董 浩，韓 燾，趙柏林，于廣秋，劉 毅，孫永健

（1.中國動物疫病預防控制中心，北京 100125；2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局，北京 100125；3.建昌縣畜牧獸醫(yī)局，遼寧建昌 125300）

布魯氏菌病（以下簡稱布?。┦鞘澜鐒游镄l(wèi)生組織（OIE）須通報的動物疫病，目前在全球160 多個國家和地區(qū)流行[1]。我國2008 年新修訂的《一、二、三類動物疫病病種名錄》將該病列為二類動物疫病，同時該病也是“中華人民共和國傳染病防治法”規(guī)定的35 種法定傳染病中的乙類傳染病、我國“職業(yè)病防治法”中規(guī)定的細菌性職業(yè)病之一[2-3]。當前，布病的流行情況在全球呈反彈趨勢，并已成為全球特別是發(fā)展中國家所面臨的重要公共衛(wèi)生問題。我國布病形勢也十分嚴峻，由于我國牛羊養(yǎng)殖量快速增長、牛羊飼養(yǎng)場生物安全水平不高、市場交易頻繁等因素，我國畜間布病發(fā)病區(qū)域不斷擴大，牛羊感染數(shù)量不斷增加。與此同時，我國人間布病疫情也同步快速增加，當前畜間和人間布病疫情均處于較嚴重的時期。

原農(nóng)業(yè)部和原國家衛(wèi)生計生委共同印發(fā)的《國家布魯氏菌病防治計劃（2016—2020 年）》中要求，一類地區(qū)（人間報告發(fā)病率超過1/100 000 或畜間疫情未控制縣數(shù)在30%以上的15 個省、自治區(qū)和新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團）采取以免疫接種為主的防控策略。種畜禁止免疫，實施監(jiān)測凈化；奶畜原則上不免疫，實施監(jiān)測和撲殺為主的措施[4]。

目前，在我國使用的布病疫苗主要有A19、S2 和M5（M5-90）三種。這三種疫苗均為減毒活疫苗，對人有一定的致病力，使用時都應該做好生物安全防護。A19 疫苗主要通過肌肉注射的方式用于3～8 月齡的犢牛免疫；S2 疫苗可以通過口服、皮下或肌肉注射的方式用于牛、羊、豬的免疫；M5 疫苗的毒力較強，可以通過皮下、滴鼻或口服的方式免疫羊，對3～8 月齡的犢?？赏ㄟ^皮下注射方式免疫。在這三種疫苗中，只有S2 疫苗可以通過口服免疫途徑用于懷孕動物，A19、M5 疫苗或者肌肉注射S2 疫苗都可能引起懷孕母畜的流產(chǎn)。基于不同疫苗的特點，建昌縣探索了一種S2 疫苗通過母羊陰道噴注的新型布病免疫技術(shù)。

1 建昌縣的基本情況

建昌縣隸屬于遼寧省葫蘆島市，屬于布病一類地區(qū)。全縣有32 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)、276 個村及5 個社區(qū)，牛存欄46 224 頭，羊存欄159 900 只，防疫員人員281 名。畜間布病的流行情況比較嚴重，部分感染羊群流產(chǎn)比例高達55%。全縣每年新增布病感染人數(shù)近100 人，感染人中大部分有飼養(yǎng)羊牛史。

2 新型免疫技術(shù)的相關(guān)情況

2.1 陰道噴注免疫技術(shù)特點

為了提升羊的布病疫苗免疫效果，建昌縣動物疫病預防控制中心通過模仿布病自然感染途徑，使用S2 疫苗株對布病陰性的母羊進行陰道噴注免疫，并在多個羊群進行不同免疫劑量、不同免疫方法（肌肉注射、陰道噴注、口腔噴注、拌料、飲水等）的比較試驗[5-6]。

