■王衛(wèi)正 郅永偉 賈海軍 谷子林

（1.河北斐默特生物科技有限公司，河北石家莊052460；2.內(nèi)蒙古東達(dá)獺兔循環(huán)產(chǎn)業(yè)研究院，內(nèi)蒙古鄂爾多斯014300；3.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河北保定071001）

酵母培養(yǎng)物(yeast culture，YC)是經(jīng)酵母菌發(fā)酵的培養(yǎng)物及酵母菌的混合物，含有維生素、礦物質(zhì)、促生長(zhǎng)因子及寡糖等物質(zhì)，是集營(yíng)養(yǎng)和保健為一體的飼料添加劑[1]。酵母培養(yǎng)物對(duì)在動(dòng)物生產(chǎn)中應(yīng)用較為廣泛，大量試驗(yàn)與生產(chǎn)證明，YC可以調(diào)節(jié)奶牛瘤胃內(nèi)環(huán)境[2]，提高干物質(zhì)采食量[3]；提高斷奶仔豬體重[4]；顯著提高肉仔雞的增重，降低料肉比[5]等。但酵母培養(yǎng)物在獺兔生產(chǎn)中應(yīng)用較少，且相關(guān)的試驗(yàn)也鮮有報(bào)道。為了研究酵母培養(yǎng)物對(duì)獺兔生長(zhǎng)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀(guān)消化率及免疫機(jī)能的影響，進(jìn)行了本次試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用釀酒酵母培養(yǎng)物以豆粕、玉米、麩皮、蔗糖糖蜜為底物，采用雙菌偶聯(lián)分階段培養(yǎng)模式進(jìn)行發(fā)酵，最后經(jīng)低溫干燥而成，營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 YC營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))(%)

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及日糧組成

試驗(yàn)動(dòng)物由內(nèi)蒙古東達(dá)獺兔循環(huán)產(chǎn)業(yè)研究院提供，根據(jù)胎次、體重、斷奶日齡[（42±2）d]一致的原則，選擇192只發(fā)育正常、身體健康的獺兔，隨機(jī)分為4組，分別為對(duì)照組、試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組及試驗(yàn)Ⅲ組，每組48只（公母各半），每組48個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只獺兔。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組及試驗(yàn)Ⅲ組日糧組成中，YC分別等量替代基礎(chǔ)日糧中的豆粕與小麥麩皮，替代比例為1.0%、2.0%以及3.0%(50%豆粕+50%小麥麩皮)。YC與其他日糧原料一起粉碎，配制均勻，壓制成顆粒飼料。各組日糧組成見(jiàn)表2，基礎(chǔ)日糧營(yíng)養(yǎng)組成見(jiàn)表3。

表2 試驗(yàn)日糧配方(%)

表3 基礎(chǔ)日糧營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 試兔飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)兔進(jìn)舍前20 d，兔舍進(jìn)行打掃、消毒、通風(fēng)。所有用具定期用消毒液洗凈，清水沖洗干凈。飲水器供水，自由飲水。試驗(yàn)前3 d，在飲水中加電解多維，預(yù)防應(yīng)激。

試驗(yàn)動(dòng)物在同一兔舍單籠飼養(yǎng)，保證外界條件一致，使獺兔始終保持自由采食狀態(tài)，同時(shí)觀(guān)察試兔的健康和生長(zhǎng)狀況。試驗(yàn)兔專(zhuān)人飼養(yǎng)管理、稱(chēng)重與記錄，預(yù)飼期為7 d，正試期為42 d。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 采食量

試驗(yàn)期間獺兔的采食方式為自由采食，每周始記錄各組每個(gè)重復(fù)飼料供給量，周末記錄各重復(fù)的剩余量，兩者之差即為每個(gè)重復(fù)的總體采食量。

平均采食量(ADI)(g/d)=每個(gè)重復(fù)總體采食量/每重復(fù)只數(shù)/試驗(yàn)天數(shù)

1.4.2 體重

于正試期的第1、42 d早上空腹分別測(cè)定每組每只獺兔的體重。

平均日增重(ADG)(g/d)=（試驗(yàn)后獺兔重量-試驗(yàn)前獺兔重量）/試驗(yàn)天數(shù)

