金承基，宋萍，袁榮霞

江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江蘇鎮(zhèn)江212001

根據(jù)全球腫瘤報(bào)告的統(tǒng)計(jì)顯示，2012年全球范圍內(nèi)大約有1410萬的腫瘤新發(fā)病例和820萬的腫瘤死亡病例，其中，肺癌新發(fā)病例為180萬，約占全部惡性腫瘤的13%；肺癌死亡病例約為160萬，占腫瘤死亡病例的19.5%；肺癌的發(fā)病率和病死率已位居全球男性腫瘤發(fā)病率及病死率的首位，也是全球女性腫瘤死亡的第二大病因[1]。同樣，2014年發(fā)布的有關(guān)中國2010年腫瘤發(fā)病率和病死率的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，肺癌的發(fā)病率和病死率位居全部惡性腫瘤的首位，可見肺癌已嚴(yán)重威脅人類的生命健康[2]。其中，非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）約占原發(fā)性肺癌的80%，其大多起病隱匿，常難以被早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療；肺癌患者被發(fā)現(xiàn)時(shí)大多已屬于中晚期，失去了手術(shù)切除治療的最佳機(jī)會(huì)，而通過藥物控制肺癌的進(jìn)展，從而使肺癌成為一種慢性疾病逐漸成為肺癌治療的一種趨勢(shì)。NSCLC的治療方法除了手術(shù)、化療、放療外，針對(duì)基因的靶向治療已越來越受到研究者的重視。目前，靶向藥物酪氨酸激酶抑制藥（tyrosine kinase inhibitor，TKI）已成為NSCLC患者中表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）突變患者的一線治療藥物，但部分患者在使用TKI進(jìn)行治療的過程中出現(xiàn)了原發(fā)性或獲得性耐藥，因此，尋找新的治療靶標(biāo)已迫在眉睫。有研究發(fā)現(xiàn)，蛋白激酶CK2在NSCLC中過表達(dá)，同時(shí)，CK2抑制藥在體外實(shí)驗(yàn)、體內(nèi)試驗(yàn)中均表現(xiàn)出抗癌活性[3-5]，因此，CK2極有可能成為NSCLC靶向治療的新靶點(diǎn)，使患者從中獲益。

1 CK2的結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)功能

CK2源自于錯(cuò)譯的酪蛋白激酶2（casein kinase 2）的首字母縮寫，因此，蛋白激酶CK2曾經(jīng)也稱酪蛋白激酶2，是真核細(xì)胞中普遍存在的高度保守的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶[6]。CK2可以由兩個(gè)催化亞基（包括α和α'）和兩個(gè)調(diào)節(jié)亞基（β）組成的四聚體復(fù)合物（α2β2/α'2β2/αα'β2）的形式存在，也可以以游離的單體激酶的形式存在[7]（圖1）。CK2具有多種生物功能，不僅能夠影響細(xì)胞的分裂與增殖，對(duì)細(xì)胞的凋亡也具有抑制作用，還參與細(xì)胞周期的調(diào)控[8-9]。Kim等[10]研究發(fā)現(xiàn)，在肝細(xì)胞癌中，CK2的減少使肝細(xì)胞阻滯在G2/M期。此外，CK2亦參與信號(hào)通路的調(diào)控，例如，Lee等[11]發(fā)現(xiàn)在胃上皮細(xì)胞中，CK2對(duì)細(xì)胞膜上α-catenin的磷酸化導(dǎo)致α-catenin/β-catenin復(fù)合物遭到破壞，導(dǎo)致β-連環(huán)蛋白在細(xì)胞核中累積，從而使β-連環(huán)蛋白與LEF/TCF轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合進(jìn)而激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路。CK2還能夠促進(jìn)血管的生成，Benavent等[4]將CK2抑制藥GIGB-300用于肺癌的小鼠模型中，發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比，GIGB-300處理組（對(duì)小鼠進(jìn)行5天的全身治療）中，腫瘤細(xì)胞驅(qū)動(dòng)的新生血管明顯減少。

