吳睿智,李培培,邢江盼,王曉丹,宮新城

（河北農(nóng)業(yè)大學中獸醫(yī)學院,河北 保定 071001）

家兔夏季繁殖性能低下,被誤認為是一種正常的生理習性,現(xiàn)在研究發(fā)現(xiàn),造成這種情況的原因主要是夏季氣溫升高導致的公兔精液品質降低。使用激素類藥物可以短時間內改善家兔性欲,但對于精子的產(chǎn)生、成熟效果不大。中藥飼料添加劑無有害殘留、耐藥性小、毒副作用小等天然優(yōu)點,利用中藥飼料添加劑生態(tài)養(yǎng)兔具有較高的經(jīng)濟效益和發(fā)展前景。為改善夏季公兔繁殖能力低下的情況,試驗選用滋陰助陽、健脾消暑的中藥組成方劑“消暑促精散”,加入兔日糧中,研究其對公兔精液品質及睪丸、附睪的影響。

1 材料與方法

1.1 藥品 五味子、菟絲子、枸杞子、車前子、覆盆子、黨參、黃芩、淫羊藿、白術、廣藿香,購自河北省萬國藥房,粉碎備用。

1.2 試驗器材 細胞計數(shù)儀（alit001艾利特國際貿(mào)易有限公司）。獸用血細胞分析儀（KT6280,南京普朗醫(yī)療設備有限公司）。自制假陰道采精器。1 mL注射器、蓋玻片、載玻片、擦鏡紙等從保定試劑公司購買。

1.3 實驗動物分組飼養(yǎng) 新西蘭成年種公兔24只、母兔5只,體重約3.0 kg,購自河北農(nóng)業(yè)大學兔場,全價飼料飼養(yǎng)5 d后,將公兔隨機分為對照組和試驗組,每組12只。試驗組每天飼喂中藥4.4 g/只,全價飼料正常飼喂;對照組及母兔飼喂全價飼料。

1.4 消暑促精散對公兔繁殖能力的影響 公兔每3 d采精1次,并觀察記錄爬跨情況、檢測精液品質;試驗第30天測量體溫。試驗35天剖殺所有公兔,取睪丸、附睪制備切片鏡檢。

2 結果

2.1 氣溫記錄 夏季氣候炎熱,試驗時間為7月31日至9月3日。試期間最高氣溫為8月3日,34℃,每日最高溫度平均為30℃。

2.2 公兔爬跨情況 夏季氣溫升高,公兔性欲下降,使用“消暑促精散”后,各組公兔每3 d觀察并記錄1次爬跨情況。如表1所示,試驗組有爬跨行為的公兔數(shù)量明顯升高,為（8.46±1.16）只/d,與對照組相比差異顯著（P＜0.05）。

2.3 公兔采精量情況 試驗開始后,每3 d采精1次,并記錄采精量。如表2所示,試驗組公兔采精量為0.79±0.16 mL,與對照組相比差異顯著（P＜0.05）。

表1 消暑促精散對公兔爬跨行為的影響

表2 采精量變化

2.4 各組公兔精液品質情況 采精后,測定各組精子總數(shù)、精子密度、存活率和畸形率。如表3所示,試驗組公兔精子總數(shù)升高為（1 858.31±461.25）個/20 uL,精子密度升高為（2.0581±0.42）107/mL,精子畸形率降為（29.12±0.0784）%,與對照組相比差異顯著（P＜0.05）。給藥組精子存活率上升,為（27.78±0.0411）%,與對照組并無顯著差異。

表3 公兔精液品質情況

2.5 各組公兔體溫情況 在試驗第30天測定兩組公兔的體溫情況,如表4所示,結果顯示試驗組公兔體溫為（38.24±0.39）℃,與對照組無顯著差異。由此可知,消暑促精散不會對公兔體溫產(chǎn)生較大影響。

