李德臣 王志強 孫瑩 鞠慶斌

摘要：在對蛋雞進行血清檢測時常抓雞采血，可這樣會給蛋雞帶來應(yīng)激?，F(xiàn)應(yīng)用檢測卵黃抗體來替代檢測血清中抗體，以減少產(chǎn)蛋雞開產(chǎn)后，采樣應(yīng)激造成的產(chǎn)蛋率下降，提高養(yǎng)殖場養(yǎng)殖收入，減少采樣難度。

關(guān)鍵詞：卵黃抗體;血清抗體;禽流感;蛋雞

中圖分類號：S858.31???? 文獻標識碼：B文章編號：2095-9737（2019）11-0017-02

高致病性禽流感是危害養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展的一種嚴重的急性、接觸性、高死亡率的病毒性傳染病，世界動物衛(wèi)生組織將其列為必須報告的動物傳染病，我國將其列為一類動物疫病。為做好高致病性禽流感的防控工作，我國將高致病性禽流感作為強制免疫動物疫病，按照年度免疫方案對存欄禽有序開展免疫工作，根據(jù)抗體消長規(guī)律，適時采集血液樣品進行檢測，以評估免疫效果。但在實際工作中，采樣難是開展監(jiān)測工作面臨的重要問題，尤其是產(chǎn)蛋雞開產(chǎn)后，采樣應(yīng)激會造成產(chǎn)蛋率下降。筆者與同行專家從實際問題入手，對蛋雞禽流感卵黃抗體與血清抗體水平進行對比分析，以期解決采樣難的問題。

1 試驗方法

在本溪市本溪縣、桓仁縣、明山區(qū)、高新區(qū)、溪湖區(qū)分別選取1個褐殼蛋雞規(guī)模養(yǎng)殖場，編號分別為A、B、C、D、E，每個蛋雞場選取1批蛋雞進行試驗研究。試驗雞群分別于14日齡、40日齡、100日齡免疫注射重組禽流感病毒（H5N1 Re-8，H7N9 H7-Re-1）滅活疫苗，其他動物疫病免疫按程序開展。160日齡，分別采集同批蛋雞血清樣品和雞蛋各30份，進行實驗室檢測。

2 檢測方法

按照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》GB/T18936-2003血凝/血凝抑制試驗對卵黃抗體和血清抗體進行檢測。

3 檢測試劑

禽流感H5（Re-8）抗原和陽性血清;1%紅細胞自配。

4 樣品制備

4.1 卵黃樣品制備

采集新鮮的雞蛋，用蛋黃分離器分離出蛋黃，并用10 mL注射器將蛋黃吸取1.5～2 mL置于潔凈無污染的離心管冷藏備用。

4.2 血清樣品制備

用采血器于雞翅靜脈采血5 mL，傾斜45°角，靜置，吸取上層血清待用;或者利用離心機以3000 r/min離心5 min，吸取上層血清待用。

5 結(jié)果與分析

共檢測5個商品蛋雞場、149份血清樣品、149份卵黃樣品（其中1個蛋雞場血清質(zhì)量差，檢測29份，同時檢測29份卵黃樣品），結(jié)果見表1。

5.1 血清抗體與卵黃抗體符合度

抗體水平±1個滴度視為相符。5個蛋雞場禽流感H5（Re-8）血清抗體和卵黃抗體的符合度最低為93.10%，最高為100%，均超過90%，符合度高度吻合，同時符合度不受地域的影響，所以可以采集雞蛋對產(chǎn)蛋雞群進行免疫抗體監(jiān)測和評估。

5.2 血清抗體與卵黃抗體水平比較

`?? 按照國家動物疫病監(jiān)測方案，5個場的卵黃抗體和血清抗體水平均達到國家規(guī)定的標準，但5個蛋雞場中，A場和D場卵黃抗體比血清抗體離散度大，且整體卵黃抗體效價低于血清抗體，這可能與卵黃形成的過程需要9～10天，導(dǎo)致卵黃抗體效價相比血清抗體效價有一定的滯后性有關(guān)[1]。

6 討論與展望

此次試驗主要是以H5N1 Re-8株免疫抗體監(jiān)測為例，且檢測的是一個時間點，對于卵黃抗體和血清抗體連續(xù)的相關(guān)性還需要進一步做細致的、連續(xù)的采樣檢測。

林英等以新城疫、禽流感H5N1 Re-8、禽流感H7N9、禽流感H9免疫抗體為研究對象，對血清抗體和卵黃抗體相關(guān)性研究結(jié)果表明，血清抗體和卵黃抗體密切相關(guān)，但不同疫苗的血清抗體和卵黃抗體相關(guān)性并不相同[2]。所以，建議最好對不同疫苗開展卵黃抗體和血清抗體的檢測對比，以保證指導(dǎo)防控更加有針對性。

實際生產(chǎn)中，雞的用途有很多，不僅有蛋用的，還有肉用的，以卵黃抗體進行疫苗效果評估只對產(chǎn)蛋雞可行，但對于肉仔雞，非產(chǎn)蛋期蛋雞不可行。通過卵黃抗體進行疫苗效果評估是一個突破口，希望畜牧獸醫(yī)同行還能開發(fā)出更加便捷、減少禽類應(yīng)激的疫苗效果評估方法。

參考文獻：

[1] 何賢海.禽流感血清抗體和卵黃抗體的比較研究[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘，2015（10）：61.

[2] 林英，王新波，焦玥明，等.蛋雞血清抗體與卵黃抗體相關(guān)性的分析與研究[J].家禽科學，2018（03）：42-43.