■郭本月 周 怡 劉 廣 王 磊 王魯波 劉 陽 楊 帆 魏萬權(quán)

（青島瑪斯特生物技術(shù)有限公司，山東青島266000）

脂肪是水產(chǎn)動物生長所需三大營養(yǎng)物質(zhì)之一，也是飼料中成本最高的原料之一，不僅可作為能量和必需脂肪酸的來源，而且能夠起到節(jié)約蛋白質(zhì)的作用。隨著高檔水產(chǎn)飼料的普遍應(yīng)用，水產(chǎn)動物肝臟超負荷進行著營養(yǎng)物質(zhì)的合成和體內(nèi)毒素的分解，嚴(yán)重損傷了水產(chǎn)動物的肝臟功能，影響膽汁的分泌，造成水產(chǎn)動物對油脂消化吸收的不理想；此外，在飼料中淀粉和高水平油脂的添加，導(dǎo)致能量轉(zhuǎn)換不完全，造成大量脂肪沉積在肝臟，形成脂肪肝，進一步損傷了肝臟的生理功能。研究表明，飼料中添加乳化劑在畜禽養(yǎng)殖領(lǐng)域取得了較好的應(yīng)用效果，乳化劑能夠有效地促進脂肪微粒的形成，促進腸道對脂肪的吸收。目前有關(guān)乳化劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中應(yīng)用的報道較少，為解決油脂消化利用率低和水產(chǎn)動物脂肪肝問題，本試驗在鯉魚飼料中添加復(fù)合乳化劑，研究乳化劑對鯉魚生長性能、脂肪代謝相關(guān)酶活性及血液生化指標(biāo)的影響，探討乳化劑的作用機理，為復(fù)合乳化劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

復(fù)合乳化劑主要成分為蔗糖脂肪酸酯、改性磷脂、膽汁酸及脂肪酶，由青島瑪斯特生物技術(shù)有限公司提供。試驗用鯉魚幼魚購于黃島淡水魚苗育種場，試驗前期放置于室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖水族箱（550 L）內(nèi)馴化2周，以使其適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境。馴化結(jié)束后，選用560尾初始體重為（76.55±0.95）g的鯉魚幼魚，隨機分配在16個水族箱中，每箱放35尾魚。

1.2 方法

試驗分為4組，每組設(shè)4個重復(fù)，分別投喂基礎(chǔ)飼料（對照組）和添加0.1%（T1組）、0.2%（T2組）、0.5%（T3組）復(fù)合乳化劑的飼料。所有飼料原料先經(jīng)粉碎過60目篩，混勻后制成直徑為2 mm顆粒飼料，烘干后保存于-20℃的冰柜中備用。飼料基礎(chǔ)配方和營養(yǎng)成分見表1和表2。

表1 飼料基礎(chǔ)配方（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

表2 飼料營養(yǎng)成分（%）

1.3 飼養(yǎng)管理與樣品收集

正式養(yǎng)殖試驗為期8周，于每日8：00、18：00各投喂一次，日投喂量約為魚體重的3%左右，以魚的實際需求決定投餌量；定期對水族箱進行清污處理。整個周期，水溫23.2～26.3℃，溶氧濃度大于6 mg/l，pH值7～8。生長試驗結(jié)束后，饑餓24 h，從每個水族箱隨機取6尾魚稱重并解剖。采用尾靜脈取血，離心后取上層血清于-20℃保存?zhèn)溆?；取肝臟和腸道于-20℃保存，用于測定脂肪代謝相關(guān)酶活性。

