羅國安，王義明，范雪梅，謝媛媛

（清華大學(xué)/教育部中醫(yī)藥現(xiàn)代化網(wǎng)上合作研究中心 北京 100084）

1 前言

1.1 中醫(yī)藥現(xiàn)代化簡要回顧

大健康產(chǎn)業(yè)。中醫(yī)藥研究在臨床和基礎(chǔ)研究領(lǐng)域取得了飛躍發(fā)展，國際影響日益擴(kuò)大。

1996 年科技部會同國家中醫(yī)藥管理局等部門提出了中藥現(xiàn)代化發(fā)展的整體戰(zhàn)略構(gòu)想[1]，1997年啟動了中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)行動，1998年中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)基地建設(shè)啟動，出臺了《中藥現(xiàn)代化發(fā)展綱要》、《中醫(yī)藥創(chuàng)新發(fā)展規(guī)劃綱要》等指引性文件。1999年由王永炎院士領(lǐng)銜的“中藥方劑的關(guān)鍵科學(xué)問題基礎(chǔ)研究”獲得國內(nèi)科技界的一致贊同，成為第一個中藥973項目。20余年來中藥工業(yè)產(chǎn)值占據(jù)我國生物醫(yī)藥工業(yè)總產(chǎn)值的1/3，帶動形成了超過萬億元規(guī)模的中藥

1.2 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)快速發(fā)展

現(xiàn)代醫(yī)藥在經(jīng)歷了反思、自我否定之后，提出了轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)、精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)、個體化治療、谷歌公司的“醫(yī)學(xué)大腦”在AI方面獲得長足進(jìn)步等一系列創(chuàng)新發(fā)展，正面臨取得重大突破的前夜[2]。

1.3 二種傾向

中醫(yī)藥現(xiàn)代化發(fā)展20余年了，在取得重大進(jìn)展之際，出現(xiàn)了二種傾向。一種是否定中醫(yī)藥現(xiàn)代化取得的成績，質(zhì)疑中醫(yī)藥現(xiàn)代化是全盤西化；另一種是魚龍混雜，泥砂俱下，不講科學(xué)，打著中醫(yī)藥旗號，包治百病的神醫(yī)、神藥不斷出現(xiàn)，令人擔(dān)憂。質(zhì)疑中醫(yī)藥浪潮時起彼伏。中醫(yī)藥發(fā)展出現(xiàn)了種種邊緣化現(xiàn)象：如中藥注射劑在二級甲等以下級別的醫(yī)院中不可使用，而三級甲等醫(yī)院不用，導(dǎo)致中藥注射劑銷售大幅下降；中成藥在疾病診治方案中不作為主治藥物，只是輔助治療用藥；在大健康、治未病的說法下，弱化中藥作為治療藥物的作用，下降到保健品地位；人工智能的“中醫(yī)大腦”、“中藥大腦”無人探索，等等。如此場景，不禁令人發(fā)問：中醫(yī)藥往何處去，中醫(yī)藥現(xiàn)代化之路朝向何方？!我們的回答是：中醫(yī)藥亟需拓展國際視野，提升科學(xué)高度，與時俱進(jìn)，不忘初心，為實現(xiàn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化再出發(fā)，踏上新征程，奔向新目標(biāo)！

1.4 應(yīng)對措施

產(chǎn)生目前狀況的原因在于：缺乏明確的戰(zhàn)略目標(biāo)，只強(qiáng)調(diào)中醫(yī)藥現(xiàn)代化是個過程；缺乏全球視野，滿足于自我欣賞；缺乏自我否定、革命性創(chuàng)新意識，滿足于追風(fēng)跟蹤。針對不利于中醫(yī)藥事業(yè)發(fā)展的傾向，筆者認(rèn)為①堅持中醫(yī)藥現(xiàn)代化之路不動搖；②要有更多的創(chuàng)新，更多融合中醫(yī)藥，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，生命科學(xué)新進(jìn)展；③要有全球視野，走出自己的路，實現(xiàn)四個創(chuàng)新：理論（觀念）創(chuàng)新，方法（體系）創(chuàng)新，技術(shù)創(chuàng)新和集成創(chuàng)新[3]。

習(xí)主席在2018年兩院院士大會講話中指出：“我們堅持走中國特色自主創(chuàng)新道路，堅持創(chuàng)新是第一動力，堅持抓創(chuàng)新就是抓發(fā)展，謀創(chuàng)新就是謀未來”。面對中醫(yī)藥往何處去的方向問題，我們應(yīng)該旗幟鮮明地認(rèn)識到傳承中醫(yī)藥是責(zé)任，堅持創(chuàng)新是我們時代的使命。

本文試圖從整體系統(tǒng)醫(yī)學(xué)（新醫(yī)藥學(xué)，Holistic Sys?tems Medicine,HSM）理念[2-6]出發(fā)，從藥學(xué)（新藥）研發(fā)角度，探討能實現(xiàn)醫(yī)藥融合，臨床和實驗室研究融合，適用于復(fù)方新藥（中藥復(fù)方、西藥復(fù)方乃至中西藥復(fù)方）的研發(fā)策略、途徑和實踐。

2 幾點思考

2.1 新藥研發(fā)重點將從新化學(xué)實體（NCE）轉(zhuǎn)向復(fù)方新藥

新藥研發(fā)是一個耗時、耗資都非常龐大的系統(tǒng)工程，主要包括實驗室開發(fā)（候選藥物研發(fā)和臨床前研究）、申報臨床、臨床試驗、申報生產(chǎn)、上市等。目前創(chuàng)新藥物在國際上是指含有新化學(xué)實體（NCE）的藥物。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的高速發(fā)展，人類疾病譜和醫(yī)療模式發(fā)生重大變革，發(fā)生率高和危害重大的疾病已由感染性的單因素性疾病，轉(zhuǎn)向機(jī)體自身代謝和調(diào)控失常為主要譜群的慢性、復(fù)雜、多因素性疾病，如心腦血管疾病、神經(jīng)退行性疾病、惡性腫瘤、免疫性疾病和代謝性疾病等。以單靶點直接對抗治療為代表的西方醫(yī)學(xué)思想在處理感染性等單因素性疾病方面取得了成功，但在面對慢性、復(fù)雜性、多因素性疾病時卻苦無良策。目前，治療理念的變革（如免疫治療等），臨床聯(lián)合用藥的實踐及美國FDA批準(zhǔn)越來越多的復(fù)方西藥，是啟示性標(biāo)志。以NCE為重點的新藥研發(fā)將逐步轉(zhuǎn)變?yōu)閺?fù)方新藥的新藥研發(fā)模式，這是一個新趨勢。目前存在的問題，在于新藥復(fù)方新藥的研發(fā)策略和途徑仍然遵循NCE的“靶點確定-模型建立-先導(dǎo)化合物發(fā)現(xiàn)-先導(dǎo)化合物優(yōu)化”的新藥研發(fā)模式。不同之處在于多是針對疾病發(fā)生發(fā)展過程中幾個關(guān)鍵靶點的藥物的簡單組合，從機(jī)理上看是1+1≥2。然而，復(fù)雜疾病的發(fā)生發(fā)展涉及到多個病理環(huán)節(jié)，這種針對一個或多個靶點的藥物組合缺乏整體觀指導(dǎo)，難于做到多種治療理念（如標(biāo)本兼治等）的整體系統(tǒng)研發(fā)。中藥復(fù)方新藥基于中醫(yī)藥傳統(tǒng)寶庫，得到了快速發(fā)展（如組分中藥等[7]），但仍存在缺乏整體觀、系統(tǒng)論指導(dǎo)下的“兩個基本講清”（基本講清藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，基本講清藥效及作用機(jī)理[8-10]）的現(xiàn)代科學(xué)數(shù)據(jù)支撐。

2.2 NCE新藥研發(fā)模式的缺陷

新藥研發(fā)中候選藥物的確定是新藥研發(fā)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，候選藥物的合理性一定程度上決定了新藥研發(fā)的成敗。目前NCE新藥研發(fā)以西方醫(yī)學(xué)思想為指導(dǎo)，“靶點確定-模型建立-先導(dǎo)化合物發(fā)現(xiàn)-先導(dǎo)化合物優(yōu)化”的模式存在明顯的缺陷。由于倫理、醫(yī)藥分工、簡化復(fù)雜研究難度及技術(shù)上時代局限等原因，NCE新藥研發(fā)模式作了2個重要的簡化替代：用動物模型等取代了臨床病人；用靶點（或組合）取代了疾病。由此必然給藥物的有效性和安全性帶來重大的不確定性。目前大量臨床用的藥物都是NCE研發(fā)的成功范例，但背后隱藏的是巨大的失敗率和高額的研發(fā)成本。

