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        UF-1000i尿液沉渣分析儀在尿液管型檢測中的應(yīng)用分析

        2018-12-26 11:48:42紀(jì)鳳卿陳君穎
        中國醫(yī)藥科學(xué) 2018年21期
        關(guān)鍵詞:管型顯微鏡分析儀

        紀(jì)鳳卿 滕 菁 陳君穎

        廈門市中醫(yī)院檢驗科,福建廈門 361009

        管型(casts)為尿液沉渣中較有重要臨床意義的成分之一,其出現(xiàn)提示可能有腎實質(zhì)性損害。盡管尿液全自動化檢測極大提高了檢驗科的工作效率,但是鑒于自動化儀器本身的一些局限性,尿液成分鑒別存在交叉干擾及管型的形態(tài)復(fù)雜,致使管型經(jīng)常難以區(qū)分辨認(rèn)[1]。有諸多因素影響儀器對管型檢測的準(zhǔn)確性,易造成假陰性、假陽性。本研究隨機(jī)選取本院2018年1~4月2130份尿液標(biāo)本采用干化學(xué)AX4030分析儀,UF-1000i尿液沉渣分析儀進(jìn)行分析,以顯微鏡檢法判定管型檢測真陽性、真陰性標(biāo)準(zhǔn),從而統(tǒng)計UF-1000i尿液沉渣分析儀檢測管型存在假陽性率、假陰性率,并且分析檢測管型存在假陽性,假陰性的干擾因素,提出初步處理措施。

        表2 UF-1000i檢測出的假陽性結(jié)果

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        標(biāo)本來源隨機(jī)選取本院2018年1~4月門診、住院尿液標(biāo)本2130例,其中男1058例,女1072例,年齡1~91歲,平均48歲。

        1.2 儀器、試劑

        京都干化學(xué)分析儀AX4030,配套試劑及伯樂質(zhì)控品;日本sysmex UF-1000i尿沉渣分析儀,配套試劑及質(zhì)控品,Olympus公司CX-21雙目顯微鏡。標(biāo)本采用湘儀牌SC2542離心機(jī)低速離心。

        1.3 檢測方法

        按照科室相關(guān)SOP完成室內(nèi)質(zhì)控檢測,以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。收集的門診、住院尿液均為中段尿,混勻后取10mL倒入一次性尿管。先用于AX4030、UF-1000i檢測,然后用CX-21顯微鏡鏡檢。離心鏡檢流程按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[2],將此10mL新鮮混勻的尿,以1500r/min轉(zhuǎn)速,離心5min,倒去上清液,剩余0.2mL混勻后,進(jìn)行管型鏡檢。

        1.4 結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)

        女性管型正常參考范圍為0~2.4μL、男性管型正常參考范圍為0~2.25μL,男女病理管型正常參考范圍為均是0~0.5μL;顯微鏡鏡檢陽性標(biāo)準(zhǔn):正常值參考范圍為:0~1/HP;超過以上范圍均視為陽性,干化學(xué)法尿液蛋白質(zhì)陽性標(biāo)準(zhǔn):Pro為(+)、(+)、(2+)、(3+)。

        1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

        計數(shù)資料以[n(%)]表示,組間比較采用χ2檢驗,以SPSS18.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)結(jié)果處理。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 顯微鏡法與UF-1000i分析儀兩種方法檢測尿液管型的結(jié)果

        運用顯微鏡法與UF-1000i分析儀法對2130份尿液標(biāo)本進(jìn)行分析,收集有關(guān)管型數(shù)據(jù)。其中UF-1000i法和顯微鏡法的陽性率是11.60%、4.51%,兩者比較 χ2=72.296,P=0.000,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

        表1 兩種檢測方法檢測尿液管型結(jié)果[n(%)]

        2.2 UF-1000i檢測出的假陽性、假陰性結(jié)果

        以人工顯微鏡法判定管型檢測真陽性、真陰性標(biāo)準(zhǔn)。UF-1000i檢出假陽性151例,假陽性率為7.09%;UF-1000i檢出假陰性6例,假陰性率為0.28%。

        2.3 UF-1000i法分析2130份尿液管型假陽性結(jié)果

        所有尿液標(biāo)本經(jīng)UF-1000i檢測尿液管型,出現(xiàn)151例假陽性結(jié)果見表2。各種干擾物(黏液絲、各種結(jié)晶及細(xì)菌成團(tuán)、白細(xì)胞及上皮細(xì)胞成團(tuán))所占比例分別為60.93%、23.84%、15.23%。