圖1 CK2的單體和四聚體復(fù)合物形式

2 CK2與 NSCLC的關(guān)系

有研究發(fā)現(xiàn)，CK2不僅在肝癌、乳腺癌、黑色素瘤等惡性腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)，在肺癌中同樣高表達(dá)，并且與患者的預(yù)后有關(guān)[3，12-15]。例如，O-charoenrat等[15]收集并研究了45例NSCLC患者的病理資料及隨訪資料后發(fā)現(xiàn)，在肺鱗狀細(xì)胞癌中，CK2的高表達(dá)與患者的預(yù)后呈負(fù)相關(guān)。Liu等[16]對(duì)160例NSCLC患者的NSCLC組織標(biāo)本進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞中CK2α'的表達(dá)水平與腫瘤的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、侵襲及患者的預(yù)后有關(guān)，主要是高表達(dá)的催化亞基CK2α'誘導(dǎo)細(xì)胞中乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子1（breast cancer metastasis suppressor 1，BRMS1）絲氨酸 30（serine 30，S30）位點(diǎn)的磷酸化，進(jìn)而導(dǎo)致BRMS1降解。Ku等[17]研究發(fā)現(xiàn)，在A549細(xì)胞中，CK2抑制藥CX-4945能夠影響磷酸肌醇3-激酶（phosphatidylinositide 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶 B（protein kinase B，PKB，又稱AKT）信號(hào)通路和絲裂原激活蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信號(hào)通路中相關(guān)蛋白的表達(dá)，而這兩條信號(hào)通路與腫瘤細(xì)胞的遷移與侵襲密切相關(guān)。Kim和Hwan Kim[18]的研究也發(fā)現(xiàn)，CX-4945能夠抑制A549細(xì)胞的侵襲和遷移，這種作用是通過抑制TGF-β1誘導(dǎo)的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化實(shí)現(xiàn)的。So等[19]通過采用CK2αsiRNA轉(zhuǎn)染H1299和H358兩種細(xì)胞系后，發(fā)現(xiàn)大量的腫瘤細(xì)胞被阻滯于G2/M期，同時(shí)，腫瘤細(xì)胞的增殖受到抑制，凋亡有所增加，而使用CK2抑制藥也獲得了同樣的結(jié)果，進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)這一改變與CK2抑制藥對(duì)AKT/雷帕霉素靶蛋白（mechanistic target of rapamycin，MTOR）信號(hào)通路具有阻斷作用有關(guān)。

3 CK2抑制藥在NSCLC治療中的應(yīng)用

CK2抑制藥具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、遷移和促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用[4，17-19]，但臨床中積累的經(jīng)驗(yàn)表明，與單一藥物相比，不同分子機(jī)制藥物聯(lián)合應(yīng)用對(duì)于NSCLC的治療更加有效[20]，可見，單獨(dú)應(yīng)用CK2抑制藥治療NSCLC具有局限性，因此，為了更加有效地控制腫瘤的進(jìn)展，提高腫瘤患者的生存率，就不能夠局限于傳統(tǒng)的單藥治療模式，而應(yīng)將多方案聯(lián)合的治療方式作為新型的治療模式。

3.1 CK2抑制藥聯(lián)合化療

NSCLC起病隱匿，大多數(shù)患者確診時(shí)已發(fā)展至晚期，失去了最佳的手術(shù)機(jī)會(huì)。目前，以鉑類為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療方案仍然是一線治療方案，但因腫瘤細(xì)胞的化療耐藥性及化療帶來的不良反應(yīng)等問題，其療效及安全性值得思考[21-23]；因此，化療增敏劑的尋找顯得尤為重要。Cirigliano等[24]研究發(fā)現(xiàn)，人肺腺癌A549細(xì)胞對(duì)順鉑耐藥性的產(chǎn)生伴隨著腫瘤細(xì)胞內(nèi)CK2依賴的核因子κB（nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cell，NF-κB）信號(hào)通路的激活，因此，采用CK2抑制藥GIGB-300和順鉑共同處理A549順鉑耐藥株后，腫瘤細(xì)胞的凋亡明顯增加，并伴隨核內(nèi)p65水平的下降。Perera等[25]研究發(fā)現(xiàn)，GIGB-300聯(lián)合順鉑或紫杉醇的方案在抑制肺癌細(xì)胞的增殖方面表現(xiàn)出良好的協(xié)同性；更重要的是，劑量減少指數(shù)（dose reduction index，DRI）與組合指數(shù)（combination index，CI）呈負(fù)相關(guān)，這意味著每種單一藥物在組合中可以減少使用次數(shù)，而不影響最終的治療效果，進(jìn)而減少化療藥物帶來的不良反應(yīng)，提高安全性。Hung等[26]則把CK2抑制藥Hematein與抗癌藥物聯(lián)合應(yīng)用于小鼠的肺癌模型中，并對(duì)小鼠器官進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Hematein能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，降低小鼠的腫瘤負(fù)荷，同時(shí)，心臟、肝臟、肺和腎臟等臟器無明顯的損傷。以上研究充分說明了CK2抑制藥能夠增加腫瘤細(xì)胞對(duì)化療的敏感性，同時(shí)減少化療藥物帶來的不良反應(yīng)，使CK2抑制藥聯(lián)合化療治療NSCLC患者成為可能。