1.4 測定指標(biāo)與方法

增重率（WGR，%）=（終末體重-初始體重）/初始體重×100

飼料系數(shù)（FCR）=投喂總量/（終末體重-初始體重）

特定生長率（SGR，%/d）=[（LnWt-LnW0）/t]×100

臟體比（VSR，%）=W內(nèi)臟/WT×100

肝體比（HSI，%）=W肝臟/WT×100

肥滿度（CF，%）=WT/l3×100

式中：Wt——終末魚重量（g）；

W0——初始魚重量（g）；

WT——魚體重量（g）；

W內(nèi)臟——魚體內(nèi)臟重（g）；

W肝臟——魚體肝臟重（g）；

l——為魚體末體長（cm）；

t——試驗時間（d）。

飼料粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、水分和灰分分別采用凱氏定氮法、索氏抽提法、恒溫干燥法（105℃）和馬福爐（550℃）灼燒12 h的方法測定。肝臟和腸道脂肪酶活性采用脂肪酶試劑盒，總酯酶活性采用脂蛋白酯酶試劑盒和肝脂酶試劑盒測定，血清膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密脂蛋白采用相應(yīng)試劑盒測定，以上試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)分析采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件中的單因素方差分析（one-way ANOVA）和Tukey's多重比較，P＜0.05表示差異顯著，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（mean±SE）”表示。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)合乳化劑對鯉魚生長性能和形體指標(biāo)的影響（見表3）

表3 復(fù)合乳化劑對鯉魚生長性能和形體指標(biāo)的影響

從表3可知，與對照組相比，T1、T2組鯉魚的增重率顯著提高（P＜0.05），飼料系數(shù)顯著降低（P＜0.05）；T1組鯉魚臟體比顯著低于對照組（P＜0.05）。同時，各試驗組魚的特定生長率、肝體比和肥滿度均無顯著性差異（P＞0.05）。

2.2 復(fù)合乳化劑對鯉魚肝臟脂肪分解酶和肝腸脂肪消化酶活性的影響（見表4、表5）

表4 復(fù)合乳化劑對鯉魚肝臟和腸道脂肪酶活性的影響（U/mg prot.）

表5 復(fù)合乳化劑對鯉魚肝臟總酯酶活性的影響（U/mg prot.）

結(jié)果顯示，T1組的鯉魚肝臟和腸道脂肪酶活性顯著高于對照組（P＜0.05）；但是，T2組和T3組鯉魚的肝臟脂肪酶活性顯著低于對照組（P＜0.05）。與對照組相比，T2組顯著提高了肝臟肝脂酶活性（P＜0.05），在一定程度上提高了鯉魚肝臟總酯酶活性（P＞0.05），不同添加水平的復(fù)合乳化劑對肝臟脂蛋白酯酶活性影響均不顯著（P＞0.05）。

2.3 復(fù)合乳化劑對鯉魚血清生化指標(biāo)和肝臟甘油三酯（TG）含量的影響（見表6）

由表6可知，與對照組相比，T1、T2和T3組鯉魚血清TG含量無顯著差異（P＞0.05）；但T3組鯉魚血清甘油三酯含量顯著高于T1和T2組（P＜0.05）。T1和T3組鯉魚肝臟TG含量顯著低于對照組（P＜0.05），T2組鯉魚肝臟TG顯著高于對照組（P＜0.05）。T1、T2和T3組鯉魚血清低密度脂蛋白含量均顯著高于對照組（P＜0.05）；T1組鯉魚血清高密度脂蛋白含量顯著高于對照組（P＜0.05），T2和T3組鯉魚血清高密度脂蛋白含量與對照組無顯著差異（P＞0.05）。各試驗組魚血清總膽固醇（TC）含量均無顯著性差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 復(fù)合乳化劑對鯉魚生長性能和形體指標(biāo)的影響

研究表明，在飼料中添加磷脂或者膽汁酸能夠提高異育銀鯽、草魚、大菱鲆、黃顙魚等魚類和畜禽（如肉雞）的生長性能。王紀(jì)亭等（2009）研究表明，在建鯉飼料中添加溶血卵磷脂，能夠顯著提高建鯉的增重率、特定生長率、飼料轉(zhuǎn)化率、飼料蛋白質(zhì)沉積率等指標(biāo)。另外，在飼料中添加膽汁酸可以顯著促進異育銀鯽生長，降低飼料系數(shù)。盧素芳（2008）研究表明，在飼喂開口階段的黃顙魚仔稚魚的飼料中添加磷脂，可促進黃顙魚仔稚魚生長，提高飼料利用率，增加存活率。本試驗結(jié)果顯示，飼料中添加0.1%和0.2%的復(fù)合乳化劑對鯉魚的生長性能有顯著促進作用，并且0.1%添加水平顯著降低飼料系數(shù)和臟體比，提高了飼料利用率，與上述研究結(jié)果一致。但是，本試驗中鯉魚肝體比和肥滿度等形體指標(biāo)未產(chǎn)生顯著差異，可能是由于養(yǎng)殖周期差異導(dǎo)致的；不同試驗結(jié)果的差異說明，乳化劑對動物生產(chǎn)性能和形體指標(biāo)的影響與試驗動物種類有關(guān)，也可能與乳化劑的添加量和類型有關(guān)。