        3 討論

        UF-1000i尿液分析儀的原理是采用半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞/核酸熒光染色技術(shù),根據(jù)熒光流式細(xì)胞、電阻抗檢測細(xì)胞大小及電導(dǎo)率信息進(jìn)行綜合分析判別,從而進(jìn)行精準(zhǔn)、定量的尿液有形成分分析[3-5]。UF-1000i尿液分析儀檢測管型時,存在以下干擾因素:(1)含有纖維、黏液絲等類似管型物質(zhì)的尿液標(biāo)本,儀器識別誤判;(2)尿液中少數(shù)脫落的上皮細(xì)胞與管型具有相類似的形態(tài)和染色性[6],出現(xiàn)誤判;(3)標(biāo)本中存在部分真菌也容易被熒光染色之后識別誤判[6];(4)尿液中部分有形成分相互積聚形成與管型類似物也會被誤判,如聚集成團(tuán)狀、串狀的白細(xì)胞團(tuán),膿細(xì)胞團(tuán)也會誤判成管型[7-8]。

        本研究發(fā)現(xiàn)UF-1000i尿液分析儀檢測管型時,會受到黏液絲,各種結(jié)晶、細(xì)菌成團(tuán),白細(xì)胞、上皮細(xì)胞成團(tuán)等因素的干擾,并未發(fā)現(xiàn)有真菌干擾引起的假陽性。本研究以鏡檢法檢測為陽性判定為真陽性標(biāo)準(zhǔn),發(fā)現(xiàn)UF-1000i分析儀法與人工鏡檢法檢測管型的陽性率性有差異。這與國內(nèi)諸多學(xué)者研究結(jié)論一致[9-11]。此差異除了大部分與儀器本身局限性而存在干擾因素有關(guān)外,還與檢驗師細(xì)胞形態(tài)學(xué)水平差異及主觀判別,離心吸樣誤差等導(dǎo)致管型計數(shù)結(jié)果有一定差異有關(guān)。 此外還發(fā)現(xiàn)在這些假陽性標(biāo)本中相當(dāng)一部分為住院標(biāo)本,不管是管型檢測值還是本研究病理管型檢測值均略高于所設(shè)定參考值,經(jīng)鏡檢法發(fā)現(xiàn)均為陰性。此部分假陽性結(jié)果是受尿液檢驗前質(zhì)量控制影響所致。該住院尿液標(biāo)本送達(dá)檢驗科的時間到完成檢測時間大于2h而導(dǎo)致尿液黏液絲出現(xiàn),各種結(jié)晶析出,細(xì)菌滋生,進(jìn)而成團(tuán)結(jié)塊,形成類管型導(dǎo)致檢測假陽性。對于不是住院的尿液管型檢測也存在類似假陽性情況,我們認(rèn)為也可能是由于本地區(qū)人群生理遺傳特征所致。中國是遼遠(yuǎn)廣闊的多民族國家,各民族各地域人群具有自己獨特的生理遺傳特征,自然各地區(qū)人群生理醫(yī)學(xué)客觀指標(biāo)參考值勢必存在一定差異。為此重新尋找適合本地區(qū)人群尿液管型參考值數(shù)據(jù)資料是十分必要。為此我們建議實驗室可通過適當(dāng)調(diào)整管型正常參考范圍從而減少這部分假陽性率,減少人工鏡檢率[12]。有關(guān)管型重新設(shè)置參考值,均應(yīng)嚴(yán)格按照ISO15189或者CAP認(rèn)可的標(biāo)準(zhǔn)化流程驗證后,方可重新建立修改本實驗室的尿液沉渣報告單的管型參考值范圍。綜上所述,UF-1000i分析儀檢測管型假陽性率高,要想使假陽性率降低,應(yīng)及時進(jìn)行手工顯微鏡法,甚至考慮重新調(diào)整管型數(shù)據(jù)參考值,以保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確性及管型分類。

