倪厚勇
(江蘇省如皋市白蒲鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 226511)
2007年,我國(guó)開(kāi)始有北京鴨感染呼腸孤病毒病例,但沒(méi)有致死性。2011年,全國(guó)部分地區(qū)養(yǎng)殖戶和獸醫(yī)向動(dòng)物健康服務(wù)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室反映鴨群爆發(fā)是一種傳播迅速的未知疫病[1],該病表現(xiàn)為精神沉郁、癱瘓,剖檢死鴨發(fā)現(xiàn)肝臟有局部性壞死、膽管增生、脾臟出現(xiàn)大面積壞死等癥狀。取病變肝臟研磨處理,離心取上清過(guò)濾接種鴨胚成纖維細(xì)胞,48h 后出現(xiàn)明顯細(xì)胞病變(形成合胞體)。接種鴨胚于48~72h 死亡,死亡胚體肝臟呈現(xiàn)腫脹、出血。電子顯微鏡下觀察到球狀帶刺的病毒粒子,與呼腸孤病毒科的其他成員一致。
呼腸孤病毒,呈球形狀,多數(shù)有囊膜,表現(xiàn)為20 面對(duì)稱的dsRNA 病毒。病毒外殼外鑲92 顆中空的粒子,在Csfa 梯度中,感染病毒子的密度為1.29~1.30g/ml,無(wú)感染性空衣殼為1.29~1.30g/ml,病毒芯髓為 1.44g/ml。純化病毒只含有 RNA 和蛋白質(zhì),平均含量分別為18.7%和81.3%。
1.2.1 抗原性
對(duì)病毒抗原性的分析,通過(guò)熒光抗體試驗(yàn)、瓊擴(kuò)試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)等[2],能明顯檢測(cè)出病毒各毒株間有明顯的群特異抗原性。而對(duì)呼腸孤病毒的分類需要結(jié)合血清學(xué)方法;但由于彼此存在大量交叉反應(yīng),分離的毒株不能作為單獨(dú)的血清型。國(guó)外對(duì)病毒抗原性的分析,呼腸孤病毒血清型繁多。Wood 等對(duì)美國(guó)和日本相關(guān)乎腸孤病毒的研究中,經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),有近11個(gè)血清型;同時(shí),在進(jìn)一步的試驗(yàn)中證實(shí):這些不同血清型之間不存在交叉保護(hù)作用。
1.2.2 培養(yǎng)
禽源細(xì)胞很容易分離培養(yǎng)禽呼腸孤病毒。常用的禽原代細(xì)胞包括雞胚的成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞、肺細(xì)胞、腎細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和睪丸細(xì)胞等。最常用的是2~6 周齡雛雞腎細(xì)胞,分離火雞株時(shí)可用火雞腎細(xì)胞。結(jié)果表明,分離本病毒的雞胚肝細(xì)胞最敏感,其次為雞腎細(xì)胞,而雞胚成纖維細(xì)胞最差,此外,分離鴨源呼腸孤病毒,可用鴨胚的上述各種原代細(xì)胞。某些毒株經(jīng)適應(yīng)可在許多哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng),但Vero 除外,大多數(shù)毒株不產(chǎn)生CPE。
1.2.3 致病性