經(jīng)比較，陰道噴注的方法比S2 疫苗的其他傳統(tǒng)免疫方式具有明顯優(yōu)勢：該方法可用于懷孕羊免疫，應激反應低，能夠產(chǎn)生和肌肉注射同樣高水平的抗體陽轉(zhuǎn)率（一周后陽轉(zhuǎn)率即可達到80%），使得通過抗體陽轉(zhuǎn)率對布病免疫的覆蓋度進行監(jiān)測成為可能[5]。而經(jīng)口免疫途徑（口腔噴注、拌料、飲水），抗體陽轉(zhuǎn)率低（S2 疫苗口服免疫4 周抗體陽轉(zhuǎn)率通常僅在30%左右）且飲水、拌料等方法還存在因動物飲水、采食量差異而引起免疫效果不均勻的缺點。

值得注意的是，試驗結(jié)果還表明陰道噴注的方法對于小尾寒羊也比較安全，不會產(chǎn)生明顯的應激反應。同時，該方法也可用于奶牛的布病免疫。

2.2 免疫過程中的其他關(guān)鍵點

2.2.1 剔除陽性動物 免疫實施前對整個羊群進行血清學檢測，剔除陽性動物，只對血清學陰性動物進行免疫。

2.2.2 充分消毒 動物免疫前和免疫結(jié)束后分別對羊場進行充分的噴霧消毒，最大程度減少因羊群躁動產(chǎn)生的氣溶膠。

2.2.3 分群免疫 在免疫時將公羊和母羊分群，防止公羊躁動沖撞孕羊，造成其流產(chǎn)。對于公羊采用1/4 口服劑量進行肌肉注射，同樣可以產(chǎn)生高滴度的抗體水平。

2.2.4 做好個人生物安全防護 穿戴好口罩、護目鏡、防護服、乳膠手套和鞋套等防護設(shè)備。

2.2.5 使用陰道噴注免疫器械進行免疫 為降低疫苗溶液泄露的風險，建議使用陰道噴注免疫器械進行免疫，以最大限度保障操作人員安全。該設(shè)備已于2016 年3 月份獲得了實用新型專利證書。

2.2.6 服用抗生素 參與免疫的人員服用四環(huán)素類抗生素一周時間，進一步降低人員感染的可能性。

2.3 陰道噴注免疫技術(shù)的局限性

陰道噴注免疫羊只的過程中可以快速激發(fā)免疫抗體的產(chǎn)生，而且抗體持續(xù)期較長，在該方法免疫后6 個月仍有較大比例的母羊抗體呈陽性。由于當?shù)卦囼灁?shù)據(jù)有限，而且羊只的流動性較大，目前尚未測定準確的抗體持續(xù)期。S2 疫苗的經(jīng)口免疫動物在免疫后6 個月免疫抗體基本消失。鑒于目前尚沒有從抗體水平區(qū)分布病免疫抗體和自然感染抗體的方法，因此S2 疫苗的陰道噴注免疫途徑將對免疫后通過抗體檢測的方法剔除陽性動物造成一定的干擾。

3 新型免疫技術(shù)的使用效果

目前，該免疫技術(shù)已在建昌縣推廣示范5 年，經(jīng)過監(jiān)測，免疫羊群的抗體合格率達85%以上。在推廣該免疫技術(shù)后，該縣沒有羊只出現(xiàn)流產(chǎn)、產(chǎn)死胎和因劇烈應激反應而引起羊只死亡等現(xiàn)象，也沒有防疫員和畜主因布病免疫而感染布病。同時，建昌縣每年新增布病病例人數(shù)也大幅下降，由2014 年的75 人下降到2018 年的12 人，且經(jīng)過流行病學調(diào)查，進行了羊群免疫的養(yǎng)殖戶沒有新發(fā)病例。

