿刺活檢并送檢。病灶邊緣定義為病灶內(nèi)部離病灶低回聲邊緣≤2 mm。

1.2.2 病理檢查 所有患者活檢標(biāo)本制成病理切片，由高年資病理科醫(yī)師讀片。

1.3 生物學(xué)指標(biāo)及結(jié)果判定

所有標(biāo)本常規(guī)固定、石蠟包埋、制片后，運(yùn)用免疫組化SP法進(jìn)行ER、PR、Her-2、Ki-67免疫組化染色。陽性判定標(biāo)準(zhǔn)以細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中有棕黃色顆粒及染色強(qiáng)度高于背景非特異著色為陽性細(xì)胞[3]。免疫組織化學(xué)檢測依照 2010 年美國臨床腫瘤學(xué)會(huì)(ASCO) 和美國病理學(xué)家協(xié)會(huì)(CAP) 標(biāo)準(zhǔn)，ER及PR陰性[即(-)]的定義為<1%腫瘤細(xì)胞核染色陽性，ER及PR陽性[即(+) ]的定義為≥ 1%腫瘤細(xì)胞核染色陽性[4]。Her-2(-)或(+)定義為陰性,(3+)定義為陽性，即(+)，(2+)需進(jìn)一步FISH檢測判斷是否存在過表達(dá)[5]，有擴(kuò)增定義為陽性。Ki-67指數(shù)<14%為陰性(-)，≥14%為陽性(+)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

本研究所進(jìn)行的統(tǒng)計(jì)分析均使用SPSS 21.0軟件進(jìn)行，評(píng)價(jià)乳腺癌超聲特征與ER、PR、Her-2、Ki-67表達(dá)的相關(guān)性。兩者相關(guān)使用Spearman相關(guān)法。本研究所有檢驗(yàn)均為雙側(cè)檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在120例乳腺癌患者中，浸潤性導(dǎo)管癌113例，髓樣癌2例，導(dǎo)管原位癌2例，浸潤性小葉癌1例，化生性癌1例，粘液癌1例?；颊呔鶠榕裕挲g26～86歲，平均(42.3±3.5)歲。

2.1 免疫組合指標(biāo)表達(dá)情況

免疫組化指標(biāo)在乳腺癌邊緣超聲二維征象的表達(dá)情況顯示具體見表1。

表1 免疫組合指標(biāo)表達(dá)情況 (%)

2.2 乳腺癌邊緣超聲二維征象與免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性

免疫組化指標(biāo)中，PR(r=0.234)與微小分葉存在極弱或無相關(guān)，ER(r=0.193)、Ki-67(r=-0.174)與微小分葉無相關(guān)；成角或毛刺與ER(r=-0.273)、PR(r=-0.252)、Her-2(r=0.141)、Ki-67(r=0.191)等免疫組化指標(biāo)均無顯著相關(guān)性。邊緣模糊與ER(r=-0.265)、PR(r=-0.370)、Her-2(r=0.176)、Ki-67(r=0.136)等免疫組化指標(biāo)均無顯著相關(guān)性。形態(tài)與ER(r=-0.003)、PR(r=-0.051)、Her-2(r=0.124)、Ki-67(r=0.108)等免疫組化指標(biāo)均無顯著相關(guān)性。具體研究結(jié)果見表2。

表2 乳腺癌邊緣超聲二維征象與免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性

注：相關(guān)系數(shù)r： 0.8～1.0極強(qiáng)相關(guān)，0.6～0.8 強(qiáng)相關(guān)，0.4～0.6 中等程度相關(guān)，0.2～0.4 弱相關(guān)，0.0～0.2極弱相關(guān)或無相關(guān)。標(biāo)紅的是具有弱相關(guān)性的，負(fù)數(shù)的表示有弱負(fù)相關(guān)性

3 討論

3.1 相關(guān)研究進(jìn)展

隨著醫(yī)學(xué)水平的不斷提高，浸潤性乳腺癌邊緣超聲技術(shù)也相應(yīng)得到了提升，在相關(guān)領(lǐng)域的研究也越來越為豐富。相關(guān)研究顯示，鼻咽癌相關(guān)基因6(NGX6)是一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因。它含有一個(gè)表皮生長因子(EGF)樣結(jié)構(gòu)域。經(jīng)過學(xué)術(shù)界大量研究表明，蛋白質(zhì)含有EGF樣結(jié)構(gòu)域影響著多種生物學(xué)行為。然而，目前對(duì)NGX6在浸潤性導(dǎo)管性乳腺癌(IDBC)中的表達(dá)與生物學(xué)行為之間的關(guān)系研究較少。

在相關(guān)研究中Xiao J等[3]探討了IDBC中NGX6的表達(dá)和預(yù)后與超聲特征的關(guān)系。通過回顧性分析122例IDBC患者的聲像圖特征及臨床資料。免疫組化法檢測NGX6的表達(dá)，NGX6表達(dá)陰性組毛刺征的發(fā)生率、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率、血流量均明顯高于陽性組。Kaplan-Meier(生存曲線)分析顯示NGX6陽性表達(dá)與較高的無病生存率(DFS)或更高的總生存率(OS)相關(guān)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與較低的DFS或較低的OS相關(guān)；較低的血流分級(jí)與較高的DFS相關(guān)。在單因素和多因素生存分析中，NGX6表達(dá)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM和血流分級(jí)是IDBC DFS和OS的獨(dú)立預(yù)后因素。超聲特征與NGX6在IDBC的表達(dá)有關(guān)。NGX6參與了IDC的侵襲和轉(zhuǎn)移活性。本研究結(jié)果提示NGX6可作為IDBC的治療靶點(diǎn)。結(jié)合超聲檢查和NGX6檢測可對(duì)IDBC預(yù)后提供臨床可靠的信息。

