摘要：目的：研究液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）聯(lián)合高危型人乳頭瘤病毒（HPV）-DNA及端粒酶檢測在宮頸癌前病變評估中的應(yīng)用價(jià)值，病變檢測中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法：對宮頸不同病變，包括慢性宮頸炎55例，宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）162例、（CINⅡ）112例、（CINⅢ）41例，同時(shí)進(jìn)行TCT、HPV‐DNA、端粒酶的檢測，并對3項(xiàng)結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果：TCT單獨(dú)檢查CIN陽性率為64.6%，其中CINⅡ～Ⅲ診斷陽性率為77.8%；HPV‐DNA診斷CINⅡ～Ⅲ的陽性率為96.7%，高于該組TCT的陽性率（77.8%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；CIN端粒酶陽性表達(dá)率高于慢性宮頸炎（P<0.05）；3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測的靈敏度為94.0%，特異度為100.0%，陰性預(yù)測值為80.9%，陰性聯(lián)合檢測預(yù)測值明顯高于其他2項(xiàng)。結(jié)論：TCT聯(lián)合HR—HPV DNA檢測可明顯提高宮頸癌前病變的陽性檢出率，降低漏診率，是進(jìn)行宮頸病變篩查的先進(jìn)、高效方法。

關(guān)鍵詞：宮頸上皮內(nèi)瘤變；人乳頭瘤病毒液基薄層細(xì)胞學(xué)；端粒酶；宮頸癌前病變

宮頸癌是婦科高發(fā)的惡性腫瘤之一，研究通過液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）聯(lián)合人乳頭狀瘤病毒（HPV）及端粒酶檢測，討論TCT、HPV‐DNA及端粒酶檢測在宮頸癌前病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）尤其是高級別（CINⅡ～Ⅲ）防治宮頸癌的重要方法是早期診斷與早期治療。現(xiàn)報(bào)道如下：

1資料與方法

1.1一般資料

本院2012年—2014年收治的宮頸病變患者270例，年齡19～73歲，平均39歲，均為女性；根據(jù)組織學(xué)病理診斷分為慢性宮頸炎55例、（CIN1）62例、（CINⅡ）112例、（CINⅢ）41例。

1.2儀器

試劑TCT與儀器檢測使用孝感德立森電子有限責(zé)任生產(chǎn)的DCT型及配套材料HPV基因分型（23型）檢測試劑盒、HPV—DNA檢測試劑盒、亞能生物YN—H16恒溫雜交儀、珠海黑馬球醫(yī)學(xué)Hema9600聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）儀、均在亞能生物科技有限公司采購。

1.3檢測方法

TCT檢測將脫落的塑料采集器上細(xì)胞浸泡在裝有細(xì)胞保存液的小瓶中，經(jīng)DCT型液基細(xì)胞超薄制片機(jī)進(jìn)行程序化處理，制成直徑2 cm的細(xì)胞薄層，接著用95乙醇固定，經(jīng)巴氏染色法染色后晾干、封片，最后進(jìn)行經(jīng)顯微鏡鏡檢，診斷和分類標(biāo)準(zhǔn)按照陰道細(xì)胞學(xué)的分類及報(bào)告細(xì)則（TBS）診斷。主要步驟如下：常規(guī)3μm連續(xù)切片、脫蠟、水化，枸櫞酸鹽緩沖液高溫、高壓抗原修復(fù)，3%H2O2隔斷內(nèi)源性過氧化物酶，滴入一抗，冰箱過夜4℃，滴入聚合物增強(qiáng)劑，室溫下孵育20天，室，滴入酶標(biāo)抗鼠/兔聚合物，室溫下孵育30天，蘇木精復(fù)染、DAB顯色、封片。一抗作陰性對照用磷酸鹽緩沖液取代，陽性對照已知陽性切片。光鏡高倍鏡下計(jì)數(shù)細(xì)胞陽性率，表達(dá)端粒酶陽性細(xì)胞呈棕黃色顆粒，超過5%為陽性，小于5%為陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

以P<0.05為差異有顯著性，應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1不同病理類型

端粒酶檢測陽性率均隨CIN病理類型分級的增高而呈上升趨勢相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。端粒酶檢測CIN的陽性率高于慢性宮頸炎組織端粒酶陽性率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），HPV—DNA與端粒酶檢測CIN的陽性率分別為91.6%，均高于TCT的64.6%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。進(jìn)一步提高檢測CIN的靈敏度和陰性預(yù)測值，3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合測試，但特異度明顯下降（P<0.05）。

3 討論

宮頸癌是女性生殖器官常見的惡性腫瘤，發(fā)展一般過程為CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ從而發(fā)展到原位癌甚至浸潤性癌。綜上，通過TCT、HPV—DNA及端粒酶的聯(lián)合檢測對宮頸癌前期病變患者的早期診斷及病情轉(zhuǎn)歸具有一定的臨床意義。SA聯(lián)合檢測可對放化療患者感染療效的檢測和預(yù)后評估做出準(zhǔn)確的判斷；可能是由于體內(nèi)特殊的免疫機(jī)制抑制了CRP的合成，少數(shù)其他原發(fā)疾病為非感染性疾病者合并感染。原因尚有待進(jìn)一步分析。盡管SAA的敏感性均優(yōu)于其他三個(gè)指標(biāo)，然而在127例SAA和CRP結(jié)果不一致的病例中仍然出現(xiàn)有9例CRP增高。而SAA正常的情況，所占比例僅為7.09%（9/127）。對疾病類型進(jìn)行分析時(shí)發(fā)現(xiàn)，其中3例惡性腫瘤并發(fā)感染者雖然SAA正常，但NEU、WBC、和CRP均升高；1例葡萄球菌性燙傷皮膚綜合征患兒和1例多發(fā)性腦梗合并肺炎者雖然WBC、NEU和SAA均正常，但CRP卻呈高水平表達(dá)；以上患者均說明，僅靠SAA一個(gè)指標(biāo)來診斷感染是否發(fā)生也是不夠嚴(yán)謹(jǐn)?shù)模匀粦?yīng)該結(jié)合WBC、NEU和CRP來聯(lián)合檢測，防止漏診。另外3例惡性腫瘤患者，在某種程度上可以說明在臨床判斷惡性腫瘤患者是否合并感染時(shí)，SAA較CRP的特異性更高WBC均為正?；驕p低，雖然NEU、CRP均較高但經(jīng)病原學(xué)檢查證實(shí)無感染，患者未使用抗菌藥物治療而僅進(jìn)行營養(yǎng)支撐對癥治療后即明顯好轉(zhuǎn)。由此可見在臨床判斷感染是否發(fā)生時(shí)SAA可以彌補(bǔ)其他三個(gè)指標(biāo)的缺陷，其他三個(gè)指標(biāo)同樣也可以作為SAA陰性時(shí)感染存在的補(bǔ)充診斷證據(jù)。臨床上對于感染性疾病的快速診斷指標(biāo)的選擇應(yīng)該多項(xiàng)目參考，個(gè)項(xiàng)目中任何一項(xiàng)均應(yīng)結(jié)合臨床認(rèn)真做出判，斷取長補(bǔ)短，減少抗菌藥物的濫用，防誤診或止漏診[4]。

參考文獻(xiàn)：

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[4]楊麗娟.HPV多重感染、HPV16 E6/E7變異在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用[D].昆明醫(yī)科大學(xué)，2016.