2.3 從動物模型出發(fā)的新藥研發(fā)的局限性

用動物模型（包括細(xì)胞模型等其它生物模型）來模擬病人是一種不得已的簡化、替代辦法，其缺陷在于：多種治療理念（如標(biāo)本兼治、祛邪扶正、異病同治等）無法體現(xiàn)；病人的心理、情感、飲食及環(huán)境等因素?zé)o法表征等等。其本質(zhì)在于將醫(yī)生和藥學(xué)家的分工合作變成了藥學(xué)家的單一研究。中醫(yī)藥傳統(tǒng)體現(xiàn)了醫(yī)藥不分家的理念，但現(xiàn)在因藥學(xué)研發(fā)的復(fù)雜性使之有所降低。西醫(yī)藥分家由來已久，但何大一的雞尾酒療法成功研發(fā)為復(fù)方新藥，開辟了由醫(yī)生臨床聯(lián)合用藥研發(fā)復(fù)方新藥的新途徑。我們提出了臨床系統(tǒng)生物學(xué)[11]途徑探索實現(xiàn)醫(yī)藥融合，以臨床病例為出發(fā)點研發(fā)新藥。

2.4 從靶點出發(fā)的新藥研發(fā)的局限性

從靶點出發(fā)的新藥研發(fā)取得了極大的成功，今后乃至相當(dāng)長時間內(nèi)仍是新藥研發(fā)的主要途徑，其原因在于簡單明了，抓住了疾病的關(guān)鍵，提供并建立了一整套完善、可操作、可復(fù)制的技術(shù)和方法體系。針對單因素性疾病，確定明確的靶點，采用高通量篩選，篩選出候選藥物，進(jìn)行進(jìn)一步藥效、藥理及臨床研究，形成了一種慣性思維，這是一種“點-點”（1個小分子化合物針對1個靶點）的模式。但對于慢性、復(fù)雜、多因素性疾病，“點-點”模式就有很大局限性，無法表征疾病的全面性，階段性及其本質(zhì)。筆者深感“點-點”模式（Point to Point，P2P）不足以描述表征中醫(yī)藥的深刻科學(xué)內(nèi)涵，也無法推動中醫(yī)藥現(xiàn)代化和創(chuàng)新使命，在本世紀(jì)初出現(xiàn)的系統(tǒng)生物學(xué)理念啟迪下，于2006年初提出了用化學(xué)物質(zhì)組學(xué)（Chemomics）來表征中藥復(fù)雜體系，用整合化學(xué)物質(zhì)組學(xué)的整體系統(tǒng)生物學(xué)（Chemo?mics-integrated global systems biology）來闡述外部干預(yù)系統(tǒng)（中藥復(fù)方系統(tǒng)）與生物應(yīng)答系統(tǒng)（人體復(fù)雜系統(tǒng)）之間“系統(tǒng)-系統(tǒng)”模式（System to System,S2S）的相互作用[10,12]。從P2P到S2S是1個根本的轉(zhuǎn)變，“系統(tǒng)-系統(tǒng)”的新藥研發(fā)模式將對疾?。ò▉喗】档龋┘爸委煛⒅嗅t(yī)的證、方等都會有新的認(rèn)識，發(fā)現(xiàn)新的策略和途徑。

2.5 ?。ㄎ麽t(yī)）和證（中醫(yī)）都是有同一的生物學(xué)意義

自從系統(tǒng)生物學(xué)提出以來[13,14]，人體復(fù)雜系統(tǒng)的生物應(yīng)答可歸納為基因、蛋白質(zhì)、代謝物3個基礎(chǔ)層面正在逐步成為共識。中醫(yī)和西醫(yī)從不同理念和體系，用不同的表征方法來體現(xiàn)對人的疾病的認(rèn)識和治療，但對同一病人的中西醫(yī)不同表征，在物質(zhì)基礎(chǔ)（基因、蛋白質(zhì)、代謝物3個基本層面）上是有可能找到同一的生物學(xué)意義。新醫(yī)藥學(xué)是有可能在同一物質(zhì)基礎(chǔ)3個層面上實現(xiàn)結(jié)合，整合，融合而發(fā)展。在復(fù)方新藥研發(fā)上則會產(chǎn)生基于臨床出發(fā)，同一理念推動研究策略和途徑的中藥復(fù)方新藥、西藥復(fù)方新藥和中西藥復(fù)方新藥[15,16]。

現(xiàn)在習(xí)慣上所講的中藥復(fù)方作用是多成分、多靶點的說法，實際上體現(xiàn)了從西藥靶點出發(fā)，缺乏中醫(yī)藥整體觀、系統(tǒng)論的理念。中醫(yī)藥整體觀、系統(tǒng)論精髓指導(dǎo)下，應(yīng)是有君臣佐使之分的藥材組分和成分逐步遞進(jìn)的復(fù)方，針對的有主次之分的靶點和通路的系統(tǒng)作用。常用多組學(xué)來描述也有不妥?，F(xiàn)在有100多種組學(xué)，但其生物學(xué)意義根本上是3大類組學(xué)（基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)），用系統(tǒng)生物學(xué)或整體系統(tǒng)生物學(xué)能克服碎片化，體現(xiàn)了整體觀和系統(tǒng)論理念。筆者所提出的整體系統(tǒng)生物學(xué)（Global Systems Biolo?gy）[17-19]作了有益的探索。

2.6 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的優(yōu)缺點

2007年10 月提出的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)[20]在復(fù)方藥物研發(fā)中得到了廣泛的應(yīng)用，它是用單成分藥物作為擾動（點），采用系統(tǒng)生物學(xué)描述其活性，即P2S模式（Point to System,P2S）。通常用來預(yù)測推斷小分子和基因、蛋白質(zhì)、代謝物等靶點和網(wǎng)絡(luò)的相關(guān)性，取得了有益的結(jié)果。如李梢等提出了網(wǎng)絡(luò)靶標(biāo)（network target）[21]；王忠等提出了模塊藥理學(xué)（Modular Pharmacology）等[22]。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是一種有益、必要的技術(shù)，適宜作預(yù)測、推斷等輔助作用，不宜夸大所起作用。因為①網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的依據(jù)是各種數(shù)據(jù)庫，數(shù)據(jù)庫中各數(shù)據(jù)可靠性不同，部分?jǐn)?shù)據(jù)準(zhǔn)確性有待證實，對預(yù)測結(jié)果有極大影響。真實結(jié)果須在網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測結(jié)果基礎(chǔ)上進(jìn)行驗證，再結(jié)合其它來源實驗研究結(jié)果予以修訂、補(bǔ)充、完善而得。②網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是從統(tǒng)計學(xué)和生物信息學(xué)角度出發(fā)，預(yù)測工具有很多不同算法，各算法出發(fā)點不同，采用方法不同導(dǎo)致所得結(jié)論各不相同，須經(jīng)實驗驗證。③數(shù)據(jù)庫實驗數(shù)據(jù)來源于1個小分子藥物對整個網(wǎng)絡(luò)（基因網(wǎng)絡(luò)、蛋白質(zhì)作用網(wǎng)絡(luò)、代謝途徑網(wǎng)絡(luò)等）的作用（P2S），未考慮多個化合物（復(fù)方藥物）對整個網(wǎng)絡(luò)的同時作用（S2S），即未考慮藥物之間的相互作用及和整體網(wǎng)絡(luò)的相關(guān)性。④更扎實的途徑是從臨床病例的整體網(wǎng)絡(luò)（基因、蛋白質(zhì)和代謝物等）出發(fā)，從疾病的癥狀、影像、生化指標(biāo)和整體網(wǎng)絡(luò)出發(fā)，結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)手段進(jìn)行整體研究。⑤大數(shù)據(jù)、云計算等將為從臨床出發(fā)的整體網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)（Holistic Network Pharmacol?ogy）提供更多手段和更好前景。⑥期盼定量網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)（Quantitative Network Pharmacology）和毒性（副作用）網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)（Toxicity Network Pharmacology）的出現(xiàn)和研究。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是復(fù)方新藥研發(fā)必須且重要的技術(shù)之一，須明確其優(yōu)缺點，才能克服短處，更好應(yīng)用這一工具來發(fā)展復(fù)方新藥。

2.7 復(fù)方藥物的定義和特點

基于“系統(tǒng)-系統(tǒng)”（S2S）模式的復(fù)方藥物[15,16]定義如下：復(fù)方藥物是指為了實現(xiàn)整體最佳（而不是單靶點最佳）的療效目標(biāo)，綜合多種治療原則和多種作用機(jī)理導(dǎo)向下所開發(fā)的由多個化合物或化合物群配伍組成的治療藥物。復(fù)方藥物一般具有以下特點：①復(fù)方藥物是由多個成分（化合物）或多個組分（化合物類）所組成的化合物群；②組成復(fù)方藥物的多個成分（或多個組分）具有一定的配伍和配比關(guān)系；③復(fù)方藥物往往包含多種治療原則和多種作用機(jī)理達(dá)到整體療效最佳；④復(fù)方藥物必須能夠體現(xiàn)復(fù)合組方的必要性，即必須體現(xiàn)多成分（或多組分）配伍之后增效或減毒方面的綜合優(yōu)勢；⑤復(fù)方藥物的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)能保證藥物質(zhì)量的穩(wěn)定和均一。在此原則下既可以開發(fā)中藥復(fù)方藥物，也可以開發(fā)西藥復(fù)方藥物和中西藥結(jié)合的復(fù)方藥物[15]。