        同時本研究還發(fā)現(xiàn)一部分干化學(xué)法尿液蛋白陰性,但是UF-1000i檢測管型陽性,人工鏡檢也確實檢出各種管型。究其原因[13]主要是干化學(xué)法測定尿蛋白存在干擾因素較多,浸液時間過長和過短都會出現(xiàn)假陰性。出現(xiàn)假陰性的原因[13]:(1) 干化學(xué)試帶法測定的蛋白只針對白蛋白為主,對球蛋白、T-H 糖蛋白及 B-J 蛋白均不敏感。(2) 試紙法尿蛋白的原理為 pH 指示劑蛋白誤差原理,當(dāng) pH值≤3或者其他一些藥物如大劑量青霉素、慶大霉素、含碘造影劑可致假陰性。(3)試帶法需要足夠的反應(yīng)和標(biāo)本量,若浸泡時間過短或過長,導(dǎo)致試帶上試劑被洗脫,標(biāo)本量不足、反應(yīng)不完全均可造成假陰性。針對以上假陰性原因若UF-1000i檢測發(fā)現(xiàn)管型及病理管型,應(yīng)用人工顯微鏡檢法加以確認(rèn)。若人工顯微鏡檢法確認(rèn)有管型,可根據(jù)管型形成條件可認(rèn)為干化學(xué)試紙法尿蛋白陰性結(jié)果為假陰性。此外本研究也發(fā)現(xiàn)0.28%標(biāo)本,UF-1000i分析儀檢測管型陰性,但是干化學(xué)AX4030檢測尿液蛋白陽達(dá)2+以上,尿液PH為酸性,經(jīng)人工顯微鏡鏡檢存在管型。這部分假陰性歸因于管型短小或溶解,或者標(biāo)本的電導(dǎo)率低出現(xiàn)漏診[3]及管型內(nèi)顆粒無法被熒光染料染色造成儀器漏檢[14]。

        對于UF-1000i分析儀檢測尿液管型假陽性,假陰性情況,以及UF-1000i分析儀對管型只能定量分析,無法區(qū)分管型類型,要區(qū)分則只能依靠人工顯微鏡法。我們建議建立一套完整的管型鏡檢規(guī)則以彌補(bǔ)UF-1000i分析儀檢測管型存在局限性。本室目前采用鏡檢規(guī)則[15]:(1)AX4030尿液蛋白質(zhì)陰性,UF-1000i分析儀管型或者病理管型陽性即鏡檢,對于此種情況本研究團(tuán)隊也試圖重新建立相應(yīng)參考值,提高鏡檢效率。(2)AX4030尿液蛋白質(zhì)陽性2+以上,尿液PH為酸性,UF-1000i分析儀管型或者病理管型陽性即鏡檢。(3)AX4030尿液蛋白質(zhì)陽性2+以上,尿液PH為酸性, UF-1000i尿沉渣分析儀管型或者病理管型陰性,依據(jù)臨床診斷及檢驗師自己職業(yè)判斷標(biāo)本適當(dāng)加以人工顯微鏡鏡檢管型存在與否。(4)AX4030、UF-1000i分析儀兩者檢測均為陰性,直接報告陰性??梢奤F-1000i分析儀聯(lián)合AX4030干化學(xué)分析儀只要增加合適的鏡檢規(guī)則,對管型檢測即可起到優(yōu)化檢出作用[16]。此外我們提倡應(yīng)嚴(yán)格把控尿液送檢時間,應(yīng)控制在2h以內(nèi),以減少室溫時間過長導(dǎo)致尿液結(jié)晶析出,細(xì)菌、黏液絲產(chǎn)生,導(dǎo)致管型檢測假陽性的出現(xiàn)。并且在人工鏡檢同時充分應(yīng)用UF-1000i分析儀管型散點圖優(yōu)勢對管型類型加以區(qū)別分類。

        綜上所述,UF-1000i尿液分析儀測定尿液管型有一定先進(jìn)性,但由于儀器局限性仍存在一定的假陽性、假陰性,且無法對管型可靠高效分類。人工顯微鏡鏡檢法仍是尿液管型檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但鑒于人工鏡檢法需進(jìn)行離心處理,費時、精確度差,結(jié)果容易受檢驗技師細(xì)胞形態(tài)學(xué)水平影響,無法滿足大批量樣本檢測需求。故目前大醫(yī)院檢驗科急需尿液儀器開發(fā)商研制出更先進(jìn)的尿液有形成分儀器,或者進(jìn)一步優(yōu)化升級現(xiàn)有儀器,以期為臨床提供更為準(zhǔn)確可靠的管型檢測數(shù)據(jù),減少檢驗技師人工鏡檢率,提高檢驗科檢測效率。

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