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        雞新城疫免疫血清學監(jiān)測

        2018-12-18 09:29:56
        獸醫(yī)導刊 2018年23期
        關鍵詞:土雞血凝新城疫

        劉金玲/河北省盧龍縣潘莊動物防疫站

        雞新城疫(ND)俗稱雞瘟,是由雞新城疫病毒引起的雞的一種高度接觸性、急性、烈性傳染病。最早發(fā)生于印度尼西亞的爪哇和英國的新城(Newcastle),1927年Doyle首次分離病原,并將該病命名為新城疫。目前,該病已廣泛流行與我國所有養(yǎng)雞地區(qū),在家禽病毒病中,它的流行和危害性占首位。雞患新城疫常呈現(xiàn)敗血癥經(jīng)過,主要特征是呼吸困難,下痢,神經(jīng)機能紊亂,黏膜和漿膜出血。

        雞新城疫抗體水平較低或未經(jīng)免疫接種的雞群,發(fā)病率和死亡率可達80%~100%,免疫雞群的抗體水平中等時,發(fā)病率和死亡率的變化較大,低者只有2%~7%,稍高者可達20%~40%。在大中型養(yǎng)雞場,雞群有一定的抵抗力的情況下,雞新城疫主要是以一種非典型的形式出現(xiàn),應引起重視。

        本次實驗調(diào)查采用的是獸醫(yī)實驗室常用的方法,血凝實驗(HA)和血凝抑制實驗(HI),新城疫抗體水平檢測使用該方法特異性好,操作方便,可同時進行大量的樣品檢測,對實驗環(huán)境要求不高等特點。

        血凝實驗(HA)和血凝抑制實驗(HI)是獸醫(yī)實驗室常用的方法之一,新城疫抗體水平檢測使用該方法特異性好,操作方便,可同時進行大量的樣品檢測,對實驗環(huán)境要求不高等特點。但是,血凝實驗(HA)與血凝抑制實驗(HI)實驗也受很多因素的影響,由于影響因素復雜,不可能完全排除,但是,本次實驗結果數(shù)據(jù)都是每個樣品進行反復多次實驗得出的數(shù)據(jù)。

        一、材料和方法

        (一)被檢血清

        從4個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的養(yǎng)殖戶場里或農(nóng)戶家里20個養(yǎng)雞場(戶)共計140只雞進行血液采集,其中合同肉雞20只,規(guī)模場蛋雞20只,圈養(yǎng)土雞20只,林下放養(yǎng)土雞50只,農(nóng)戶散養(yǎng)土雞30只。采集后的血液樣品靜置凝固后自然析出血清,析出血清少的,用離心機進行離心后把血清離心出來。

        (二)檢測材料

        標準抗原(HA抗原)、1%雞紅細胞懸液、生理鹽水、96孔V型板、微量移液器

        本次實驗方法是使用已知抗原檢測未知抗體,通過血凝實驗(HA)和血凝抑制實驗(HI)測出被檢血清中的抗體滴度。

        1.血凝實驗(HA)。先用血凝實驗(HA),測出標準抗原的血凝價單位。25μl生理鹽水→標準抗原25為微升→25μl生理鹽水→1% RBC懸液25μl→震蕩后在37℃恒溫箱靜置30 min等待結果。

        結果顯示抗原血凝價為1∶256

        2.配制4?HAU抗原。通過血凝實驗(HA)測定,標準抗原為8 log,那么配制4 HAU抗原需要稀釋倍數(shù)為6倍。

        3.血凝抑制試驗(HI)。接著血凝實驗(HA),繼續(xù)做下一檢測步驟。生理鹽水25μl(12孔50μl)→第一孔加入25μl,反復吸取6~8次,取25μl加入第二孔,第二孔反復吸取6~8次,取25μl加入第三孔,如此依次至10孔,10孔取25μl丟棄?!尤? HAU抗原25μl,從第一孔加至11孔。→震蕩1 min,靜置培養(yǎng)20 min?!尤?%雞紅細胞懸液25μl,加至12孔,震蕩20 s,靜置培養(yǎng)等待結果。

        二、結果

        (一)不同雞場新城疫血清陽性率

        通過HA和HI實驗對不同雞場采集的血清進行檢測,結果表明,在被檢測的140個血清樣品中,共檢出陽性數(shù)為129份,陽性率為92.14%,其中合同肉雞陽性率100%,規(guī)模場蛋雞陽性率100%,圈養(yǎng)土雞陽性率100%,林下放養(yǎng)土雞陽性率100%,農(nóng)戶散養(yǎng)土雞陽性率63.3%。

        (二)不同日齡雞群的抗體水平

        在被檢測的140個血清樣品中,共檢出陽性129份。抗體水平滴度高的達到12 log2,低的為0,大多數(shù)都在6~10 log2之間。0~2 log2占7.3%,3~5 log2占10%,6 ~ 10 log2占 77.3% ,10 log2以上的占 5.4%。

        表1 樣品抗體分布情況統(tǒng)計表

        表2 樣品抗體滴度統(tǒng)計表

        三、討論與分析

        分析檢測結果,發(fā)現(xiàn)這些雞場雞新城疫抗體水平不整齊,特別是農(nóng)戶散養(yǎng)土雞,抗體滴度差距大,抗體保護力高低不等。圈養(yǎng)土雞抗體滴度明顯過高,經(jīng)詢問養(yǎng)戶,得知該雞群采取的免疫是飲水免疫(C30)和頸部皮下(新城疫油乳滅火苗Lasota株)注射同時做,所以抗體水平處于高位水平也屬正常,但是同群雞只之間存在個體差異,可能存在野毒感染或者免疫過程存在缺陷。林下放養(yǎng)土雞,存在抗體水平高低不齊的狀態(tài),近36%的雞只抗體水平屬于偏低,不具有足夠的保護力。合同肉雞由于其養(yǎng)殖周期比較短,抗體水平基本處于中等水平,但是其保護力還是存在缺陷。經(jīng)養(yǎng)戶同意,隨機解剖兩只發(fā)病雞只,其臨床表現(xiàn)為雞冠變薄,萎縮,精神呆滯,食欲較差,輕微咳嗽,拉黃綠色糞便。解剖病變?yōu)楦闻K腫大,腺胃變薄、變軟,乳頭之間有出血,刀刮后出血明顯,氣囊輕微渾濁,表現(xiàn)為氣囊炎癥狀,腹腔有纖維樣分泌物,盲腸扁桃體腫脹出血,氣管粘膜充血,有粘液性分泌物。初步診斷為雞新城疫感染繼發(fā)大腸桿菌病。

        參考文獻(略)

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