1.4.3 料重比

料重比(F/G)=試驗(yàn)期間每重復(fù)采食量/試驗(yàn)期間每重復(fù)增重

1.4.4 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀(guān)消化率

試驗(yàn)第39、40 d以及41 d采集各組日糧以及糞便，當(dāng)天采集完后冷凍保存。日糧樣品采集：飼喂日糧做出后分點(diǎn)采集飼料樣，標(biāo)號(hào)冷凍保存；糞便樣品采集：每只兔子每天采集50 g糞樣，每天每一個(gè)重復(fù)進(jìn)行混合，按每100 g糞樣加入10 ml 10%的硫酸固氮，冷凍保存。樣品采集3 d結(jié)束后將每個(gè)重復(fù)每天的糞樣進(jìn)行干燥等量混合，冷凍保存待測(cè)。采用內(nèi)源指示劑法測(cè)定日糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀(guān)消化率。飼料中某養(yǎng)分的表觀(guān)消化率（%）=100%-(飼料中酸性不溶灰分含量/糞中酸性不溶灰分含量*糞中某養(yǎng)分含量/飼料中某養(yǎng)分含量)×100。測(cè)定日糧樣品及糞便樣品中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、鈣、磷、NDF和ADF的含量，測(cè)定方法參照張麗英(2003)的方法。酸不溶灰分(AIA)的測(cè)定方法：稱(chēng)取全干樣品或風(fēng)干樣品8～10 g置300 ml安裝有回流冷凝管的大三角瓶中，加4 mo1/l鹽酸100 ml，加熱至輕微沸騰30 min，然后迅速過(guò)濾、用熱蒸餾水沖洗殘?jiān)翢o(wú)酸性，再將殘?jiān)B同濾紙移入已知重量的增鍋中，于650℃茂福爐中灰化6 h，在干燥器中冷卻后稱(chēng)重?？傊販p去已知增鍋的重量即為酸不溶灰分的重量。

1.5 血清免疫指標(biāo)

于正試期第42 d清晨每組隨機(jī)抽取6只試驗(yàn)兔，立即心臟采血10 ml，37℃水浴40 min后，3 000 r/min離心15 min，分離所得血清分裝于Eppendorf管中，置于-20℃冷凍保存，采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白M(IgM)的含量，使用儀器為華東電子DG5033A酶標(biāo)儀（南京華東電子集團(tuán)醫(yī)療裝備有限責(zé)任公司），試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，嚴(yán)格按照試劑盒的說(shuō)明進(jìn)行操作。

1.6 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)結(jié)果用Excel 2007進(jìn)行預(yù)處理，用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析和LSD多重比較法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

表4 酵母培養(yǎng)物對(duì)獺兔生長(zhǎng)性能的影響

2 結(jié)果

2.1 酵母培養(yǎng)物對(duì)獺兔生長(zhǎng)性能的影響

由表4可知，在初始體重?zé)o顯著差異的情況下(P＞0.05)，日糧中添加2%酵母培養(yǎng)物可顯著提高獺兔平均日增重(P＜0.05)，而1%與3%水平與對(duì)照組相比差異不顯著(P＞0.05)；日糧中添加3%酵母培養(yǎng)物可顯著提高獺兔平均日采食量(P＜0.05)，而1%與2%水平與對(duì)照組相比差異不顯著(P＞0.05)；日糧中添加2%酵母培養(yǎng)物可極顯著降低獺兔料重比(P＜0.01)，3%水平可顯著降低料重比(P＜0.05)，而1%水平與對(duì)照組相比差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 酵母培養(yǎng)物對(duì)日糧養(yǎng)分表觀(guān)消化率的影響

表5 酵母培養(yǎng)物對(duì)日糧養(yǎng)分表觀(guān)消化率的影響(%)

由表5可知，日糧中添加不同比例釀酒酵母培養(yǎng)物在不同程度上均能提高日糧養(yǎng)分的表觀(guān)消化率。日糧中添加2%釀酒酵母培養(yǎng)物可提高日糧養(yǎng)分的表觀(guān)消化率（P＞0.05）；日糧中添加2%釀酒酵母培養(yǎng)物可顯著提高粗蛋白表觀(guān)消化率5.64%（P＜0.01），干物質(zhì)及粗纖維的表觀(guān)消化率分別顯著提高3.51%、7.17%（P＜0.05）；日糧中添加3%釀酒酵母培養(yǎng)物可以顯著提高鈣的表觀(guān)消化率4.13%（P＜0.05）。

2.3 酵母培養(yǎng)物對(duì)獺兔免疫力的影響

由表6可以看出，日糧中添加酵母培養(yǎng)物可以影響獺兔血清中IgA、IgG與IgM含量，酵母培養(yǎng)物添加量為2%時(shí)，較對(duì)照組、添加1.0%組可顯著提高IgA的含量(P＜0.05)，與3.0%組相比水平差異不顯著(P＞0.05)；日糧中添加3.0%酵母培養(yǎng)物較對(duì)照組可顯著提高IgG的含量(P＜0.05)，與添加1.0%與2.0%酵母培養(yǎng)物差異不顯著（P＞0.05）；日糧中添加2.0%酵母培養(yǎng)物可以顯著提高IgM的含量(P＜0.05)，與添加1.0%與3.0%差異不顯著(P＞0.05)。