該免疫技術(shù)在建昌縣取得成功后，2015 年葫蘆島市的其他4 個縣（區(qū)）進行了推廣使用。全市共開展該技術(shù)培訓3 683 人次。從2015 年至今，葫蘆島市共免疫牛羊2 502 507 頭（只），人間新發(fā)布病病例數(shù)急劇下降，徹底甩掉了多年的全遼寧省新發(fā)布病病例數(shù)排名第一的帽子，2018 年葫蘆島市新發(fā)布病病例數(shù)比2014 年減少了74%，效果十分明顯。

2016 年遼寧省動物疫病預防控制中心在建昌縣選取兩個羊場對該免疫技術(shù)再一次進行了驗證，試驗結(jié)果理想[6]。同一年，該免疫技術(shù)獲得葫蘆島市科技進步一等獎。

4 存在問題

4.1 缺乏經(jīng)費支持無力深入研究

由于開展動物免疫指標的持續(xù)期監(jiān)測需要對羊進行長時間連續(xù)檢測，不同免疫方法的比較需要大量的實驗動物數(shù)據(jù)支撐，免疫器械的研發(fā)與優(yōu)化也需要較多資金投入等多方面原因，目前缺乏經(jīng)費支持是該免疫技術(shù)進一步優(yōu)化遇到的最大瓶頸。

4.2 相關(guān)技術(shù)無法得到進一步推廣

盡管陰道噴注免疫技術(shù)在建昌縣和葫蘆島市的部分地區(qū)已經(jīng)推廣使用并取得了良好的效果，但是由于宣傳和推廣的力度不足，該技術(shù)雖然已經(jīng)成型了三年有余，仍僅限于在遼寧省的部分地區(qū)使用。

4.3 技術(shù)仍需進一步完善

陰道噴注免疫技術(shù)抗體陽轉(zhuǎn)快，對母畜安全性高，抗體持續(xù)期長于經(jīng)口途徑免疫S2 疫苗。根據(jù)建昌縣疫控中心的試驗數(shù)據(jù)顯示，在陰道免疫164 d 后仍有超過15%的羊抗體呈陽性。但因目前尚無區(qū)分免疫抗體和感染抗體的檢測方法，導致使用該免疫方法一定程度上干擾了在免疫的動物群體中剔除感染抗體陽性動物。

5 相關(guān)建議

5.1 全面推進布病一類地區(qū)的家畜免疫

在流行率較高的地區(qū)，僅通過檢測和撲殺陽性動物，不僅成本高，費時費力，而且很難實現(xiàn)控制布病的目標。國內(nèi)外許多典型的實例已經(jīng)證明了疫苗免疫是高流行率地區(qū)控制布病流行的既有效又經(jīng)濟的方法，因此應該嚴格按照《國家布病防治計劃（2016—2020 年）》的相關(guān)要求，在一類地區(qū)全面、同步推進家畜布病的免疫工作。

5.2 加大布病防疫資金扶持力度

建議加強防疫資金的扶持力度，支持人員防護和先進防控技術(shù)的推廣和示范。有效提升一類地區(qū)的疫苗免疫效果，同時保障免疫人員安全。

5.3 加強宣傳和技術(shù)推廣

建議通過加大宣傳和培訓力度，在一類地區(qū)重點宣傳能夠有效提升布病防控效果的技術(shù)措施。根據(jù)養(yǎng)殖場的實際，因地制宜開展免疫技術(shù)推廣和評價等工作。以降低人布魯氏菌感染率為目的，做好免疫等防控工作，鼓勵先進布病防控技術(shù)的推廣。

5.4 探索易感人群的布病預防新模式

世界衛(wèi)生組織、世界動物衛(wèi)生組織、聯(lián)合國糧農(nóng)組織聯(lián)合編寫的《人獸布魯氏菌病》一書中提到了在緊急暴露的情況下，可以通過服用抗生素阻斷布魯氏菌感染的發(fā)生[7]。目前，我國尚沒有布魯氏菌暴露情況下緊急預防的規(guī)范性文件，建議有關(guān)部門加快制定相關(guān)緊急預防的指導性文件，降低防疫人員等易感人群感染布病的風險。