復(fù)方藥物研發(fā)創(chuàng)新體系的特點為：①治療的對象是生病（或亞健康狀態(tài)）的人（而不只是?。?；②充分體現(xiàn)“醫(yī)生參與，醫(yī)藥融合”的特色；③研發(fā)途徑應(yīng)體現(xiàn)“臨床-動物-臨床”的特點；④具有獨特的臨床療效綜合評價體系；⑤具有體現(xiàn)其作用模式（機(jī)理）的藥物綜合篩選模式（“系統(tǒng)-系統(tǒng)”相互作用模式）；⑥具有體現(xiàn)其化合物群的整體表征和局部特征的綜合表達(dá)形式[16]。

中藥復(fù)方新藥的來源為傳統(tǒng)的中藥方劑（古方，經(jīng)方），已上市的中成藥，確有療效的院內(nèi)制劑和臨床有效驗方，組分中藥和由單體或組分按中醫(yī)藥理論和/或現(xiàn)代理論配伍組成的復(fù)方等。西藥復(fù)方新藥主要來源于臨床聯(lián)合用藥的實踐或針對疾病的臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究，以信號通路為靶標(biāo)研發(fā)而成復(fù)方新藥。

2.8 從臨床出發(fā)，以信號通路為靶標(biāo)的研發(fā)策略

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是從數(shù)據(jù)庫和P2S模式出發(fā)，而本文所提出的復(fù)方新藥研發(fā)是基于臨床實踐取得的系統(tǒng)生物學(xué)數(shù)據(jù)和S2S模型進(jìn)行的。如何能吸取NCE以靶點為靶標(biāo)研發(fā)模式的優(yōu)點，結(jié)合“系統(tǒng)-系統(tǒng)”模式理念，從長期和臨床相結(jié)合的實驗研究中，我們于2017年總結(jié)提出了以通路（signaling pathway，包括基因、蛋白質(zhì)、代謝物3個層面）為主，靶點為輔來表征整體藥效和相互作用的研發(fā)模式[6]。

從臨床出發(fā)，以信號通路為靶標(biāo)的復(fù)方新藥研發(fā)策略大致如下：

①對復(fù)方藥物進(jìn)行整體系統(tǒng)研究：采用化學(xué)物質(zhì)組學(xué)對中藥復(fù)方進(jìn)行藥材、組分和成分群3個層次，有君臣佐使之分，逐步遞進(jìn)的深入研究。針對不同類型的復(fù)方藥物，確定重點研究的化學(xué)層次，結(jié)合用動物模型開展的整體系統(tǒng)生物學(xué)研究，基本搞清復(fù)方藥物的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)；②針對所研究的疾病和中醫(yī)的辨證治療，制定臨床研究方案。從流行病學(xué)研究開始，根據(jù)不同的研究問題，研究目的，可采用不同的研究設(shè)計和方法。在各種臨床研究類型中，隨機(jī)對照臨床試驗內(nèi)在真實性高，可以判斷干預(yù)措施真實的療效，能夠證明因果關(guān)系，是學(xué)術(shù)界廣泛接受和認(rèn)可的療效評價方法，其研究結(jié)果被認(rèn)為是最高等級的臨床證據(jù)[23]。確定臨床病人入組條件后，入組病人0天的整體系統(tǒng)生物學(xué)及其它信息（病、證、生化指標(biāo)、影像學(xué)等）可作為疾?。ㄗC）分型橫斷面依據(jù)，治療各階段的所有信息作為整體療效評價和候選復(fù)方新藥的依據(jù)和來源；③臨床整體系統(tǒng)生物學(xué)研究:對臨床病人的血清（血漿）、尿液等樣品，根據(jù)疾病的特性確定所需開展的整體系統(tǒng)生物學(xué)的各種組學(xué)類型，進(jìn)行實驗研究。采用生物信息學(xué)方法，確定和疾病相關(guān)的靶點，信號通路和相應(yīng)的網(wǎng)絡(luò)，特別聚焦和疾病分型相關(guān)的整合生物標(biāo)志物體系（Intergrated Biomarker System，IBS）[11]；④網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)搜尋預(yù)測候選復(fù)方新藥：根據(jù)臨床數(shù)據(jù)和生物信息學(xué)所確定的靶點、通路和相應(yīng)網(wǎng)絡(luò)，采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法確定復(fù)方藥物化學(xué)物質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)和其相關(guān)性，以通路為主要靶標(biāo)，靶點輔助，聚焦得出候選復(fù)方藥物初步的化學(xué)成分，組分的配伍及配比；⑤生物學(xué)實驗優(yōu)化和驗證:采用動物模型（包括模式生物，如線蟲、斑馬魚等），細(xì)胞模型和分子生物學(xué)技術(shù)對網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)得出的候選復(fù)方藥物的組成、配伍和配比進(jìn)行優(yōu)化和驗證；⑥傳統(tǒng)新藥研究開發(fā)中的藥效、藥理和安全性評價。

從臨床出發(fā)，以通路為靶標(biāo)的復(fù)方新藥研發(fā)策略能有效克服目前中醫(yī)藥研究中存在“方-病-證”割裂（違背中醫(yī)藥整體觀）和“基因-蛋白質(zhì)-代謝物分離”（缺乏系統(tǒng)性）的弊病，避免了單靶點、多靶點（缺乏有主次的整體表征）的不足，既可以發(fā)現(xiàn)針對疾?。ㄗC）多種治療理念集合的復(fù)方新藥，也可以發(fā)現(xiàn)對疾病的各病理階段的針對性強(qiáng)的復(fù)方新藥。

從臨床出發(fā)，基于信號通路的復(fù)方新藥研發(fā)途徑如圖1所示。本文以和中日友好醫(yī)院李平教授團(tuán)隊合作開展的糖腎方治療糖尿病腎?。―N）的臨床數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，開展的候選復(fù)方新藥研究實踐為實例進(jìn)行闡述。

3 糖腎方治療DN研發(fā)候選復(fù)方新藥的途徑與實踐

經(jīng)過隨機(jī)雙盲安慰劑對照的臨床試驗驗證了糖腎方是治療DN的有效方劑；采用基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)糖腎方干預(yù)DN療效相關(guān)的通路；采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對糖腎方整體化學(xué)物質(zhì)組的化學(xué)成分進(jìn)行分析鑒定，確定糖腎方化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)；采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析預(yù)測糖腎方中主要活性成分潛在的作用靶點和通路；整合臨床系統(tǒng)生物學(xué)和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測的相關(guān)通路，鎖定糖腎方干預(yù)DN的關(guān)鍵通路，并通過溯源分析，預(yù)測“有效化學(xué)成份群”，作為糖腎方干預(yù)DN組分新藥的候選藥物，進(jìn)一步通過細(xì)胞模型和動物模型進(jìn)行驗證。

圖1 從臨床出發(fā)、以通路為靶標(biāo)的復(fù)方新藥發(fā)現(xiàn)途徑

基本途徑（圖1）可分為11個方面：（1）糖腎方治療DN的隨機(jī)雙盲安慰劑對照試驗；（2）DN橫斷面的臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究；（3）糖腎方治療DN臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究；（4）糖腎方化學(xué)物質(zhì)組學(xué)分層次整體研究；（5）糖腎方干預(yù)db/db小鼠的整體系統(tǒng)生物學(xué)研究；（6）基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的糖腎方干預(yù)DN作用靶點和通路預(yù)測；（7）由關(guān)鍵作用通路溯源“有效化學(xué)成分群”；（8）網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)所得結(jié)果的分子生物學(xué)驗證；（9）基于細(xì)胞模型的候選復(fù)方新藥優(yōu)化和驗證；（10）由臨床系統(tǒng)生物學(xué)聚焦而得整合生物標(biāo)志物體系及作用；（11）傳統(tǒng)新藥研發(fā)過程（包括藥學(xué)與臨床前藥理、藥效學(xué)研究、急性毒性/長期毒性研究等臨床前藥學(xué)研究，臨床試驗階段和上市后再評價）。

3.1 糖腎方治療DN的隨機(jī)雙盲安慰劑對照臨床研究

DN是糖尿病的嚴(yán)重微血管并發(fā)癥，具有高患病率和高死亡率的特點。顯性蛋白尿是DN疾病進(jìn)展的重要危險因素，加速了DN進(jìn)展至終末期腎病。

20世紀(jì)80年代，名老中醫(yī)時振聲教授提出“氣陰兩虛”是慢性腎臟病的發(fā)病關(guān)鍵[24]。中醫(yī)藥治療DN的1464篇臨床隨機(jī)對照研究文獻(xiàn)回顧性研究，發(fā)現(xiàn)DN患者中頻次大于20%的證候依次為血瘀、氣虛、陰虛、腎虛、肝郁、脾虛和濕濁[25,26]。

多中心流行病學(xué)橫斷面現(xiàn)場調(diào)查的方法，通過“病-證結(jié)合”的臨床研究（橫斷面研究），闡釋了DN中醫(yī)證候特點、分布以及變化規(guī)律，以及中醫(yī)證候與西醫(yī)病理分期的相關(guān)性[27]。收集2型DN患者182例（注冊號：ChiCTR-TRC-10000843），按照西醫(yī)Mogensen分期標(biāo)準(zhǔn)分為糖尿?。?3例）、DN III期（33例）、DN IV期（27例）和DN V期（39例）組，另有正常對照組（50例）；將DN III期-V期患者按中醫(yī)辨證分型為氣陰兩虛偏陰虛、氣陰兩虛偏陽虛和陰陽兩虛。表1所示為西醫(yī)Mogensen分期和中醫(yī)辨證分型的相關(guān)性，雖然中西醫(yī)對疾病診斷判別標(biāo)準(zhǔn)不同，但對疾病嚴(yán)重程度的判斷基本類同，提示中西醫(yī)可能具有同一生物學(xué)意義。

