(鄭州鐵路職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南 鄭州 450052)

我國屬于食管癌的高發(fā)區(qū)域，河南省的林州市發(fā)病率尤其高，這對人民的健康安全造成了嚴(yán)重危害，食管癌早期經(jīng)過正規(guī)的治療，具有較好的療效，患者生活質(zhì)量較高，長期生存率也很高[1]。因此，尋找一種高效的早期食管癌診斷方法是目前亟待解決的問題。血紅素氧合酶1(heme oxygenase-1, HO-1)屬于HO家族中較為重要的一種，在細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、細(xì)胞核等部位均存在一定量的表達(dá)。HO-1與腫瘤的新生血管、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等關(guān)系密切[2]?；|(zhì)金屬蛋白酶10(matrix metalloproteinases-10，MMP-10)是MMPs家族中較為重要的一員，能降解細(xì)胞外基質(zhì)，在腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移等病理生理學(xué)過程中具有關(guān)鍵作用[3]。本研究采用免疫組化S-P法檢測了食管鱗癌組織中HO-1和MMP-10的表達(dá)，以尋找食管癌的早期診斷方案，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本來源入組2015年5月至2017年8月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院腫瘤科收治的經(jīng)病理學(xué)證實的食管鱗癌患者120例,其中男82例, 女38例;年齡29～81歲, 中位年齡59歲;分化程度:高分化50例，中分化43例，低分化27例；浸潤纖維膜：無43例，有77例；TNM分期：Ⅰ期23例，Ⅱ期40例，Ⅲ期52例，Ⅳ期5例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：無55例，有65例。收集我院同期收治的50例癌旁正常食管黏膜組織標(biāo)本作為對照，其中男37例，女23例；年齡31～76歲，中位年齡57歲。

1.2HO-1和MMP-10的免疫組化檢測[4-5]采用免疫組化S-P法檢測120例食管鱗癌和60例癌旁正常食管黏膜組織中HO-1和MMP-10的表達(dá)，以已知陽性組織作為陽性對照，以PBS代替一抗作為陰性對照。S-P免疫組化試劑盒以及鼠抗人HO-1和MMP-10抗體等均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.3免疫組化結(jié)果評判2組每張切片均隨機選取5個高倍鏡(×400)視野，綜合染色強度和陽性細(xì)胞比例進行評分，陽性細(xì)胞數(shù)≤5%計0分，6%～25%計1分，26%～50%計2分，51%～75%計3分，76%～100%計4分；染色強度：無染色計0分，淡黃色計1分，棕黃色計2分，棕褐色計3分。然后兩者乘積作為結(jié)果，0分為(-)，1～3為(±)，4～6為(+)，7～12為(++)，其中(-)、(±)為陰性，(+)、(++)為陽性。所有切片的染色情況均由2位副主任醫(yī)師職稱以上病理科醫(yī)生獨立評判，然后進行綜合。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 19.0進行統(tǒng)計分析，2種指標(biāo)的陽性表達(dá)率等計數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)表示，比較用χ2檢驗，2種指標(biāo)的相關(guān)性分析用Spearman相關(guān)分析法，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1不同食管組織中HO-1和MMP-10表達(dá)的比較食管鱗癌組織中HO-1和MMP-10的陽性表達(dá)率分別為49.2%(59/120)、45.0%(54/120)，癌旁正常食管黏膜組織中分別為1.7%(1/60)、0.0%(0/60)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=40.613、38.571，P均<0.001)。

2.2食管鱗癌組織中HO-1和MMP-10的表達(dá)與其臨床病理參數(shù)的關(guān)系食管鱗癌組織中HO-1和MMP-10的表達(dá)均與其浸潤纖維膜與否、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否有關(guān)(P均<0.05)。見表1。

表1 食管鱗癌組織中HO-1和MMP-10的表達(dá)與其臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3食管鱗癌組織中HO-1和MMP-10表達(dá)的相關(guān)性食管鱗癌組織中HO-1和MMP-10的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(rs=0.618，P<0.001)。見表2。

表2 食管鱗癌組織中HO-1和MMP-10表達(dá)的相關(guān)性

3 討論

食管癌在我國，特別是河南省林州市，處于高發(fā)水平，發(fā)病率很高，也對當(dāng)?shù)厝嗣袢罕姷慕】蛋踩斐闪藝?yán)重的傷害。目前，食管癌臨床診治中最大的問題是不能早期發(fā)現(xiàn)，從而導(dǎo)致確診患者大多處于中晚期，失去了根治性手術(shù)切除的機會。因此，尋找早期診斷出食管癌的高效方案是臨床上提高食管癌治愈率的關(guān)鍵步驟。腫瘤組織新生血管形成和周圍組織的浸潤是腫瘤進展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[6]。HO-1與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、腫瘤浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等腫瘤進展的生物學(xué)行為關(guān)系密切，HO-1可促進腫瘤部位內(nèi)皮祖細(xì)胞的分化及向血管內(nèi)皮細(xì)胞的進化，進而促進血管生成[7]。張健等[8]的研究發(fā)現(xiàn)，HO-1在食管癌組織中存在高表達(dá)，且與食管癌的浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、新生血管形成等關(guān)系密切。MMP-10是MMPs家族的一員，能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)，打破細(xì)胞生物膜的屏障作用，進而促進腫瘤的周圍浸潤和遠(yuǎn)處的轉(zhuǎn)移[9]。楊國濤等[10]的研究證實，MMP-10在食管癌中存在高表達(dá)，且與食管癌的分化程度、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。因此，通過上述分析我們可以發(fā)現(xiàn)，HO-1和MMP-10可能對食管癌的早期診斷具有重要的價值。本研究結(jié)果顯示，食管鱗癌組織中HO-1和MMP-10的陽性表達(dá)率分別為49.2%(59/120)、45.0%(54/120)，癌旁正常食管黏膜組織中分別為1.7%(1/60)、0.0%(0/60)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=40.613、38.571，P均<0.001)。食管鱗癌組織中HO-1和MMP-10的表達(dá)與浸潤纖維膜與否、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否有關(guān)(P均<0.05)。食管鱗癌組織中HO-1和MMP-10的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(rs=0.618，P<0.001)。綜上所述，HO-1和MMP-10在食管鱗癌組織中均存在高表達(dá)，兩者聯(lián)合檢測可用于食管癌的臨床診斷。