Hammond ME等[4]在探討乳腺浸潤性導(dǎo)管癌(IDC)的邊緣超聲特征與雌激素受體(ER)表達(dá)關(guān)系，探討術(shù)前根據(jù)IDC邊緣超聲特征預(yù)測ER表達(dá)的可行性中，對(duì)73例經(jīng)邊緣超聲和病理證實(shí)的IDC患者進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢查，判斷ER的表達(dá)。最終研究結(jié)果表明，IDC患者的超聲表現(xiàn)與ER表達(dá)之間存在一定的相關(guān)性，用邊緣超聲特征預(yù)測ER表達(dá)是可行的。時(shí)兆婷等[5]認(rèn)為邊緣超聲結(jié)合ER表達(dá)為乳腺癌的臨床治療提供了有價(jià)值的依據(jù)。

2013年超聲乳腺成像報(bào)告及數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)里定義的邊緣模糊，在超聲腫塊邊界出現(xiàn)高回聲“暈”，該現(xiàn)象可能與邊緣模糊表現(xiàn)相關(guān)，另據(jù)常婉英等[2]認(rèn)為是其周圍結(jié)締組織增生反應(yīng)的聲像圖表現(xiàn)，王怡等[6]的報(bào)告認(rèn)為，高回聲“暈”與ER、PR陽性表達(dá)有關(guān)，腫塊邊界出現(xiàn)高回聲“暈”，則預(yù)示腫瘤侵襲性較低，可以將其認(rèn)為浸潤性乳腺癌的一種反應(yīng)性增生，能夠限制癌細(xì)胞的擴(kuò)散，但其是否為一種早期保護(hù)性機(jī)制，還需要進(jìn)一步通過臨床研究佐證。

3.2 病灶邊緣免疫組化可能存在的相關(guān)性

超聲二維征象可能不完全反映乳腺癌邊緣，但卻能夠反映病灶邊緣免疫組化可能存在的相關(guān)性[7]。目前，相關(guān)研究提示，乳腺癌邊緣組織可能具有一定的惡性程度。在血液微循化下，能夠構(gòu)建極為強(qiáng)大的生物學(xué)惡性行為，而使用超聲二維征象，能夠通過超場表現(xiàn)，較好地反映ER、PR、HER-2、P53、Ki-67免疫組織化，共計(jì)5項(xiàng)指標(biāo)與其存在的相關(guān)性，從而幫助醫(yī)師鑒別乳腺腫塊可能出現(xiàn)的良惡性判斷[8]。采用多項(xiàng)免疫組織化指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)合檢測，能夠較好地判斷其在乳腺癌中的表達(dá)，從而提煉可能與病灶存在的相關(guān)性[9-10]。

3.3 乳腺癌邊緣超聲二維征象與免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性

乳腺癌邊緣超聲二維征象與免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性結(jié)果提示：①PR的表達(dá)與病灶邊緣模糊相關(guān)(P<0.05)，當(dāng)PR表達(dá)陽性，那么病灶邊緣模糊表現(xiàn)極有可能為明顯，反之，PR表達(dá)為陰性，病灶邊緣模糊表現(xiàn)極有可能為不明顯；②ER的表達(dá)與病灶邊緣模糊及病灶邊緣成角或毛刺相關(guān)(P<0.05)，也就是說當(dāng)ER表達(dá)陽性，病灶邊緣模糊、成角或毛刺表現(xiàn)越有可能為明顯，反之ER表達(dá)為陰性，病灶邊緣模糊、成角或毛刺表現(xiàn)極有可能為不明顯；③Her-2的表達(dá)與病灶微小分葉相關(guān)(P<0.05)，也就是說當(dāng)Her-2表達(dá)陽性，病灶邊緣微小分葉表現(xiàn)極有可能為明顯，反之PR表達(dá)為陰性，病灶邊緣微小分葉表現(xiàn)越有可能為不明顯。

3.4 研究存在的局限性

本研究存在一定的局限性：①由于本次研究臨床樣本量過小，因此，無論結(jié)果數(shù)據(jù)是否存在差異性，均可能由于隨機(jī)誤差過大而無法得到一個(gè)肯定的結(jié)論[11]。②目前，乳腺癌病灶邊緣定義尚無通用標(biāo)準(zhǔn)，本次研究為初步研究，具體分類情況有待進(jìn)一步商榷[12]。

4 結(jié)論

綜上所述，乳腺癌邊緣模糊與PR表達(dá)、邊緣呈角或毛刺及邊緣模糊與ER 表達(dá)、邊緣微小分葉與Her-2的表達(dá)存在一定相關(guān)性，聯(lián)合檢測相應(yīng)病灶邊緣免疫組化指標(biāo)，可幫助預(yù)測乳腺癌的侵襲性。