呼腸孤病毒以鴨、雞等其他禽類易感,此病既可垂直感染,又可水平感染,而導(dǎo)致病毒株不多見(jiàn)。筆者查閱相關(guān)此病致病性的研究綜述,Clork 等認(rèn)為病毒致病性有3 大類型。這3大類型為:I 型,造成禽類暫時(shí)性消化系統(tǒng)紊亂,誘發(fā)吸收障礙。II 型,以病毒性關(guān)節(jié)炎綜合征為典型。Ⅲ型,可誘發(fā)前兩者。上3 類感染病患都可造成病禽生長(zhǎng)遲緩,出現(xiàn)心肌炎、腸炎、肝炎、胸腺萎縮、急慢性呼吸道等等癥狀。個(gè)別病型的出現(xiàn),常常會(huì)因某些寄生蟲(chóng)的作用而造成病癥加劇[3]。
目前,多種鳥(niǎo)類分離出呼腸孤病毒??梢?jiàn),此病毒廣泛存在自然界中。鴨群中此病常見(jiàn)傳染源為番鴨,致病病毒在盲腸扁桃體和附關(guān)節(jié)內(nèi)被分離出來(lái)。此病流行潛伏期長(zhǎng)短與感染病毒毒型、寄生宿主日齡、受染途徑等有很大關(guān)系。多數(shù)情況下,致病病毒經(jīng)呼吸道、消化道侵染番鴨,并能在短時(shí)間內(nèi)迅速波及全群。此病水平傳播受病毒毒型的影響差異較大。一般來(lái)說(shuō),腸道排毒時(shí)間較呼吸道時(shí)間長(zhǎng),因?yàn)榧S便是此病病毒的重要載體。此病存在垂直感染的可能,但經(jīng)種蛋傳播的概率不高。易感群體中1日齡雛鴨最易感。后期,隨著日齡的增加,自身免疫系統(tǒng)的健全完善,感染此病的可能性大減。
由于宿主類型,感染年齡、機(jī)體抗病毒狀態(tài)、致病病毒毒力等方面存在差異,不良環(huán)境因素的刺激,還有各種免疫抑制病的存在都會(huì)導(dǎo)致鴨呼腸孤病毒感染表現(xiàn)出不同的癥狀。
吸收障礙型,自然感染潛伏期難以確定,表現(xiàn)典型癥狀:體質(zhì)孱弱,精神萎靡,羽毛蓬松,行走不便。患病 1~2 周后,典型癥狀:長(zhǎng)勢(shì)不良,骨質(zhì)疏松,腹瀉,糞便中間雜未消化的飼料。此病感染率約5%~20%,致死率達(dá)10%左右。
關(guān)節(jié)炎型/腱鞘炎型,此病多發(fā) 4~7 周齡,也有 14~16 周齡。患病典型癥狀:跗關(guān)節(jié)上脛骨和鍵束雙側(cè)腫大,行走不便,后期腓腸肌腱有斷裂癥狀。雛鴨感染后1 周,有明顯的肝炎、心肌炎。急性感染1~3d 后恢復(fù),但有轉(zhuǎn)變?yōu)槁愿腥镜目赡?。病程稍長(zhǎng)的病例,病鴨步態(tài)蹣跚,后期發(fā)育不良,多見(jiàn)成年鴨群,恢復(fù)難度大。此病高發(fā),但是,致死率較低約6%左右。
除上述兩種病型外,還有第3 類兼顧兩者,既表現(xiàn)吸收障礙,又有關(guān)節(jié)炎型/腱鞘炎型的癥狀。
吸收障礙型,典型病變病理集中在胸腺、胰腺、心肌等處。而且,誘發(fā)病因的分析較復(fù)雜,普遍認(rèn)為此病的發(fā)生與胰腺損傷、甲狀腺損傷、消化道炎癥等有關(guān)系。
關(guān)節(jié)炎型/腱鞘炎型,自然感染鴨群的肉眼病變是趾層肌腱和壞伸肌腱腫脹,爪墊和蹌關(guān)節(jié)一般不出現(xiàn)腫脹。感染早期附關(guān)節(jié)和鎖關(guān)節(jié)腿鞘有明顯水腫。附關(guān)節(jié)內(nèi)滑膜經(jīng)常有點(diǎn)狀出血。腿部炎癥可發(fā)展為其腿鞘硬化、粘連和關(guān)節(jié)軟骨增生等特征的慢性型病變。實(shí)驗(yàn)感染的鴨患肢環(huán)端骨干腫大。
鴨呼腸孤病毒感染,目前流行范圍較廣,分水平傳播和垂直傳播,致病病毒有較強(qiáng)的外界抵抗力,臨床防治存在一定難度。為此,降低此病毒感染的發(fā)病概率,早期落實(shí)好綜合防治措施,改善養(yǎng)鴨管理制度,對(duì)科學(xué)防控有不錯(cuò)的效果。