流行病學(xué)研究表明，從糖尿病發(fā)展到DN，以及DN的發(fā)展過程中（從III期逐步發(fā)展到V期），尿蛋白、血肌酐、尿素氮等3個表征腎功能的指標(biāo)顯著增加；腎小球濾過率顯著降低。以34項中醫(yī)癥狀的量化評分比較三個中醫(yī)辨證分型8個單證素分布情況，證實了中醫(yī)理論中認(rèn)為DN的病機(jī)是氣陰兩虛，且貫穿始終，疾病后期陰損及陽、陰陽兩虛的觀點。在“氣陰兩虛→陰陽兩虛”的發(fā)展進(jìn)程中，臨床生化指標(biāo)顯示了與Mo?gensen分期一致的變化趨勢，提示中醫(yī)辨證分型與西醫(yī)病理分期具有相同的物質(zhì)基礎(chǔ)。

表1 中西醫(yī)臨床診斷相關(guān)性

糖腎方（TSF）由黃芪、生地黃、山萸肉等7味中藥配伍而成，具有“益氣柔肝，活血通絡(luò)”的功效，是針對DN微量白蛋白尿期及顯性蛋白尿期的臨床經(jīng)驗方。兩次糖腎方治療DN的多中心、隨機(jī)雙盲、安慰劑對照臨床試驗（注冊號：ChiCTR-TRC-10000843，ChiCTRTRC-13003566），證實糖腎方顯著改善顯性蛋白尿期患者倦怠乏力、肢體麻木等氣虛血瘀相關(guān)癥狀。在微量白蛋白尿期，糖腎方在減少尿蛋白排泄和改善腎小球濾過率方面與腎素血管緊張素酶抑制劑/血管緊張素受體拮抗劑（ACEI/ARB）療效一致，而在延緩腎功能損傷進(jìn)展方面更具優(yōu)勢；在顯性蛋白尿期，尿蛋白排泄增加，腎小球濾過率呈進(jìn)行性下降，西藥治療無法阻止疾病發(fā)展，糖腎方可顯著降低24 h尿蛋白含量，提高腎小球濾過率。此外，糖腎方可減少尿蛋白及尿液肝型脂肪酸結(jié)合蛋白水平，并降低DN微量白蛋白尿患者的尿液TGF-β水平[28-29]。RCT臨床試驗證實了糖腎方臨床療效確切，為深入開展糖腎方作用機(jī)制等研究提供了基礎(chǔ)和支撐。

3.2 DN橫斷面的臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究

本研究建立了整合代謝輪廓譜分析（整體效應(yīng)）、七大類百余種磷脂（細(xì)胞膜形成、脂質(zhì)代謝異常、活性氧自由基）、15種脂肪酸（脂毒性、胰島素分泌抑制）、21種嘌呤嘧啶（調(diào)節(jié)腎素釋放、腎血流能量代謝異常）和8種硫醇氨基酸（機(jī)體氧化應(yīng)激狀態(tài)、糖代謝、腎臟功能）定量分析的定量代謝組學(xué)平臺技術(shù)，以及14種DN相關(guān)基因PCR定量測定技術(shù)[30-37]，針對“3.1節(jié)”多中心流行病學(xué)橫斷面研究病例開展了臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究。

圖2 基于西醫(yī)分期的DN橫斷面研究結(jié)果

3.2.1 基于西醫(yī)分期的DN橫斷面研究

西醫(yī)分期研究結(jié)果（圖2A）顯示，患者血漿代謝狀態(tài)隨著疾病進(jìn)展發(fā)生了顯著改變，篩選得到了41個可表征DN發(fā)展進(jìn)程的內(nèi)源性潛在代謝物生物標(biāo)志物（圖2B）?；蚨拷Y(jié)果顯示（圖2C），AR、AGT、CD?KAL1、IGF2BP2和MTHFR基因的表達(dá)與DN分期顯著相關(guān)。上述結(jié)果表明，能量代謝與脂肪酸代謝異常引起糖脂代謝紊亂是DN發(fā)生發(fā)展的主要原因之一（圖2D）。

3.2.2 基于中醫(yī)分型的DN橫斷面研究

中醫(yī)分型研究中，各組樣本分布呈螺旋狀，病情越嚴(yán)重，樣本距離正常對照組越遠(yuǎn)（圖3A）。其中，隨著陰虛向陽虛的轉(zhuǎn)化，磷脂類代謝物呈下降趨勢，而嘌呤/嘧啶核苷類代謝物呈上升趨勢（圖3C），與其在DN西醫(yī)分期中的變化趨勢（圖3D）基本一致，表明中醫(yī)辨證分型與西醫(yī)病理分期具有相同的物質(zhì)基礎(chǔ)。AR、AGT、AGER和IGF2BP2基因的差異表達(dá)與DN的中醫(yī)分型顯著相關(guān)（圖3B）。特別是AR基因，推測其高表達(dá)與長期高血糖引起腎臟等結(jié)構(gòu)變化產(chǎn)生微血管病變相關(guān)，高血糖會導(dǎo)致郁而化熱，燔灼津液而為陰虛。

3.2.3 整合生物標(biāo)志物體系的建立

本研究通過整合臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究結(jié)果與臨床中西醫(yī)診斷指標(biāo)，建立了包括西醫(yī)病理生化指標(biāo)、生物標(biāo)志物（基因、蛋白質(zhì)和代謝物等）以及中醫(yī)證候指標(biāo)，可應(yīng)用于DN診斷與治療的整合生物標(biāo)志物體系，并對其進(jìn)行聚焦分析，獲得可易于臨床檢測的最佳聚焦整合標(biāo)志物群（圖4）。

圖3 基于中醫(yī)分型的DN橫斷面研究結(jié)果

圖4 整合生物標(biāo)志物體系的發(fā)現(xiàn)途徑

圖5 DN中醫(yī)分型對應(yīng)的代謝標(biāo)志物群[6]

基于西醫(yī)分期研究，得到包括4個代謝物（肌苷、腺苷、腺苷同型半胱氨酸和亞油酸）以及4個臨床生化指標(biāo)（腎小球濾過率、尿蛋白、尿素氮和血肌酐）在內(nèi)的指標(biāo)群，可作為表征DN發(fā)生發(fā)展及治療藥物療效評價的指標(biāo)[6]。在不同層次的潛在生物標(biāo)志物體系判別分析中，臨床生化指標(biāo)群的預(yù)測準(zhǔn)確率為74.7%，以代謝指紋譜篩選的生物標(biāo)志物及與DN發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的嘌呤嘧啶類代謝標(biāo)志物和潛在基因生物標(biāo)志物的預(yù)測準(zhǔn)確率分別為74.5%、78%和37.7%，整合生物標(biāo)志物體系的預(yù)測準(zhǔn)確率最高（綜合預(yù)測準(zhǔn)確率為98.9%）。

基于中醫(yī)辨證分型，發(fā)現(xiàn)了與不同證候顯著相關(guān)的潛在代謝標(biāo)志物群（圖5），進(jìn)一步聚焦得到包括4個代謝物（肌苷、腺苷、胞嘧啶、S-腺苷同型半胱氨酸）、4個臨床生化指標(biāo)（尿蛋白、腎小球濾過率、尿素氮、血肌酐）和5個中醫(yī)癥狀指標(biāo)（倦怠乏力、腰膝酸軟、氣短懶言、手足心熱和浮腫）的DN中醫(yī)證候診斷整合指標(biāo)體系。

綜上所述，通過對DN的西醫(yī)分期和中醫(yī)辨證分型進(jìn)行的橫斷面臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究，初步探索了疾病的發(fā)展機(jī)制，建立的整合生物標(biāo)志物體系為后期DN的早期診斷和療效評價提供了潛在的指標(biāo)。

3.3 糖腎方治療DN的臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究

3.3.1 糖腎方臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究的多組學(xué)分析

本研究針對“3.1節(jié)”糖腎方治療DN的循證醫(yī)學(xué)臨床研究病例開展了臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究，安慰劑組和糖腎方治療組患者采用臨床生化指標(biāo)進(jìn)行藥效評價的同時，收集血漿進(jìn)行了臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究。

通過建立血漿miRNAs表達(dá)譜篩選得到與糖腎方治療作用相關(guān)的59個潛在miRNAs標(biāo)志物（圖6A）；蛋白質(zhì)組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)了228個蛋白質(zhì)的表達(dá)隨糖腎方治療發(fā)生顯著變化（圖6B）；定量代謝組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)糖腎方治療后，患者血漿代謝狀態(tài)趨向正常對照（圖6C）。對上述臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行生物信息學(xué)分析，聚焦構(gòu)建了糖腎方作用的關(guān)鍵調(diào)控網(wǎng)絡(luò)圖（圖6D所示）。糖腎方通過調(diào)節(jié)PPAR信號通路、脂肪細(xì)胞因子信號通路、Jak-STAT、細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體相互作用通路、脂肪酸代謝等信號通路參與調(diào)控機(jī)體的免疫功能、炎癥反應(yīng)、代謝紊亂及細(xì)胞凋亡等功能，發(fā)揮其治療DN的作用。

