楊燕妮，王 毅，孫曉波，匡海學(xué)，姜 海，曹景文，王艷紅，劉恩臨，舒尊鵬,

(1. 廣東藥科大學(xué)中藥學(xué)院，廣東 廣州 510006；2. 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所，北京 100193；3. 黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)教育部北藥基礎(chǔ)與應(yīng)用研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，黑龍江 哈爾濱 150040；4. 哈爾濱市康隆藥業(yè)有限責(zé)任公司，黑龍江 哈爾濱 150025)

炎寧糖漿(國(guó)藥準(zhǔn)字Z20090915)為哈爾濱市康隆藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)的一味中成藥，收載于2015版《中國(guó)藥典》，由玄參科鹿茸草屬多年生草本植物鹿茸草MonochasmasheareriMaxim.ex Franch.、鴨跖草科鴨跖草屬多年生草本植物鴨跖草Commelinacommunis、茜草科耳草屬多年生草本植物白花蛇舌草HedyotisdiffusaWilld.三味中藥組成，具有清熱解毒、消炎止痢的功效，臨床上用于上呼吸道感染、扁桃體炎、尿路感染、急性菌痢、腸炎等多種炎癥型疾病[1-2]。

現(xiàn)代研究表明，鹿茸草具有抗炎、止咳作用[3]，其主要化學(xué)成分為苯乙醇苷類、黃酮類等[4]；鴨跖草具有抗炎[5]、鎮(zhèn)痛、止咳、抗氧化、抗流感病毒、保肝等藥理作用，含黃酮類、生物堿類、香豆素類、萜類、甾體等成分[2,6]；白花蛇舌草具有抗癌、抗氧化、抗炎等藥理作用，其主要化學(xué)成分為萜類、黃酮類、蒽醌類、多糖類等[7]?；谘讓幪菨{的抗炎系統(tǒng)藥效研究未見報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)分別在體內(nèi)及體外炎癥模型中，探討炎寧糖漿及其單味藥的抗炎作用及相關(guān)機(jī)制，旨在為炎寧糖漿的臨床應(yīng)用提供一定的科學(xué)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)，ICR小鼠體質(zhì)量(20±2)g，SD大鼠體質(zhì)量(180±10)g，♀♂各半，由廣東藥科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)分別為SCXK(粵)20170029和SCXK(粵)20170119。所有小鼠和大鼠均分籠，并飼養(yǎng)于廣東藥科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后開始實(shí)驗(yàn)。飼養(yǎng)條件：溫度(25±1)℃，相對(duì)濕度(45±5)%，光暗各12 h，自由進(jìn)食飲水。

1.2藥物與試劑

1.2.1藥物 炎寧糖漿組成所需的3種藥材由哈爾濱市康隆藥業(yè)有限責(zé)任公司提供，并由廣東藥科大學(xué)中藥學(xué)院中藥資源系李書淵教授鑒定為：玄參科鹿茸草屬多年生草本植物鹿茸草(MonochasmasheareriMaxim. ex Franch.)，茜草科耳草屬多年生草本植物白花蛇舌草(HedyotisdiffusaWilld.)，鴨跖草科鴨跖草屬多年生草本植物鴨跖草(Commelinacommunis)。樣本留存在廣東藥科大學(xué)中藥學(xué)院(樣品號(hào)分別為20170712A、20170712B和20170712C)。阿司匹林購(gòu)自濟(jì)南永寧制藥股份有限公司，產(chǎn)品批號(hào)為170904。

1.2.2細(xì)胞株與試劑 人單核巨噬細(xì)胞株THP-1細(xì)胞，購(gòu)自上海中國(guó)科學(xué)院細(xì)胞所；10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)液購(gòu)自Gibco公司；IκBα (6A920)、NF-κB p65 (C-20)、TBP (H-102)抗體，購(gòu)自Santa Cruz公司；誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS) (V1131)、環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)(L20)抗體，購(gòu)自Bioworld公司；β-actin抗體購(gòu)自博士德公司；內(nèi)毒素(lipopolysaccharide，LPS)購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；四甲基偶氮唑鹽(MTT)溶液購(gòu)自美國(guó)Fluka公司；IL-6、IL-1β、TNF-α 酶聯(lián)免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)試劑盒，均購(gòu)自南京凱基公司；一氧化氮(nitric oxide，NO)、前列腺素E2(prostaglandin E2，PGE2)檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自碧云天生物技術(shù)研究所；BCA蛋白測(cè)定試劑盒購(gòu)自美國(guó)Thermo公司。

1.3實(shí)驗(yàn)儀器XS-402型生物顯微鏡(江南光電集團(tuán)股份有限公司)；FC全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀、Heracell VIOS二氧化碳培養(yǎng)箱(美國(guó)Thermo 公司)；DYCP-31-34瓊脂糖水平電泳槽(北京六一儀器廠)；半干式轉(zhuǎn)膜槽(美國(guó) Bio-Rad 公司)；Odyssey 近紅外熒光掃描成像系統(tǒng)(美國(guó) LI-COR 公司)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1藥品制備按2015版《中國(guó)藥典》進(jìn)行藥品提取濃縮，即三味中藥按照鹿茸草、白花蛇舌草和鴨跖草2 ∶1 ∶1的比例(共200.0 g)，加水回流煎煮兩次，第1次煎煮1.5 h，第2次煎煮1 h，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.10，加乙醇使含醇量達(dá)到60%，攪勻，靜置12 h，濾過，減壓揮干成粉(16.0 g，出膏率8.0%)。另取鹿茸草、白花蛇舌草、鴨跖草藥材各200 g，按上述方法制備，分別得到干粉11.8 g(出膏率5.90%)、16.4 g(出膏率8.20%)和17.9 g(8.95%)，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2.2細(xì)胞培養(yǎng)在37℃、5% CO2培養(yǎng)條件下，使THP-1細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)于RPMI 1640培養(yǎng)基(培養(yǎng)基中含10%胎牛血清、100 kU·L-1青霉素、0.1 g·L-1鏈霉素和2 mmol·L-1L-谷氨酰胺)。根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，每2～3 d換液1次，采用半量換液或者離心重懸的方法，維持細(xì)胞生長(zhǎng)濃度在1×108～1×109·L-1。