常用的綜合性防治措施有做好防應(yīng)激管理;飼喂用全價(jià)飼料;嚴(yán)格鴨舍的消毒管理,注意場(chǎng)地環(huán)境衛(wèi)生,徹底清洗禽舍后,用燒堿溶液或0.5%有機(jī)碘溶液,噴施消毒,這些措施對(duì)防水平傳播效果不錯(cuò)。
發(fā)現(xiàn)有患病病例,務(wù)必及早隔離,視病情康復(fù)情況做進(jìn)一步處理。此病發(fā)現(xiàn)及時(shí),注射自制的高免卵黃抗體,對(duì)控制病害發(fā)生效果不錯(cuò)。用抗生素對(duì)癥治療和并發(fā)癥治療效果較好。
總結(jié)以往防控此病的經(jīng)驗(yàn),考慮到致病病毒有較強(qiáng)的外界抵抗力,存在經(jīng)機(jī)械或觸摸等簡(jiǎn)單傳播的可能。為此,單純靠完善場(chǎng)內(nèi)生物安全措施尚且不能起到遏制病毒擴(kuò)散和蔓延的目的。較為有效的防控措施,除了自繁自養(yǎng)、全進(jìn)全出、嚴(yán)格徹底消毒等,規(guī)范接種管理等也是很重要、關(guān)鍵的因素。
針對(duì)接種的對(duì)象有種鴨、雛鴨,本病存在母源傳染的可能,為此,做好種鴨免疫接種能有效降低后代鴨感染的可能,削減母源傳播感染的幾率。此外,雛鴨對(duì)致病病毒同樣有較強(qiáng)的易感性,就雛鴨對(duì)此病的易感性分析,一般1日齡最易感,而持續(xù)到2 周齡才慢慢有強(qiáng)抵抗力。通過(guò)接種增強(qiáng)母體的母源抗體水平,同樣能起到有效保護(hù)雛鴨的目的。解決這一問(wèn)題,最合理的方法是開(kāi)產(chǎn)前2~3 周對(duì)母鴨接種,用滅活苗免疫,使母鴨體內(nèi)母源抗體水平提高,這樣一方面保護(hù)雛鴨,另一方面限制了病毒經(jīng)卵垂直傳播的可能。
在選擇疫苗選擇上,有弱毒苗和滅活苗兩種。不同的病毒血清型不存在交叉保護(hù)。為此,確保免疫抗體的有效保護(hù)必須要選擇對(duì)應(yīng)血清型的疫苗。
鴨呼腸孤病毒感染后表現(xiàn)的臨床癥狀呈多樣化、復(fù)雜化的特點(diǎn)。如何解釋這一點(diǎn),筆者認(rèn)為可從這幾方面辯證思考:第一,病原表現(xiàn)復(fù)雜化。如毒力、感染數(shù)量、對(duì)宿主的親嗜性、感染途徑等。第二,機(jī)體狀況的不同。與宿主的年齡、狀況、品種等。第三,外界環(huán)境因素的作用,如溫濕度、衛(wèi)生條件等。
目前,針對(duì)鴨呼腸孤病毒感染的防治難度較大。這與鴨呼腸孤病毒血清型眾多有很大關(guān)系。為此,日常即使搞好接種防疫工作,也難免存在疫苗株與野毒株抗原上相互干擾的作用。不同血清型的病毒之間不存在交叉保護(hù)作用,為確保強(qiáng)免疫抗體的有效保護(hù),必須要選擇相應(yīng)血清型的疫苗。分析相關(guān)研究綜述,今后從分子學(xué)角度探討病毒與宿主間的相互作用,探討相關(guān)致病機(jī)理,提出相應(yīng)的綜合防病措施是關(guān)鍵。
綜上所述,無(wú)論是國(guó)內(nèi)還是在國(guó)外,對(duì) “鴨呼腸孤病毒”感染的研究都得到相應(yīng)關(guān)注。今后,隨著生物科技的不斷創(chuàng)新完善,病理機(jī)制、病原學(xué)診斷、預(yù)控管理等方面的不斷深入,勢(shì)必會(huì)逐漸拋開(kāi)鴨呼腸孤病毒的神秘面紗。并能在此基礎(chǔ)上不斷優(yōu)化創(chuàng)新綜合防控措施,降低此病的易感性。