禹子鳳

我國目前茶產(chǎn)品質(zhì)量安全較為突出的是農(nóng)藥殘留、重金屬元素、有害微生物等超標(biāo)問題。茶葉是一種葉用的經(jīng)濟(jì)作物。在茶樹生長旺季，特別是病蟲害發(fā)生的旺季，為提高茶葉的產(chǎn)量和質(zhì)量，茶農(nóng)需要用化學(xué)農(nóng)藥防治病蟲害。但一些茶農(nóng)不按規(guī)定的用藥量、用藥次數(shù)、用藥方法和安全間隔期施藥甚至將不允許在茶樹上使用的劇毒、高毒農(nóng)藥拿來使用，由此產(chǎn)生了非常嚴(yán)重的社會(huì)問題。

昌寧縣茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，茶葉生產(chǎn)加工技術(shù)和推廣力度都有很大提升，因此開展茶鮮葉農(nóng)藥殘留檢測，加強(qiáng)茶樹種植管理和茶原料的監(jiān)管非常有必要。為此對昌寧縣主要產(chǎn)茶區(qū)進(jìn)行抽樣檢查茶葉中的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量，以監(jiān)管和提高昌寧縣茶產(chǎn)品質(zhì)量安全水平。選用RP-410農(nóng)殘速測儀對樣品進(jìn)行隨機(jī)檢測。

1茶葉中農(nóng)藥殘留的現(xiàn)狀

1.1農(nóng)藥的種類

農(nóng)藥根據(jù)其用途可以分為殺蟲劑、殺瞞劑、殺菌劑、除草劑以及植物生長調(diào)節(jié)劑等根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)又可分為有機(jī)氯殺蟲劑、有機(jī)磷殺蟲劑、擬除蟲菊酷類和氨基甲酸酷類殺蟲劑等。重點(diǎn)介紹一下有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。

1.1.1有機(jī)磷農(nóng)藥

有機(jī)磷農(nóng)藥為殺蟲劑、殺蝸劑，使用較廣泛，多數(shù)易氧化、水解、異構(gòu)化。有機(jī)磷農(nóng)藥引起中毒的作用機(jī)理是抑制了體內(nèi)的膽堿酷酶，使其失去了分解乙酞膽堿的能力，從而造成體內(nèi)乙酞膽堿的積累，刺激了中樞神經(jīng)系統(tǒng)，使各項(xiàng)功能失調(diào)，引起生理紊亂，因此對茶葉中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測是十分必要的。

1.1.2氨基甲酸酯類農(nóng)藥

氨基甲酸酷類農(nóng)藥毒作用機(jī)理與有機(jī)磷農(nóng)藥相似，主要是抑制膽堿酯酶活性，使酶活性中心絲氨酸的羥基被氨基甲酰化，因而失去酶對乙酞膽堿的水解能力。氨基甲酸酯類農(nóng)藥不需經(jīng)代謝活化，即可直接與膽堿酯酶形成疏松的復(fù)合體。由于氨基甲酸酷類農(nóng)藥與膽堿酯酶結(jié)合是可逆的，且在機(jī)體內(nèi)很快被水解，膽堿酯酶活性較易恢復(fù)，故其毒性作用較有機(jī)磷農(nóng)藥中毒為輕。但多數(shù)氨基甲酸酯類農(nóng)藥，在施用后不長時(shí)間內(nèi)就會(huì)被降解為相應(yīng)的代謝產(chǎn)物，其代謝產(chǎn)物通常具有與母體氨基甲酸酯類農(nóng)藥相同或更強(qiáng)的生物活性。氨基甲酸酯類農(nóng)藥可經(jīng)呼吸道、消化道侵入機(jī)體，也可經(jīng)皮膚粘膜緩慢吸收，主要分布在肝、腎、脂肪和肌肉組織中。

2檢測方法

2.1檢測原理

根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下膽堿酯酶催化碘化硫代丁酰膽堿水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在412nm處測定吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。

2.2試劑的配置

2.2.1 pH8.0緩沖溶液：分別取11.9g無水磷酸氫二鉀與3.2g磷酸二氫鉀，用1000ml蒸餾水溶解

2.2.2 顯色劑：分別取160mg二硫代二硝基苯甲酸和15.6mg碳酸氫鈉，用20ml緩沖溶液溶解，4℃冰箱中保存。

2.2.3 底物：取25.0mg硫代乙酰膽堿，加3.0ml蒸餾水溶解，搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆?。保存期不超過兩周。

2.2.4 乙酰膽堿酶：根據(jù)酶的活性情況，用緩沖溶液溶解，3min的吸光度變化△A0值應(yīng)控制在0.3以上。搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆?。保存期不超過四天。

3分析步驟

3.1樣品處理

選取采摘的茶樹鮮葉樣品，沖洗干凈，剪成1cm左右見方碎片，取樣品1g，放入燒杯中，加入5ml緩沖溶液，振蕩1min～2min，倒出提取液，靜置3min～5min，待用。

3.2對照溶液測試

先于試管中加入2.5ml緩沖溶液，再加入0.1ml酶液、0.1ml顯色劑，搖勻后于37℃放置16min。加入0.1ml底物搖勻，此時(shí)檢測液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入儀器比色池中，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值△A0。

3.3樣品溶液測試

先于試管中加入2.5ml樣品提取液，其他操作與對照液測試過程相同，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值△At。

4結(jié)果計(jì)算及結(jié)果判斷

4.1結(jié)果計(jì)算

抑制率（%）=[（△A0-△At）/△A0]×100

式中：

△A0—對照溶液反應(yīng)3min的吸光度變化值；

△At—樣品溶液反應(yīng)3min的吸光度變化值。

4.2結(jié)果判定

結(jié)果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，當(dāng)茶鮮葉樣品提取液對酶的抑制率≥50%時(shí)，表示茶鮮葉中有高劑量有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在。需重復(fù)檢驗(yàn)2次以上。。

通過結(jié)果分析得出，在隨機(jī)抽取的昌寧縣8個(gè)主要產(chǎn)茶區(qū)的茶樹鮮葉選用RP-410農(nóng)殘快速檢測儀進(jìn)行檢測，未發(fā)現(xiàn)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留超標(biāo)的現(xiàn)象。

RP-410農(nóng)殘速測儀對測定有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量具有很高的效率，用時(shí)較短，操作方便簡潔。但僅限于檢測有機(jī)磷與氨基甲酸酯類兩類，且高農(nóng)殘才能反應(yīng)出來，低殘留的科學(xué)依據(jù)性不明顯。因此做好茶葉農(nóng)殘的防控更為重要，可采取以下措施：堅(jiān)決杜絕茶葉農(nóng)殘?jiān)搭^，禁用茶園不能使用的農(nóng)藥；茶園大力示范推廣無農(nóng)殘的生物防治技術(shù)；實(shí)行科學(xué)用藥，酌情使用高效、低毒、低殘留的化學(xué)農(nóng)藥；加強(qiáng)無公害茶葉、茶葉綠色食品、有機(jī)茶生產(chǎn)基地建設(shè)；強(qiáng)化茶葉農(nóng)殘檢測監(jiān)控。

（作者單位：678100 云南保山昌寧縣茶葉技術(shù)推廣站）