3 討論

3.1 酵母培養(yǎng)物對(duì)獺兔生產(chǎn)性能及表觀(guān)消化率的影響

酵母培養(yǎng)物（Yeast culture，YC）作為一種微生態(tài)制劑，是由酵母菌，主要是釀酒酵母，在特定的工藝條件下，采用液相與固相，好氧與厭氧相結(jié)合的發(fā)酵形式，使酵母菌充分厭氧發(fā)酵后連同培養(yǎng)基干燥后形成的一種產(chǎn)品[6]。大量試驗(yàn)證明，獺兔和豬一樣，在斷奶時(shí)消化系統(tǒng)與腸道微生物群落發(fā)育不健全，需斷奶7～10 d后才會(huì)建立適應(yīng)飼料消化的正常微生物群落[7]，所以在家兔早期斷奶后添加酵母培養(yǎng)物可以幫助機(jī)體快速形成微生物菌落促進(jìn)消化生長(zhǎng)。Mathew等[8]報(bào)道，酵母培養(yǎng)物可提高斷奶仔豬的采食量，仔豬生長(zhǎng)速度加快，進(jìn)而提高生產(chǎn)性能；江紹安[9]研究表明酵母培養(yǎng)物能改善飼料的適口性，對(duì)乳、仔豬的采食量、平均日增重及飼料利用率也有提高作用。Peet-Schwering等[10]報(bào)道，仔豬日糧中添加酵母培養(yǎng)物顯著地降低料重比，對(duì)平均日增重有升高的趨勢(shì)，但對(duì)日采食量沒(méi)有影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在初始體重?zé)o差異的情況下，日糧中添加不同水平的酵母培養(yǎng)物對(duì)獺兔的生產(chǎn)性能影響很大，日糧中添加2.0%的試驗(yàn)Ⅱ組表現(xiàn)出來(lái)的效果最明顯，平均日增重較對(duì)照組提高了 12.73%(P＜0.05)，料重比降低了 8.76%(P＜0.01)，粗蛋白、干物質(zhì)以及粗纖維的表觀(guān)消化率亦有所提高，與上述關(guān)于仔豬的報(bào)道一致。酵母培養(yǎng)物富含氨基酸、有機(jī)酸、活性小肽、甘露寡糖、β-葡聚糖、酶、未知生長(zhǎng)因子，生產(chǎn)性能的提高可能是酵母培養(yǎng)物進(jìn)入胃腸道后刺激獺兔腸道發(fā)育，快速的建立腸道微生物平衡，減少斷奶對(duì)獺兔帶來(lái)的應(yīng)激。獺兔盲腸發(fā)達(dá)，微生物豐富，其對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化、吸收及疾病防控都具重要作用，消化率的提高可能與盲腸有很大的關(guān)系，酵母培養(yǎng)物可刺激盲腸中兼性微生物利用氧氣，使盲腸完全處于厭氧狀態(tài)，同時(shí)酵母培養(yǎng)物豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)又為盲腸中的微生物提高營(yíng)養(yǎng)，刺激微生物生長(zhǎng)，加快新陳代謝速度，從而提高了飼料的消化利用率。

3.2 酵母培養(yǎng)物對(duì)獺兔免疫能力的影響

淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的免疫球蛋白在體液免疫過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用，其在血清中的含量可以直接反映機(jī)體體液免疫狀態(tài)。張愛(ài)忠等[11]在絨山羊的日糧中添加酵母培養(yǎng)物，顯著增加了絨山羊血清IgA含量(P＜0.05),并提高血清IgG含量(P＞0.05)。王連江等[12]給犢牛飼喂30 g/d酵母培養(yǎng)物，在第10、20、30 d后，試驗(yàn)組血漿內(nèi)毒素平均含量分別降低了0.32(P＜0.01)、0.5(P＜0.05)、0.25(P＜0.01)EU/ml，顯著低于對(duì)照組。郭伶等[13]在肉雞上也有類(lèi)似的報(bào)道。Franklin等[14]在奶牛干奶期間飼喂甘露寡糖，增加了牛輪狀病毒免疫應(yīng)答，并把這種抗體傳送給了犢牛。β-1，3/1，6-葡聚糖在水產(chǎn)動(dòng)物[15]、豬[16]、禽類(lèi)[17]上的應(yīng)用表現(xiàn)出明顯的免疫調(diào)節(jié)作用。酵母培養(yǎng)物中含有豐富的細(xì)胞壁免疫多糖（甘露寡糖與β-葡聚糖），酵母培養(yǎng)物中的甘露寡糖作為抗原活性物質(zhì)，在一定程度上可以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫，通過(guò)與病原菌的初級(jí)代謝產(chǎn)物作用，競(jìng)爭(zhēng)性抑制其在腸道內(nèi)活動(dòng)，降低病原性微生物在胃腸黏膜表面的附著能力[18]。β-（1,3）-葡聚糖可以活化多種免疫細(xì)胞，提高抗體與白細(xì)胞素的含量，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[19]。酵母細(xì)胞壁免疫多糖還可以在轉(zhuǎn)錄水平上提高一氧化碳合成酶（INOS）的合成，INOS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生大量的均有廣泛生物活性的細(xì)胞信號(hào)分子（一氧化碳）來(lái)調(diào)控T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的細(xì)胞因子的分泌，提高巨噬細(xì)胞殺滅微生物的能力。本試驗(yàn)添加酵母培養(yǎng)物后，提高了獺兔機(jī)體的免疫力，可能與酵母細(xì)胞壁免疫多糖有關(guān)。

4 結(jié)論

日糧中添加酵母培養(yǎng)物可以提高獺兔的生長(zhǎng)性能，改善日糧養(yǎng)分的表觀(guān)消化率，增強(qiáng)免疫力，在本試驗(yàn)條件下日糧中添加酵母培養(yǎng)物2.0%效果最好。