3.3.2 PPAR通路是糖腎方治療DN的關(guān)鍵（君）通路之一

PPAR（過氧化物酶體增殖物激活受體）通路在脂肪細(xì)胞分化、脂肪酸代謝、胰島素抵抗中起重要作用[38,39]。對富集到PPAR通路的潛在標(biāo)志物進(jìn)行定量測定，部分結(jié)果(圖6E)所示。miR-7108-5p和miR-6833-3P分別負(fù)調(diào)控adiponectin和MMP-1蛋白質(zhì)表達(dá)，從而有效控制了最終代謝產(chǎn)物飽和游離脂肪酸與游離脂肪酸的水平，給藥6個月后，其總量均顯著下降（P＜0.05）。雖然安慰劑對照組通過基礎(chǔ)治療也可在一定程度上調(diào)控潛在標(biāo)志物表達(dá)與脂肪酸水平，但整體療效不如糖腎方，從代謝物水平證實了糖腎方對PPAR通路的調(diào)節(jié)作用[34,36]。

綜上所述，糖腎方對延緩DN發(fā)展具有良好的療效，PPAR通路是糖腎方發(fā)揮特有調(diào)控作用的關(guān)鍵（君）通路之一。

3.4 糖腎方化學(xué)物質(zhì)組學(xué)分層次整體研究

化學(xué)物質(zhì)組學(xué)把具有明確臨床療效的復(fù)方中藥作為整體化學(xué)物質(zhì)組，以生物活性為導(dǎo)向，層次化、逐層遞進(jìn)地逐步篩選出具有最小化學(xué)組成但仍保留其療效的最優(yōu)化學(xué)物質(zhì)組，有自上而下和自下而上兩種應(yīng)用模式（圖7）。糖腎方（TSF）由黃芪、生地黃、山萸肉、三七、大黃、鬼箭羽、枳殼等7味中藥配伍而成。采用高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜技術(shù)對糖腎方（整體化學(xué)物質(zhì)組）及各配伍藥材（各子化學(xué)物質(zhì)組的）的化學(xué)成分進(jìn)行全息表征和解析鑒定，鑒定了糖腎方中9大類73個化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)（表2）。

進(jìn)而整合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、糖腎方治療DN臨床系統(tǒng)生物學(xué)、動物模型系統(tǒng)生物學(xué)研究及分子生物學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)的糖腎方調(diào)控的關(guān)鍵通路信息，篩選預(yù)測其治療DN的有效組分群（表2），提示糖腎方中各味藥材（子化學(xué)物質(zhì)組）通過各自藥效物質(zhì)基礎(chǔ)（有效化學(xué)物質(zhì)組），各司其職，通過對腎組織纖維化、糖脂代謝紊亂、免疫調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡等的調(diào)節(jié)發(fā)揮藥效。

采用Luciferase reporter穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株技術(shù)，分析糖腎方系列方藥對TGFβ1/Smad、AP-1、STAT3、NF-κB及NRF2等5個信號通路的影響。方中枳殼、鬼箭羽和大黃對TGFβ1/Smad通路（纖維化發(fā)生發(fā)展關(guān)鍵通路）和AP-1通路（體內(nèi)重要的轉(zhuǎn)錄因子，高糖狀態(tài)能上調(diào)TGFβ1、Fibronectin等基因）均具有抑制作用；黃芪對NRF2通路（調(diào)控氧化應(yīng)激）具有明顯上調(diào)作用，其有效成分為毛蕊異黃酮-7-β-O-D-葡萄糖苷[40]。后續(xù)研究中，將采用現(xiàn)代色譜分離技術(shù)靶向制備各有效組分群，深入探究各個配伍化學(xué)信息與藥效信息的相關(guān)性，弄清各組分之間的相互關(guān)系，去粗存精，重新配伍構(gòu)成有效化學(xué)物質(zhì)組。并綜合考慮各成分的口服生物利用度、吸收、分布、代謝和排泄等特征，發(fā)現(xiàn)和辨識有效成分群。

3.5 糖腎方干預(yù)動物模型的整體系統(tǒng)生物學(xué)研究

db/db小鼠是目前使用最廣泛的2型糖尿病小鼠模型[41]。db/db小鼠8周齡血糖明顯升高，出現(xiàn)白蛋白尿，12周起出現(xiàn)明顯腎損傷，其病程進(jìn)展與人類相似。故本研究采用db/db小鼠作為DN早期病變的動物模型，整合基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)開展了糖腎方治療DN的整體系統(tǒng)生物學(xué)研究，進(jìn)一步驗證并闡釋其作用機(jī)制。

3.5.1 經(jīng)典藥理學(xué)評價

8周齡雄性db/db小鼠隨機(jī)分為模型組、糖腎方組及陽性對照組（氯沙坦），db/m小鼠（C57/BL6）作為正常對照組，連續(xù)給藥12周。相較于模型組，糖腎方干預(yù)可顯著抑制db/db小鼠血糖升高和尿白蛋白排泄增加；改善DN發(fā)展所致胰島形態(tài)不規(guī)則，胰島內(nèi)細(xì)胞數(shù)目變少且排列分布不均勻等胰島組織病變；同時可減輕模型動物腎小球肥大和腎組織纖維化程度（圖8），提示糖腎方減輕腎組織損傷，減緩DN發(fā)展[42,43]。

圖6 基于臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究構(gòu)建的糖腎方作用調(diào)控網(wǎng)絡(luò)圖

圖7 中藥化學(xué)物質(zhì)組學(xué)的“自上而下”、“自下而上”兩種分層次、逐層遞進(jìn)的應(yīng)用模式[7]

表2 糖腎方整體化學(xué)物質(zhì)組化學(xué)成分

3.5.2 基因組學(xué)研究

建立給藥0周和12周各實驗組小鼠腎組織基因表達(dá)譜，通過與模型組比較，糖腎方組篩選得到1670個差異表達(dá)基因，其中上調(diào)1177個，下調(diào)127個。對其進(jìn)行通路富集分析，發(fā)現(xiàn)糖腎方主要通過調(diào)控Jak-STAT、細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體相互作用、MAPK信號通路、嘌呤代謝、胰島素、Wnt等14條通路發(fā)揮其對db/db小鼠的治療作用。

3.5.3 蛋白質(zhì)組學(xué)研究

細(xì)胞因子及其受體廣泛參與了DN的腎臟微血管病理生理過程，可影響到細(xì)胞外基質(zhì)成分的積聚、細(xì)胞肥大和細(xì)胞增生等諸多方面[44]。本研究從腎臟蛋白質(zhì)表達(dá)水平探索了糖腎方的作用機(jī)制。采用蛋白質(zhì)芯片建立腎臟組織中640個蛋白因子的表達(dá)譜，組間比較篩選得到275個差異表達(dá)蛋白質(zhì)與糖腎方療效相關(guān)。對其聚類分析發(fā)現(xiàn)，相較于安慰劑組，糖腎方組樣本不僅聚為一類，而距離模型組更遠(yuǎn)，說明其對db/db小鼠的干預(yù)作用更為顯著。對差異表達(dá)蛋白質(zhì)進(jìn)行通路富集發(fā)現(xiàn)，JAK-STAT和細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體相互作用是顯著性最高的兩條通路。

圖8 基于db/db小鼠模型的整體系統(tǒng)生物學(xué)研究

圖8 -1基于db/db小鼠模型的整體系統(tǒng)生物學(xué)研究之“經(jīng)典藥理評價”

圖8 -2基于db/db小鼠模型的整體系統(tǒng)生物學(xué)研究之“基因組學(xué)”

圖8 -3基于db/db小鼠模型的整體系統(tǒng)生物學(xué)研究之“蛋白質(zhì)組學(xué)”

圖8 -4基于db/db小鼠模型的整體系統(tǒng)生物學(xué)研究之“代謝組學(xué)”

整合分析基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究結(jié)果，發(fā)現(xiàn)Jak-STAT信號通路是最關(guān)鍵的信號通路之一。對富集到Jak-STAT通路的5個蛋白因子IL-2、IL-6、IL-13、IL-15、IFNγ和 7 個 基 因 JAK1、JAK2、STAT3、STAT4、SOCS1、SOCS3、SOCS7進(jìn)行了定量測定。糖腎方治療12周，IL-2，IL-6，Il-15和IFNγ的表達(dá)增加，而IL-13表達(dá)下降，其通過競爭抑制Jak-STAT和炎癥介質(zhì)的生成抑制炎癥反應(yīng)，緩解臟纖維化；基因表達(dá)除Stat4被抑制外，其它6個均被激活，提示糖腎方可使SOCS家族過度表達(dá)，負(fù)反饋調(diào)節(jié)Stat4的表達(dá)，使得血糖水平得到控制，改善DN腎組織的生理病理特征，從而達(dá)到對DN的治療作用。