3.2 CK2抑制藥聯(lián)合放療

對(duì)于有區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的晚期NSCLC患者而言，放療仍然是其重要的治療方法，但是，腫瘤細(xì)胞固有的抗輻射性常導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)，放療效果往往不盡如人意，因此，尋找放療增敏劑成為學(xué)者研究的熱點(diǎn)[27]。早在2011年就有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，在NSCLC 中，CK2 抑制藥4，5，6，7-四溴-1H-苯并三唑（4，5，6，7-Tetrabromo-1H-benzotriazole，TBB）聯(lián)合放療較單獨(dú)使用TBB或單獨(dú)放療對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用更強(qiáng)，說明CK2抑制藥能夠增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)放療的敏感性，這與CK2抑制藥能夠阻斷表皮生長因子（epidermal growth factor，EGF）誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）的磷酸化有關(guān)[28]。STAT3是控制細(xì)胞周期的關(guān)鍵因素，因此，認(rèn)為CK2抑制藥能夠增強(qiáng)NSCLC放療敏感性與其調(diào)控細(xì)胞周期有關(guān)，這與順鉑抑制腫瘤細(xì)胞DNA的修復(fù)不同。Li等[29]的研究同樣有類似的發(fā)現(xiàn)，在A549及H460細(xì)胞系中，CK2特異性抑制劑Quinalizarin聯(lián)合放療組與單獨(dú)使用抑制劑組或單獨(dú)放療組比較，對(duì)放療敏感的G2/M期細(xì)胞的數(shù)量明顯增多；同時(shí)也發(fā)現(xiàn)CK2受到抑制后，放療誘導(dǎo)的DNA雙鏈的斷裂明顯增加，并且修復(fù)延緩。總之，上述研究結(jié)果為CK2抑制藥聯(lián)合放療治療NSCLC提供了強(qiáng)有力的理論依據(jù)，但目前尚缺乏相應(yīng)的體內(nèi)試驗(yàn)，因此其可行性、安全性、有效性仍有待大量的后續(xù)臨床試驗(yàn)進(jìn)行評(píng)估和驗(yàn)證。

3.3 CK2抑制藥聯(lián)合靶向治療

研究表明，在亞洲人群中，約47.9%的肺腺癌患者存在EGFR突變[30]，這是此類患者使用EGFRTKI進(jìn)行靶向治療的基礎(chǔ)；但20號(hào)外顯子中T790M的突變導(dǎo)致了TK（I如吉非替尼）原發(fā)性耐藥[31]，甚至少數(shù)T790M突變患者因T790M與EGFR激活突變比例的下降導(dǎo)致其對(duì)奧斯替尼（第3代EGFR-TKI，可以克服由T790M突變引起的耐藥性）不敏感[32]，這些均大大限制了靶向治療的有效性和持久性。已有研究表明，CK2可以調(diào)控EGFR的活性以及EGFR的下游信號(hào)通路[5]，CK2抑制藥醌茜素能夠抑制TKI耐藥的H1975及H1650細(xì)胞系的活性并促進(jìn)其凋亡[33]。那么，能否使用靶向治療聯(lián)合CK2抑制藥來治療NSCLC，達(dá)到增強(qiáng)療效的目的呢？So等[34]研究發(fā)現(xiàn)，CX-4945能夠誘導(dǎo)T790M突變的PC-9肺癌細(xì)胞的自噬，自噬小體將EGFR從質(zhì)膜上吞噬，并使其被溶酶體降解，因此，CX-4945與吉非替尼的組合能夠有效地抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，并誘導(dǎo)其凋亡。Bliesath等[5]研究則發(fā)現(xiàn)在人肺鱗癌H2170細(xì)胞小鼠模型中，CX-4945和厄洛替尼聯(lián)合組的抑制率為74%，高于單用CX-4945組的23%和單用厄洛替尼組的55%，以上學(xué)者的研究使靶向治療聯(lián)合CK2抑制藥治療NSCLC的可行性大大提高，但同時(shí)也需要大規(guī)模的前瞻性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證。

3.4 CK2抑制藥聯(lián)合免疫治療

隨著腫瘤免疫治療受到越來越廣泛的關(guān)注，NSCLC的免疫治療成為學(xué)者研究的熱點(diǎn)。已有研究表明，程序性死亡受體1（programmed cell death 1，PDCD1，也稱PD-1）/程序性死亡受體配體1（programmed cell death 1 ligand 1，PDCD1LG1，也稱PD-L1）單抗可以增強(qiáng)機(jī)體的免疫力，并且其在抑制腫瘤生長方面是安全有效的[35]，因此，PD-1單抗納武單抗（Nivolumab）被美國食品和藥品管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)AD）批準(zhǔn)作為既往接受過治療的晚期或轉(zhuǎn)移性NSCLC患者的二線治療藥物[36]。免疫抑制分子除了PD-1、PD-L1外，還有細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4（cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4，CTLA-4）、淋巴細(xì)胞活化基因-3（lymphocyte activation gene-3，LAG-3）等，不過目前免疫治療聯(lián)合CK2抑制藥治療NSCLC的相關(guān)研究比較少見，相信隨著研究的深入，此種聯(lián)合方案也會(huì)逐漸被報(bào)道。

4 小結(jié)與展望

近年來，有關(guān)CK2在NSCLC中作用的研究越來越多，越來越深入，同時(shí)CK2抑制藥在NSCLC治療中的價(jià)值得到肯定，但CK2抑制藥治療腫瘤的作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究及明確，能否篩選出對(duì)CK2抑制藥敏感的優(yōu)勢(shì)人群進(jìn)行個(gè)體化治療值得深入探索。相信CK2抑制藥在治療NSCLC方面必將給更多患者帶來新的希望。