□ 王喜梅 河南華測(cè)檢測(cè)技術(shù)有限公司
在食品微生物檢測(cè)技術(shù)發(fā)展過(guò)程中,酶聯(lián)免疫吸附法扮演著重要的角色。為了推動(dòng)相關(guān)研究的發(fā)展,本文通過(guò)分析食品微生物檢測(cè)的技術(shù)要求,對(duì)酶聯(lián)免疫吸附法的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行了探討。
食品微生物檢測(cè)主要是指利用各種技術(shù)手段對(duì)食品中的細(xì)菌進(jìn)行檢測(cè)。在食品加工過(guò)程中,其內(nèi)部會(huì)存留一部分細(xì)菌。這部分細(xì)菌對(duì)食品的長(zhǎng)期保存和食用安全等都會(huì)產(chǎn)生一定影響。因此,食品一般都需要經(jīng)過(guò)微生物檢測(cè),確保其達(dá)到安全標(biāo)準(zhǔn)。在目前的檢測(cè)中,檢測(cè)內(nèi)容一般包括細(xì)菌總數(shù)、致病菌的檢驗(yàn)等。這些檢測(cè)內(nèi)容對(duì)食品的安全食用等都會(huì)產(chǎn)生比較大的影響。
經(jīng)過(guò)多年應(yīng)用,食品微生物檢測(cè)技術(shù)取得了比較好的發(fā)展,應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)也逐漸豐富。目前固體培養(yǎng)基法、液體培養(yǎng)基發(fā)酵法等都是比較常用的檢測(cè)方法。這些檢測(cè)方法需要應(yīng)用到的設(shè)備比較簡(jiǎn)單,適用范圍廣。但在應(yīng)用的過(guò)程中,也存在著耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)、檢測(cè)效率低、敏感性差等問(wèn)題[1]。
在新的食品微生物檢測(cè)中,迅速、準(zhǔn)確、高效成為了人們新的技術(shù)要求。因此,需要推動(dòng)新檢測(cè)方法的應(yīng)用。酶聯(lián)免疫吸附法在應(yīng)用過(guò)程中有比較大的技術(shù)優(yōu)勢(shì),其應(yīng)用研究也越來(lái)越受到人們的關(guān)注。
酶聯(lián)免疫吸附法又稱(chēng)為酶聯(lián)免疫法,是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新型免疫測(cè)定技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸附法在1971被首次提出。此后,酶聯(lián)免疫吸附法的研究逐漸成為了熱門(mén)前沿研究課題。
目前,酶聯(lián)免疫吸附法的研究已經(jīng)取得了比較大的突破。其作用機(jī)理是首先促使抗原或者抗體與某種固相載體的結(jié)合。在結(jié)合過(guò)程中,盡量保持抗原或者抗體的活性。隨后,再實(shí)現(xiàn)抗原或抗體和某種酶的結(jié)合,并保持其活性。在測(cè)定的過(guò)程中,利用洗滌的方法促使抗原或抗體復(fù)合物與標(biāo)本中受檢物質(zhì)形成一定的比例關(guān)系。在加入酶反應(yīng)底物后,即可產(chǎn)生有色產(chǎn)物。
酶聯(lián)免疫吸附法的應(yīng)用對(duì)促進(jìn)食品微生物檢測(cè)有著重要的意義。該檢測(cè)方法可以有效克服現(xiàn)有微生物檢測(cè)方法在檢測(cè)效率方面的缺陷,所需要應(yīng)用到的技術(shù)設(shè)備也比較簡(jiǎn)單。因此,推動(dòng)酶聯(lián)免疫吸附法在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用成為了人們關(guān)注的重點(diǎn)。
為了推動(dòng)食品微生物檢測(cè)的未來(lái)發(fā)展,本文通過(guò)分析多方資料,結(jié)合時(shí)代技術(shù)發(fā)展的特點(diǎn),對(duì)酶聯(lián)免疫吸附法的應(yīng)用特點(diǎn)進(jìn)行了研究。通過(guò)分析上述內(nèi)容,本文對(duì)該檢測(cè)方法的應(yīng)用要點(diǎn)進(jìn)行了總結(jié)。
目前,雙抗體夾心法是酶聯(lián)免疫吸附法中應(yīng)用最為廣泛的方法。該檢測(cè)方法與上文中所述的作用機(jī)理基本一致。唯一不同的是在應(yīng)用過(guò)程中需要將大分子抗原分別加工成固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物,隨后再進(jìn)行檢測(cè)工作。這類(lèi)檢測(cè)方法比較簡(jiǎn)單,但實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中會(huì)面臨著一定的限制。僅在測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原的過(guò)程中,該類(lèi)檢測(cè)方法受到的限制較小。因此,該檢測(cè)方法目前主要應(yīng)用在臨床檢測(cè)中。
現(xiàn)階段,雙位點(diǎn)一步法是應(yīng)用在食品微生物檢測(cè)中的另一種主要檢測(cè)方法。該檢測(cè)方法是在雙抗體夾心法的基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的。由于這種方法將部分工作過(guò)程合在了一起,該檢測(cè)方法操作更加便捷,反應(yīng)時(shí)間更短,在敏感性和特異性方面也有所提高,被廣泛應(yīng)用在食品微生物檢測(cè)中[2]。
在應(yīng)用過(guò)程中,酶聯(lián)免疫吸附法有一些應(yīng)用要點(diǎn)需要注意。本文通過(guò)分析相關(guān)資料,對(duì)應(yīng)用要點(diǎn)進(jìn)行了總結(jié)。①在酶聯(lián)免疫吸附法的實(shí)驗(yàn)材料選擇方面,需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行認(rèn)真嚴(yán)格的選擇。固相載體、包被抗體或抗原、酶標(biāo)記抗體工作濃度和酶的底物及供氫體的選擇等都會(huì)對(duì)酶聯(lián)免疫吸附法的實(shí)驗(yàn)效果產(chǎn)生影響。②為了保證實(shí)驗(yàn)效果,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,需要進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn),即待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
為了推動(dòng)食品微生物檢測(cè)的發(fā)展,本文分析了食品微生物檢測(cè)的技術(shù)要求,研究了酶聯(lián)免疫檢測(cè)法的應(yīng)用價(jià)值,并對(duì)其應(yīng)用方法和應(yīng)用要點(diǎn)進(jìn)行了探討。這些研究對(duì)酶聯(lián)免疫檢測(cè)法的應(yīng)用和食品微生物檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展有很好的幫助。