表4 公兔體溫變化

2.6 公兔睪丸組織切片 睪丸是精子的生成部位。曲精小管內含有不同發(fā)育階段的生精細胞和支持細胞等。給藥組使用消暑促精散后,睪丸組織與對照組發(fā)生變化。如中插彩版圖1所示,給藥組睪丸縱隔結構清晰,曲細精管間質排列緊密,基膜與管壁完整,管腔中可見游離的精子。而對照組曲細精管管腔擴張,生精細胞分布較疏松,管腔內游離精子量少于給藥組。

2.7 公兔附睪組織切片 睪丸生成的精子儲存在附睪中,由附睪組織切片可見,給藥組附睪管腔內胞質飽滿,精子較多,偶見生精細胞。對照組附睪主細胞胞質疏松明顯,胞內空泡化程度較大,附睪管腔內精子明顯少于給藥組。在40×物鏡下觀察,見中插彩版圖2。利用ImageJ軟件,計算得給藥組儲精面積為（40 464.78 ±362.49）μm,而對照組中儲精面積為（4 627.07 ±413.29）μm,差異顯著（P ＜0.05）。

3 討論

研究表明,夏季高溫會影響公兔的精液品質,使精液量減少,精子密度降低,精子畸形率增加[1],但是到目前為止,可以解決這一問題的中藥飼料添加劑仍有待開發(fā)。為提高夏季公兔繁殖能力,本試驗采用中藥飼料添加劑“消暑促精散”,以補腎益精的古方“五子衍宗丸”（由五味子、菟絲子、枸杞子、車前子、覆盆子組成）為基礎,添加黨參、白術、淫羊藿、廣藿香、黃芩,共計10味藥材。其中黨參可補氣養(yǎng)血;白術健脾;淫羊藿可補腎陽,強筋骨;廣藿香可芳香化濕,和中解暑;黃芩可清熱燥濕,使用“消暑促精散”可對公兔夏季繁殖能力產(chǎn)生促進作用。試驗結果顯示,試驗組公兔爬跨行為明顯增強,采精量明顯增高,公兔精液品質上升,公兔體溫維持正常水平,睪丸生精能力增強,附睪儲精面積增大,由此可見,中藥飼料添加劑“消暑促精散”確實可以對公兔夏季繁殖能力產(chǎn)生促進作用。

研究“五子衍宗丸”對公兔夏季繁殖能力的試驗[2]中,藥物確實可以提高公兔繁殖能力,但給藥的公兔體溫普遍升高。而此次試驗中,使用“消暑促精散”的公兔體溫正常,且繁殖能力增強。公兔體溫的維持可能與組方中含有的黃芩和廣藿香有關,黃芩有清熱燥濕的功效,黃芩苷可通過抵抗睪丸支持細胞熱應激、調控睪丸支持細胞分泌產(chǎn)物水平,改善睪丸支持細胞功能,進而改善生精功能[3]。廣藿香祛濕解暑,可有效抵抗夏季高溫對公兔生殖發(fā)育的影響,有研究表明,廣藿香通過增強血清超氧化物歧化酶活性,降低肌酸激酶活性,從而保護家兔免受熱應激造成的氧化損傷,以抵抗夏季高溫[4]。因此,“消暑促精散”中所含的黃芩、廣藿香兩味藥,可有效消暑降溫,此方劑可有效提高公兔夏季繁殖能力。

弓素梅[5]等研究表明,中藥飼料添加劑可以實現(xiàn)動物性食品安全生產(chǎn),提高養(yǎng)殖效率,對畜牧業(yè)發(fā)展有深遠意義?！跋畲倬ⅰ痹谖逦蹲印⑤私z子、枸杞子、車前子、覆盆子補腎益精的基礎上,加淫羊藿以助腎陽,加黨參、白術健脾,以后天補益先天,加黃芩、廣藿香防治夏季高溫,可有效提高公兔夏季繁殖能力,并維持公兔正常體溫。將“消暑促精散”在兔業(yè)養(yǎng)殖中推廣,預計將有較好的經(jīng)濟效益和發(fā)展前景。