3.5.4 代謝組學(xué)研究

本研究采用UPLC/TOF-MS對給藥前后db/db小鼠的血清和尿液進(jìn)行了代謝組學(xué)分析。血清代謝組學(xué)數(shù)據(jù)PLS-DA分析顯示，糖腎方組和陽性對照組聚集在一起，與模型組及正常組達(dá)到較好分離，說明藥物干預(yù)后db/db小鼠的代謝狀態(tài)發(fā)生明顯改善，趨向正常。組間對比篩選鑒定得到16個與糖腎方作用相關(guān)的潛在代謝生物標(biāo)志物，涉及三羧酸循環(huán)、氨基酸、嘌呤嘧啶、膽汁酸合成以及α-亞麻酸和亞油酸循環(huán)等代謝途徑。db/db小鼠給藥前后尿液代謝軌跡圖可以看出，隨著給藥時間的增加，小鼠尿液代謝狀態(tài)偏離模型組，趨向正常，趨勢較血清代謝更為明顯。篩選鑒定的10個潛在代謝標(biāo)志物主要涉及氨基酸代謝、嘧啶代謝和固醇類代謝。

綜上所述，基于db/db小鼠模型的整體系統(tǒng)生物學(xué)研究證實糖腎方治療DN確有療效，其可能通過調(diào)節(jié)Jak-STAT、細(xì)胞因子-細(xì)胞因子相互作用通路、MAPK、嘌呤代謝、Wnt等信號通路，調(diào)控模型動物小鼠能量代謝、嘧啶代謝及固醇類代謝紊亂，這與臨床研究發(fā)現(xiàn)的關(guān)鍵通路略有不同。臨床研究顯示糖腎方調(diào)節(jié)的關(guān)鍵通路是PPAR信號通路，其次為脂肪細(xì)胞因子、Jak-STAT等信號通路。其原因可能與db/db小鼠主要發(fā)病機(jī)制為脂代謝異常與炎癥反應(yīng)相關(guān)。由此可見，動物模型不能完全模擬臨床疾病，在實際研究中，應(yīng)建立不同誘導(dǎo)機(jī)制的多種模型，才能為臨床疾病及研究提供更科學(xué)、全面的研究參考。

3.6 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的TSF干預(yù)DN作用靶點和信號通路預(yù)測

“網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)”[20]可通過分析藥物對疾病網(wǎng)絡(luò)的干預(yù)，構(gòu)建“藥物-靶點-疾病”網(wǎng)絡(luò)，為闡釋中藥及其復(fù)方多成分、多途徑、多靶點協(xié)同作用的原理提供了新的思路和視角。本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法從整體性的角度對TSF干預(yù)DN的作用靶點和作用機(jī)制進(jìn)行探討。

3.6.1 潛在作用靶點和通路預(yù)測

采用PharmMapper反向藥效團(tuán)模型預(yù)測了TSF整體化學(xué)物質(zhì)組中73個成分的206個潛在作用靶點。通過Drugbank數(shù)據(jù)庫搜索已被FDA批準(zhǔn)注冊的用于治療DN的西藥及其對應(yīng)的靶點信息，共得到治療DN疾病的西藥主要有31種，共有43個作用靶點。通過GeneCards數(shù)據(jù)庫和OMIM數(shù)據(jù)庫搜索已報道的、與DN相關(guān)的基因，去除重復(fù)基因和假陽性基因，結(jié)果顯示共有174個基因參與調(diào)控DN的發(fā)生和發(fā)展。

采用Pharmmaper預(yù)測TSF中的化學(xué)成分有206個潛在作用靶點，與DN相關(guān)的靶點有21個，與FDA批準(zhǔn)的西藥共同作用的靶點有5個。其中ACE（血管緊張素轉(zhuǎn)換酶）、CFTR（囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白）、HMGCR（3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶）和INSR（胰島素受體）等4個靶點為TSF和西藥（FDA drugs）共同調(diào)控、與DN相關(guān)的基因靶點。

作用于CFTR和INSR靶點的西藥分別為格列本脲和甘精胰島素等，是臨床上較為常用的控制血糖的藥物。來源于山茱萸中的環(huán)烯醚萜類化合物當(dāng)藥苷（Sweroside）與格列本脲同作用于CFTR靶點。CFTR是葡萄糖依賴性的電活性和胰島素分泌β細(xì)胞的調(diào)節(jié)器[45]。生地黃中的環(huán)烯醚萜苷類化合物乙酰基梓醇（Acetylcatalpol）、地黃苦苷元（Rehmapicrogenin），苯乙醇苷類化合物肉蓯蓉苷A、肉蓯蓉苷H和松果菊苷，以及枳殼中的柚皮苷（Narirutin）均作用于INSR靶點，該基因編碼胰島素受體不同亞型的兩個轉(zhuǎn)錄變異體，與胰島素具有特殊的親和力，受體基因突變或缺失、合成減少或降解加速，親和力降低、β亞單位酪氨酸激酶活性降低，均可導(dǎo)致胰島素抵抗的發(fā)生，從而導(dǎo)致血糖升高。ACE可催化將血管緊張素I轉(zhuǎn)化為具有生理活性的血管緊張素II。抑制ACE的活性可延緩DN的進(jìn)展[46]，腎ACE2的脫落介導(dǎo)DN的疾病機(jī)制，并且尿ACE2可以作為腎損傷的預(yù)警指標(biāo)，抑制其活性有助于保護(hù)腎功能[47]。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑類（ACEI）藥物是目前公認(rèn)的在預(yù)防和治療DN、減少尿蛋白排泄最有效的藥物，作用于ACE的西藥為依那普利、苯那普利、卡托普利、福辛普利、培哚普利、西拉普利等ACEI類藥物，山茱萸中的馬來酸（Malic acid）作用于該靶點。脂代謝異常在糖尿病微血管病及DN的發(fā)病機(jī)制和進(jìn)展中起到重要作用，調(diào)節(jié)脂代謝紊亂對控制糖尿病及其并發(fā)癥、降低DN心血管病發(fā)生率和病死率具有重要意義，他汀類降脂藥是最為常用的脂代謝紊亂調(diào)節(jié)劑；山茱萸中的環(huán)烯醚萜類化合物馬錢子苷（Lo?ganin）與他汀類藥物共同作用于HMGCR靶點，而該靶點是膽固醇合成的限速酶。

綜上所述，TSF中主要化學(xué)成分具有與西藥相同的作用靶點，一方面提示TSF具有控制血糖，調(diào)節(jié)脂代謝紊亂，調(diào)整血壓和減少尿蛋白排泄等藥理作用，另一方面揭示了中藥多成分、多靶點、多途徑的作用特性。

將TSF潛在作用靶點、DN相關(guān)靶點基因及DN的西藥作用靶點基因分別導(dǎo)入DAVID數(shù)據(jù)庫，進(jìn)行GO分析和KEGG通路分析，TSF對DN的調(diào)控作用主要涉及73條通路，F(xiàn)DA批準(zhǔn)的西藥對DN的調(diào)控作用主要涉及20條通路，其中有14條通路為TSF和FDA批準(zhǔn)的西藥共同調(diào)控的通路。另有9條通路，為已經(jīng)系統(tǒng)生物學(xué)研究驗證的TSF調(diào)控通路，但在網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究中，并未預(yù)測到它們是DN疾病相關(guān)靶點基因注釋通路。

3.6.2 關(guān)鍵通路

根據(jù)TSF中主要化學(xué)成分潛在作用通路、DN發(fā)生發(fā)展相關(guān)通路以及治療DN西藥的潛在作用通路，整合系統(tǒng)生物學(xué)研究結(jié)果，選擇經(jīng)系統(tǒng)生物學(xué)驗證的TSF調(diào)控DN的關(guān)鍵通路，分別為磷脂酰肌醇-3-激酶-絲蘇氨酸蛋白激酶信號通路（PI3K-Akt signaling path?way）、蛋白激酶信號傳導(dǎo)信號通路（MAPK signaling pathway）、氧化物酶體增殖物激活受體信號通路（PPAR signaling pathway）、胰島素抵抗通路（Insulin re?sistance）、胰島素信號通路（Insulin signaling pathway）、腫瘤壞死因子信號通路（TNF signaling pathway）、FcεRI信號通路（Fc epsilon RI signaling pathway）、T細(xì)胞受體信號通路（T cell receptor signaling pathway）、核苷酸寡聚化域樣受體信號通路（NOD-like receptor sig?naling pathway）、粘著斑（Focal adhesion）和血管內(nèi)皮生長因子信號通路（VEGF signaling pathway）等11條通路。

圖9所示為TSF中73個活性成分作用于206個靶點注釋的11條關(guān)鍵通路及其對應(yīng)的生物學(xué)功能，提示TSF通過對胰島素抵抗和糖脂代謝紊亂的調(diào)控，以及免疫功能和炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用，改善腎組織纖維化狀態(tài)和細(xì)胞凋亡而治療DN[48-55]。其中TSF對PPAR信號通路、PI3K-Akt信號通路的調(diào)控作用在其治療DN的臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究和分子生物學(xué)研究中得到驗證。但也有一些在整體系統(tǒng)生物學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)的通路在網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)富集通路中未能找到，推測有兩方面原因，一方面是由于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是建立在已有的西藥小分子作用靶點數(shù)據(jù)庫基礎(chǔ)上的，其收錄內(nèi)容受數(shù)據(jù)庫內(nèi)容所限，影響預(yù)測結(jié)果；另一方面網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測工具所采用算法的局限性也會影響預(yù)測結(jié)果，這兩點原因也是現(xiàn)在網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究亟待突破的問題。