3.2 復(fù)合乳化劑對鯉魚肝臟脂肪分解酶和肝腸脂肪酶活性的影響

脂蛋白酯酶和肝脂酶是魚類肝臟中參與脂肪降解的兩種關(guān)鍵酶，合稱為總酯酶。肝脂酶作為配體，還可促進低密度脂蛋白和乳糜微粒殘粒進入肝細胞，參與高密度脂蛋白和膽固醇的逆轉(zhuǎn)運和高密度脂蛋白殘粒的分解。在本研究中，在飼料中添加0.2%復(fù)合乳化劑后，鯉魚肝臟肝脂酶活性顯著增加，總酯酶活性在一定程度上得到提升，表明肝臟脂肪分解代謝提高。鄭宗林等（2009）研究表明，飼料中添加0.2%和0.4%的乳化劑（主要成分為脂肪酸單甘油酯和蔗糖脂肪酸酯）均顯著提高了吉富羅非魚肝臟和腸道脂肪酶活性；本試驗中0.1%添加水平的復(fù)合乳化劑提高了鯉魚肝臟和腸道脂肪酶活性，與上述吉富羅非魚的研究結(jié)果相一致，表明添加復(fù)合乳化劑能提高鯉魚對飼料脂肪的分解能力，促進腸道對脂肪的吸收和提高脂肪利用率。

3.3 復(fù)合乳化劑對鯉魚血清生化指標(biāo)和肝臟TG含量的影響

血液中的甘油三酯、總膽固醇和磷脂等脂類物質(zhì)總稱為血脂，血脂水平的變化常用來反映機體脂類代謝狀況和健康水平。TG是魚類重要的能源物質(zhì)，主要參與體內(nèi)能量的產(chǎn)生與儲存，血清中TG水平較高表明肝胰臟中脂肪的分解代謝較低。本試驗結(jié)果表明，飼喂添加0.1%和0.2%復(fù)合乳化劑飼料的鯉魚血清TG含量低于對照組，0.3%添加組鯉魚血清TG含量則高于其余各組，說明適量的添加復(fù)合乳化劑可以起到降低鯉魚血清TG的作用，在一定程度上提高了鯉魚肝臟脂肪的分解代謝。

血清中低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）含量通常以其各自的膽固醇含量來表示，即低密度脂蛋白膽固醇（LDLC）和高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）。HDLC在高密度脂蛋白-受體（HDL-R）的介導(dǎo)下使細胞內(nèi)源性膽固醇合成下降，具有清除細胞內(nèi)脂肪的作用；LDL是攜帶和轉(zhuǎn)運膽固醇的主要脂蛋白，因此脂蛋白代謝失調(diào)就會影響膽固醇的正常運送和排泄，導(dǎo)致血清中膽固醇增高。本試驗中添加0.1%復(fù)合乳化劑顯著提高了鯉魚血清LDL和HDL含量，與王紀(jì)亭的研究結(jié)果相一致，說明復(fù)合乳化劑能夠影響鯉魚的膽固醇代謝。但本試驗中鯉魚血清TC含量并未受到復(fù)合乳化劑的影響。此外，飼喂添加0.2%復(fù)合乳化劑飼料的鯉魚肝臟TG含量顯著高于0.1%和0.5%添加組及對照組，這可能與鯉魚肝臟肝脂酶活性提高而影響到高密度脂蛋白的逆轉(zhuǎn)運和高密度脂蛋白殘粒的分解有關(guān)，也可能是因為血清中甘油三酯含量降低這一信號負反饋的促進肝臟甘油三酯的生成，進一步促進脂肪在肝臟和血液中的轉(zhuǎn)運，其具體機制需要進一步研究。

4 結(jié)論

飼料中添加復(fù)合乳化劑對鯉魚生長有促進作用，適量添加復(fù)合乳化劑可提高鯉魚肝臟和腸道脂肪酶活性，改善血清生化指標(biāo)，增強脂肪代謝酶活性，進而調(diào)節(jié)鯉魚肝臟和血清脂質(zhì)代謝。

（參考文獻刊略，需者可函索guoby@vlandgroup.com）