于洋 李夢婷 蘇耀華

摘? 要：為了解厚樸提取物對4種病原真菌的抑制作用，本研究采用生長速率法測定了厚樸提取物對葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）、細交鏈孢菌（Alternaria alternate）、污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae）的抑制作用并利用數(shù)據(jù)處理軟件DPS分析了相關數(shù)據(jù)，結(jié)果表明厚樸乙醇提取物對4種病原真菌都有一定程度的抑制，其中對污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）的抑制作用最好，EC50值為0.0000069mg/mL，其次為細交鏈孢菌（Alternaria alternate）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana），EC50值分別為0.0009、0.0208，抑制效果最差的為香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae），EC50值為0.1327 mg/mL;另外比較不同真菌毒力方程斜率，發(fā)現(xiàn)香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）對厚樸提取物敏感性較好，污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、細交鏈孢菌（Alternaria alternate）敏感性較差。

關鍵詞： 厚樸;抑制作用;DPS;敏感性

中圖分類號：Q939.95? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.11974/nyyjs.20181032016

厚樸屬于木蘭科的一種喬木，主要分布地是在陜西、甘肅、四川、貴州等，生在大山跟路邊的雜草叢中，厚樸全身都是寶，全身每個部位幾乎都可以入藥[1-3]。厚樸中的活性成分豐富多樣，厚樸中含酚類、生物堿類和揮發(fā)油類等成分，厚樸酚是其主要活性成分[4]?，F(xiàn)在人們對厚樸的研究不斷深入，發(fā)現(xiàn)了很多有用的成分，厚樸中活性物質(zhì)的提取研究非常之多[5，6]，可以為厚樸活性物質(zhì)的不斷發(fā)掘充分充分利用給予幫助。

DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)是由我國獨立開發(fā)的集數(shù)據(jù)處理，制表繪圖等多種功能的數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。常用的數(shù)據(jù)處理軟件有EXCEL、SPSS等，這些處理軟件只具有基礎的分析功能，SPSS進行方差分析時，得出的結(jié)果不夠直觀，另外有好多英文版本，使用時多有不便，而DPS很好的克服了這些問題，既能夠處理基礎數(shù)據(jù)，又能進行專業(yè)的分析，得出的結(jié)果讓人一目了然。DPS被很多科研工作者所喜愛，如孟藝瑋等[7]采用DPS分析玉米秸稈的傳熱系數(shù)，徐偉等[8]利用DPS完美的實現(xiàn)了對隔異常值數(shù)據(jù)的檢測。

目前，植物病害的預防大部分還得靠化學藥物[9]。然而，長期大量施用化學農(nóng)藥導致農(nóng)藥殘留及環(huán)境污染，危害人類健康并破壞生態(tài)平衡，同時也使病原菌產(chǎn)生了嚴重的抗藥性。因此，探尋其他環(huán)保、環(huán)境友好型防治方法已刻不容緩，還有待加大植物性抗菌活性物質(zhì)的基礎研究，以便于能夠研發(fā)更多具有植物性殺菌劑的品種。鑒于此，本試驗對厚樸植物進行提取，測定厚樸活性成分對不同真菌的抑菌活性，并用DPS分析了相關數(shù)據(jù)，旨為開發(fā)針對植物有害真菌的植物源農(nóng)藥提供科學依據(jù)。

1? ? ? 材料與方法

1.1? ? ?材料

供試病原菌：葡萄座腔菌（Botryosphaeria berenger-iana）、細交鏈孢菌（Alternaria alternate）、污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae）。

1.2? ? ?方法

1.2.1? ? ?抑菌活性成分的提取

采用高雯等[10]厚樸酚類的提取方法濃縮后獲得濃度為1g/mL的母液，再將母液稀釋為5種不同濃度梯度，分別為0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 g/mL。

1.2.2? ? ?抑菌活性測定

在這里測定厚樸乙醇提取物對4種病原真菌的抑菌活性使用了生長速率法[11]。

1.2.3? ? ?數(shù)據(jù)處理與分析

通過DPS 7.05進行統(tǒng)計分析并求得毒力回歸方程及EC50。

以葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）數(shù)據(jù)為例對軟件進行操作，將數(shù)據(jù)按照圖1方式輸入DPS中，對數(shù)據(jù)進行選定，然后按照流程進行操作，選擇專業(yè)統(tǒng)計→生物測定→數(shù)量型數(shù)據(jù)機值分析，即可得到圖2所示結(jié)果，關閉圖形可得到EC50數(shù)值。

2? ? ?結(jié)果與分析

從圖3和表1可以看出厚樸乙醇提取物對4種植物病原真菌都有一定的抑制作用，隨著濃度的增加對4種病原真菌的抑制作用也在增強。其中對污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）的抑制作用最好，在5種濃度下其抑菌率都在90%以上，EC50值為0.0000069mg/mL，

其次為細交鏈孢菌（Alternaria alternate）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）、香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae），EC50值分別為0.0009、0.0208、0.1327mg/mL。

在毒力方程中斜率取決于厚樸提取物作用于病原真菌的敏感性的大小，兩者呈正比關系，按照此原理可判斷病原真菌對厚樸提取物的敏感性大小。可以看出香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae）和葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）的斜率較大分別為0.8501、0.7655，表明這2種病原真菌對厚樸提取物較敏感;其次污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、細交鏈孢菌（Alternaria alternate）其毒力方程斜率較小，表明這2種病原真菌對厚樸提取物敏感性低。

3? ? 討論

研究表明厚樸乙醇提取液對葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）、細交鏈孢菌（Alternaria alternate）、污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae）具有不同程度的抑制作用，其中抑制效果最好的是污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans），最差的是香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae），通過比較不同真菌毒力方程中斜率大小，得出香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）對厚樸提取物敏感性較好，出污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、細交鏈孢菌（Alternaria alternate）敏感性較差。本試驗主要是采用藥用植物提取物來抑制幾種近期以來發(fā)生的特別嚴重的植物病害，為生物性藥物的進一步研發(fā)和推廣提供基本的理論依據(jù)根本目的是用生物性藥物代替化學農(nóng)藥。另外有研究表明茶多酚與茶皂素混合可以明顯提高抑菌效果[12]，是否厚樸提取物與另一種抗菌物質(zhì)混用具有更好的抑菌效果有待進一步研究。本文實驗結(jié)果也主要是在實驗室當中測定的理論數(shù)據(jù)，厚樸提取物在田間對真菌性病害的作用還有待進一步的研究。

本實驗中利用DPS軟件快速簡單的分析了相關的數(shù)據(jù)，形象生動的得出實驗結(jié)果。另外DPS在方差分析，水文分析，生物進化分質(zhì)分類分析，地理分析方面具有很不錯的表現(xiàn)，與國外其他軟件相比更加符合中國人的習慣，是科研工作者進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析的一款十分強大的軟件。

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