3.7 由關(guān)鍵作用的通路溯源“有效化學(xué)成分群”

基于前述從臨床出發(fā)，以通路為靶標(biāo)的研發(fā)策略，以糖腎方為例，開展了基于信號通路的新藥發(fā)現(xiàn)（圖10），該新藥發(fā)現(xiàn)策略可為后續(xù)新藥研發(fā)提供藥理機(jī)制比較明確、具有開發(fā)前景的候選新藥。

整合糖腎方網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測和臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究結(jié)果，得到PPAR、2型DN、脂肪因子和淀粉和蔗糖代謝4條重要通路。其中，PPAR和脂肪因子信號通路所涉及的功能和靶點類似；2型DN涉及的西藥主要是胰島素和格列類降糖藥，與胰島素水平和機(jī)體對胰島素的敏感性相關(guān)；淀粉和蔗糖代謝主要是阿卡波糖的靶點，其功效為配合飲食控制治療2型糖尿病。考慮到DN患者已是糖尿病發(fā)展的中后期，出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)病，通過合理控制飲食已很難控制或逆轉(zhuǎn)疾病。因此，優(yōu)選關(guān)鍵（君）信號通路PPAR和2型DN兩條通路開展“有效化學(xué)成份群”溯源。通過富集在關(guān)鍵通路中的中藥成分預(yù)測靶點，逆向?qū)ふ覍?yīng)的有效化學(xué)成分，并確認(rèn)藥材歸屬，結(jié)果詳見表3。

從表3可知，作用于PPAR信號通路的中藥為：黃芪（2）、三七（6）、山茱萸（1）、熟大黃（3）、衛(wèi)矛（1）、生地黃（2）；作用于2型DN信號通路的中藥為：枳殼（1）、生地黃（5）、熟大黃（1）。黃芪具有益氣固表、利水消腫的功效，黃芪甲苷是黃芪的主要有效成分；三七具有活血化瘀的功效，人參皂苷Rg1和三七皂苷R1是三七的主要成分，它們作用于PDPK1、RXRA和RXRB3個靶點；山茱萸具有補(bǔ)益肝腎的功效，二甲基蘋果酸酯對FABP5和RXRB具有潛在調(diào)控作用，但二甲基蘋果酸酯是山茱萸中的微量成分，莫諾苷為山茱萸特征性指標(biāo)成分，且對高糖致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷有保護(hù)作用，可降低糖尿病大鼠血糖、尿蛋白、血清白蛋白和總蛋白水平。生地黃具有清熱生津的功效，其中主要的環(huán)烯醚萜苷類成分潛在的作用靶點為PDPK1和IN?SR。綜合藥效預(yù)測、藥材的功效、有效成分的含量及藥理活性，進(jìn)行后續(xù)驗證的中藥候選復(fù)方優(yōu)選來自黃芪、三七、山茱萸和生地黃的5個藥效成分：人參皂苷Rg1、三七皂苷R1、黃芪甲苷、莫諾苷、梓醇。

圖9 “藥材-通路-生物活性”關(guān)系網(wǎng)絡(luò)圖

圖10 基于信號通路的組分新藥發(fā)現(xiàn)策略示意圖

表3 PPAR信號通路中中藥預(yù)測靶點對應(yīng)的成分及藥材歸屬

3.8 分子生物學(xué)驗證

由3.6節(jié)所得11條重要通路，除了系統(tǒng)生物學(xué)研究得到的真實通路之外，需對網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測的通路進(jìn)行了分子生物學(xué)驗證。

3.8.1 NF-κB信號通路和TGF-β/Smad3通路

TSF可顯著降低高脂飲食合并鏈尿佐菌素誘導(dǎo)的DN模型大鼠腎小球系膜基質(zhì)百分比和腎小管損傷指數(shù)；顯著降低模型大鼠微量白蛋白尿、血清甘油三酯、膽固醇和低密度脂蛋白水平。TSF可抑制Smurf2表達(dá)，減少smad7水解，從而一方面促進(jìn)IκBα表達(dá)，抑制NF-κB驅(qū)動的炎癥反應(yīng)；另一方面降低Smad2/3磷酸化水平，減輕TGF-β/Smad3介導(dǎo)的腎臟纖維化[40]。TSF可改善db/db模型小鼠在DN發(fā)展所致胰島形態(tài)不規(guī)則，胰島內(nèi)細(xì)胞數(shù)目變少且排列分布不均勻等胰島組織病變；減輕模型動物腎小球肥大，減輕纖維化程度。該保護(hù)作用的機(jī)制可能是：TSF抑制NF-κB通路誘導(dǎo)的炎癥因子異常升高，阻斷miRNA21介導(dǎo)的TGF-β/Smad通路，減少纖維化I、IV型膠原積聚，通過調(diào)控JAK/STAT/SCOS通路同時改善了炎癥與纖維化，減少其對腎小球濾過屏障及腎小管重吸收功能的損害，降低尿蛋白的排泄[56]。

此外，TSF可降低db/db小鼠體重和肝臟系數(shù)，抑制尿白蛋白排泄增加，降低血脂水平，顯著改善模型小鼠脂質(zhì)代謝紊亂和肝臟脂肪變；相關(guān)機(jī)制與TSF通過AMPK/SREBPs及其下游靶基因顯著抑制db/db小鼠肝組織脂質(zhì)生成、通過Sirt·PGC1α-1增加肝組織與骨骼肌脂肪酸氧化利用，調(diào)節(jié)PI3K/Akt/mTOR信號通路及巨噬細(xì)胞活化等代謝途徑相關(guān)[57]。

3.8.2 TSF對2型糖尿病胰島素抵抗的調(diào)節(jié)作用及機(jī)制研究

TSF可促進(jìn)HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型的葡萄糖消耗，降低細(xì)胞中甘油三酯的蓄積，改善細(xì)胞糖脂代謝，并增加細(xì)胞中超氧化物歧化酶（SOD）和降低丙二醛（MDA）含量，改善細(xì)胞氧化應(yīng)激狀態(tài)。TSF對HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型中PI3K/AKT/SREBP-1c通路上6個重要功能基因的表達(dá)定量結(jié)果表明，與模型組相比，TSF可顯著增加HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型中PI3K p58、AKT1、GLUT4、PPARα基因表達(dá)水平，顯著降低SREBP-1c和FASN基因表達(dá)水平，表明TSF可通過調(diào)節(jié)PI3K/AKT/SREBP-1c通路重要基因表達(dá)干預(yù)2型糖尿病胰島素抵抗的作用。

3.9 基于細(xì)胞模型的候選復(fù)方新藥優(yōu)化和驗證

DN特征性的病理改變?yōu)槟I小球基底膜均勻肥厚伴有腎小球系膜細(xì)胞基質(zhì)增多、腎小球囊和腎小球系膜細(xì)胞呈結(jié)節(jié)性肥厚及滲透性增加[58,59]。系膜細(xì)胞的生理特性決定了它是DN眾多致病因子作用的主要靶細(xì)胞之一。采用高糖刺激下人腎小球系膜細(xì)胞（HMC）模型，對候選復(fù)方（人參皂苷Rg1、三七皂苷R1、黃芪甲苷、莫諾苷、梓醇）進(jìn)行了初步處方優(yōu)化及藥效評價。

3.9.1 候選復(fù)方的處方優(yōu)化

首先成功建立高糖刺激下HMC模型，確定高糖刺激48 h細(xì)胞增殖異常顯著，且可持續(xù)至72 h，因此，確定高糖刺激造模時間為48 h?；诖四Ｐ?，通過細(xì)胞活性考察確定了5種中藥成分的濃度考察范圍，發(fā)現(xiàn)復(fù)方作用優(yōu)于單成分作用，其中，黃芪甲苷為1-10 μM；人參皂苷Rg1為25-60 μM；三七皂苷R1為1-10 μM；梓醇為1-10 μM；莫諾苷為1-10 μM。

表4 糖尿病不同分期聚焦整合生物標(biāo)志物群

其次，采用5因素10水平的均勻設(shè)計試驗對復(fù)方組成的配伍比例進(jìn)行優(yōu)化，篩選確定水平3（黃芪甲苷3.0 μM、三七皂苷R1 56.1 μM、人參皂苷Rg1 1.0 μM、梓醇4.0 μM、莫諾苷5.0 μM）為最佳復(fù)方配伍，其對高糖導(dǎo)致的HMC的異常增殖抑制作用最為顯著且作用穩(wěn)定，且優(yōu)于各單成分作用。

3.9.2 優(yōu)化復(fù)方對細(xì)胞外基質(zhì)TGF-β1、Col I和Col III分泌的影響

分泌轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）和膠原蛋白在糖尿病腎臟疾病的發(fā)病機(jī)制中起重要的角色[60]，持續(xù)高糖刺激能促進(jìn)很多與DN發(fā)病相關(guān)的細(xì)胞因子（如TGF-β1、Col I和Col III、ANG II和VEGF等）的表達(dá)。本研究所建立的高糖刺激下HMC的TGF-β1、Col I和Col III外分泌均顯著增加；而加入最佳配伍復(fù)方后，高糖刺激下HMC的TGF-β1、Col I和Col III的異常分泌均具有顯著改善，蛋白表達(dá)水平均接近正常細(xì)胞（P＞0.05），且優(yōu)于各單體化合物的作用，體現(xiàn)了中藥復(fù)方配伍增效的作用。

3.10 由臨床系統(tǒng)生物學(xué)聚焦而得整合生物標(biāo)志物體系和應(yīng)用

基于DN橫斷面的臨床生物學(xué)研究，構(gòu)建了整合臨床指標(biāo)、代謝生物標(biāo)志物和基因生物標(biāo)志物的生物標(biāo)志物體系。其中包括11種臨床指標(biāo)：血糖控制指標(biāo)（空腹血糖、餐后2小時血糖、糖化血紅蛋白）、腎功能指標(biāo)（尿蛋白、血肌酐、尿素氮、腎小球濾過率估算值）和血脂指標(biāo)（膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白）；41種代謝生物標(biāo)志物（圖2B）；5種基因標(biāo)志物：CDKAL1，IGF2BP2，AR，AGT和MTHFR。

3.1 0.1 整合生物標(biāo)志物體系的臨床應(yīng)用評價

將整合生物標(biāo)志物體系中各生物標(biāo)志物含量與臨床生化指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示其與臨床表征腎病的腎功能指標(biāo)（尿蛋白、腎小球濾過率、尿素氮和血肌酐）和表征糖尿病的血糖控制指標(biāo)（糖化血紅蛋白和餐后血糖）具有顯著相關(guān)性，表明將生物標(biāo)志物用于臨床診斷是可行的，但是該體系包含生物標(biāo)志物數(shù)目眾多，不適于臨床實際檢測。研究中發(fā)現(xiàn)不同類型的標(biāo)志物在疾病進(jìn)程中的作用并不相同，例如磷脂類代謝物主要與血糖控制指標(biāo)相關(guān)，游離脂肪酸類代謝物主要與腎功能及腎損傷指標(biāo)相關(guān)；前者在進(jìn)行預(yù)測診斷時，較適合用于糖尿病的診斷，后者較適合用于DN不同分期的診斷。因此，有必要對所建立的整合生物標(biāo)志物體系進(jìn)行聚焦、評價，探索疾病早期診斷、風(fēng)險評估和藥物篩選的最佳生物標(biāo)志物體系。

3.1 0.2 整合生物標(biāo)志物體系聚焦分析及應(yīng)用

（1）DN早期風(fēng)險評估指標(biāo)聚焦和評價

通過對DM和DN各期生物標(biāo)志物的聚焦分析發(fā)現(xiàn)肌苷和eGFR水平結(jié)合對DN 1期和2期具有較高的分離能力，利用肌苷和eGFR水平經(jīng)過PLS-DA聚類分析后，DM、DN 1期和2期患者可以實現(xiàn)較好分離。該研究為臨床上缺乏DN的1期和2期準(zhǔn)確診斷指標(biāo)的問題提供了解決方法，并在國內(nèi)外首次報告肌苷可以早期預(yù)測糖尿病腎病發(fā)生與進(jìn)展[61]。加拿大卡爾加里大學(xué)Matthias教授以“代謝組學(xué)與2型糖尿病，從基礎(chǔ)研究到臨床應(yīng)用”為題，給予了高度的評價[62]。

（2）DN治療藥物療效評價指標(biāo)聚焦和評價

應(yīng)用建立的整合生物標(biāo)志物體系，分別聚焦對DN各期具有診斷能力的生物標(biāo)志物（表5）。將這3個階段的指標(biāo)進(jìn)行整合，得到一個包含4個臨床指標(biāo)和4個代謝生物標(biāo)志物的指標(biāo)群，其對各個階段的預(yù)測準(zhǔn)確率均達(dá)到90%以上，可將其作為表征DN發(fā)生發(fā)展的重要指標(biāo)，也可作為聯(lián)合用藥的療效評價指標(biāo)。

3.1 0.3 糖尿病腎病中醫(yī)證候的可量化指標(biāo)體系

整合生物標(biāo)志物體系對氣陰兩虛偏陰虛、氣陰兩虛偏氣虛和陰陽兩虛患者的預(yù)測準(zhǔn)確率接近100%。我們嘗試用“整體表征”與“局部特征”結(jié)合的模式，聚焦建立了可量化中醫(yī)證候的生物標(biāo)志物群。通過對三種證候的8類34種癥狀進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)氣陰兩虛偏陰虛主要表現(xiàn)為陰虛內(nèi)熱、腎陰虛癥狀；偏氣虛主要表現(xiàn)為肺氣虛、腎陰虛癥狀；陰陽兩虛主要表現(xiàn)為腎陽虛、肺氣虛、腎陰虛及血瘀癥狀。并且通過相關(guān)性分析得到與這項癥狀顯著相關(guān)的代謝生物標(biāo)志物（表6），表明中醫(yī)證候有其特定的物質(zhì)基礎(chǔ)，對其相關(guān)代謝物含量進(jìn)行檢測可實現(xiàn)證候的客觀量化。

表5 與糖尿病腎病中醫(yī)分型癥狀顯著相關(guān)的代謝生物標(biāo)志物

綜上所述，基于臨床系統(tǒng)生物學(xué)研究建立的整合生物標(biāo)志物體系可以準(zhǔn)確表征DN的發(fā)展進(jìn)程，對其聚焦分析得到的不同生物標(biāo)志物群，不僅可以分別用于DN早期風(fēng)險評估、疾病精準(zhǔn)分期及藥效評價，而且大幅縮減標(biāo)志物的數(shù)量，滿足臨床檢驗實際需求，使生物標(biāo)志物檢測進(jìn)入臨床應(yīng)用成為可能。

3.11 傳統(tǒng)新藥研發(fā)過程

包括藥學(xué)與臨床前藥理、藥效學(xué)研究、急性毒性/長期毒性研究等臨床前藥學(xué)研究，臨床試驗階段和上市后再評價。

4 展望

中國新藥的研發(fā)模式基本上是遵循國際西藥開發(fā)模式，缺乏科學(xué)理念（理論）的創(chuàng)新，局限在科學(xué)技術(shù)上的創(chuàng)新。如何將東方醫(yī)學(xué)的精髓結(jié)合西方醫(yī)學(xué)的優(yōu)勢，實現(xiàn)理念（理論）上突破，可能是中國現(xiàn)代藥學(xué)發(fā)展中的卡脖子（瓶頸）科學(xué)問題。從2011年起，筆者從研究實踐出發(fā)提出了新醫(yī)藥學(xué)的理念。新醫(yī)藥學(xué)或稱整體系統(tǒng)醫(yī)學(xué)（Holistic Systems Medicine，HSM），是以維護(hù)人體系統(tǒng)的整體健康為根本目標(biāo)，融合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)藥學(xué)，現(xiàn)代中醫(yī)藥學(xué)和現(xiàn)代生命科學(xué)，創(chuàng)立兼取所長，既高于現(xiàn)代的中醫(yī)，也高于現(xiàn)代的西醫(yī)，解決人類整體健康和疾病預(yù)防、治療的整體系統(tǒng)醫(yī)學(xué)[2]。迄今已連續(xù)發(fā)表五文[2-6]，本文則是從整體系統(tǒng)醫(yī)學(xué)中的新藥研發(fā)出發(fā)，提出以復(fù)方新藥為現(xiàn)代藥學(xué)新的發(fā)展目標(biāo)，并提出了相應(yīng)策略、途徑和我們的實踐范例。

自1999年5月國家科技部啟動實施“中藥現(xiàn)代化”科技工作已經(jīng)20年了，包括之后不久又調(diào)整為“中醫(yī)藥現(xiàn)代化”，中醫(yī)藥向何處去，發(fā)展的方向和目標(biāo)究竟為何物，始終困擾著我們這一代學(xué)者。正如習(xí)近平主席在兩院院士大會上指出的“我國科技在視野格局、創(chuàng)新能力、資源配置、體制改革等方面存在諸多不適應(yīng)的地方?！苯鉀Q的方法就是“發(fā)展科學(xué)技術(shù)必須具有全球視野?！薄白灾鲃?chuàng)新是我們攀登世界科技高峰的必由之路”。屠呦呦先生獲諾貝爾獎后談到：“中醫(yī)藥是寶庫，但拿來就用還不夠?！薄叭绻朗刂献孀诘膶氊悾滩阶苑?，中藥只能是‘一筐草’，無法變成‘一塊寶’”。中醫(yī)藥是巨大寶庫，但不能固步自封，傳承是我們的責(zé)任，創(chuàng)新是我們的使命。中醫(yī)藥將和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)融合，發(fā)展到毛澤東主席提出的“中國統(tǒng)一的新醫(yī)學(xué)新藥學(xué)”。我們強(qiáng)烈倡議設(shè)立中國“新醫(yī)藥學(xué)發(fā)展計劃”，實現(xiàn)習(xí)近平主席提出的“主動發(fā)起全球性創(chuàng)新議題”。既促進(jìn)中醫(yī)學(xué)的發(fā)展，也促進(jìn)西醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)的發(fā)展，為中國和全球老百姓健康福祉盡心盡力。