2.3MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力將分散均勻的細(xì)胞懸液加入96孔板中，濃度為每孔105個(gè)細(xì)胞。將接種好的細(xì)胞培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。次日離心吸出培養(yǎng)液，加入6個(gè)濃度梯度的總提取物和3種單味藥提取物(分別為0.2、1、5、25、125、625 mg·L-1)，每孔100 μL，每個(gè)濃度設(shè)6個(gè)復(fù)孔。設(shè)置調(diào)零孔(0.1% DMSO的PBS液)、對(duì)照孔(MTT)和加藥孔。繼續(xù)培養(yǎng)24 h。次日培養(yǎng)板高速離心，取出上清液后，每孔加入10 μL MTT溶液(5 g·L-1)，繼續(xù)培養(yǎng)4 h。終止培養(yǎng)，以MTT試劑盒中的溶解液溶解結(jié)晶。培養(yǎng)箱中放置過夜，鏡下觀察，待結(jié)晶全部溶解后，于570 nm測(cè)吸光度。調(diào)零孔的吸光度值設(shè)置為100%。

2.4ELISA測(cè)定細(xì)胞因子取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的THP-1細(xì)胞，用培養(yǎng)基稀釋成約1×109·L-1濃度，接種于6孔板中，每孔2 mL，置37℃、5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)4 h，空白對(duì)照組和模型給藥組加入總提取物、鹿茸草和鴨跖草(25 mg·L-1)孵育12 h，隨后，模型組和模型給藥組分別加入LPS(1 mg·L-1)，每個(gè)濃度設(shè)置6個(gè)復(fù)孔，連續(xù)孵育24 h。收集培養(yǎng)24 h后的THP-1細(xì)胞培養(yǎng)上清，按照TNF-α、IL-1β和IL-6 ELISA試劑盒的說明書操作，在450 nm波長(zhǎng)(630 nm作為參考波長(zhǎng))檢測(cè)吸光度(OD)值，檢測(cè)總提取物、鹿茸草和鴨跖草對(duì)LPS誘導(dǎo)分化的THP-1細(xì)胞因子分泌的影響。

2.5Westernblot檢測(cè)細(xì)胞處理同“2.4”，應(yīng)用含蛋白酶抑制劑PMSF及磷酸酶抑制劑的細(xì)胞裂解液RIPA提取LPS及總提取物(25 mg·L-1)培養(yǎng)6 h后，THP-1細(xì)胞的總蛋白，100℃煮沸5 min，使蛋白充分變性。BCA試劑盒進(jìn)行蛋白定量后，進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳。應(yīng)用濕轉(zhuǎn)法將蛋白轉(zhuǎn)印PVDF膜上，含5%脫脂奶粉的TBST室溫封閉2 h；TBST洗膜后，用TBST稀釋的一抗(1 ∶200)4℃孵育過夜；TBST再次洗膜后，TBST稀釋的HRP標(biāo)記的二抗(1 ∶5 000)室溫孵育1.5 h；最后應(yīng)用ECL發(fā)光試劑盒進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，并根據(jù)目的條帶亮度調(diào)整壓片及曝光時(shí)間。

2.6小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)取健康ICR小鼠，♀♂各半，按體質(zhì)量隨機(jī)分為5組，每組10只小鼠，即模型組、炎寧高劑量組(300.0 mg·kg-1，相當(dāng)于炎寧生藥6.0 g·kg-1)、炎寧中劑量組(150.0 mg·kg-1，相當(dāng)于炎寧生藥3.0 g·kg-1)、炎寧低劑量組(75.0 mg·kg-1，相當(dāng)于炎寧生藥1.5 g·kg-1)和陽(yáng)性對(duì)照組(阿司匹林200.0 mg·kg-1)。各組均灌胃給藥連續(xù)7 d，空白組給予同體積生理鹽水，實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水18 h，最后一次給藥后30 min，在小鼠的右耳正反兩面均勻涂二甲苯0.1 mL，2 h后脫頸椎處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用6 mm打孔器在左、右耳相同部位打孔稱重，記錄腫脹度，右耳重量減去左耳重量即為腫脹度。

耳腫脹抑制率/%=

2.7大鼠足腫脹測(cè)定取健康SD大鼠，♀♂各半，按體質(zhì)量隨機(jī)分為5組，每組10只大鼠，即模型組、炎寧高劑量組(180.0 mg·kg-1，相當(dāng)于炎寧生藥2.25 g·kg-1)、炎寧中劑量組(90.0 mg·kg-1，相當(dāng)于炎寧生藥1.125 g·kg-1)、炎寧低劑量組(45.0 mg·kg-1，相當(dāng)于炎寧生藥0.5625 g·kg-1)和陽(yáng)性對(duì)照組(氫化可的松注射液0.25 mg·kg-1)。各組均灌胃給藥，空白組給同體積生理鹽水，連續(xù)7 d，致炎劑為10%的新鮮蛋清。d 7實(shí)驗(yàn)前大鼠禁食不禁水18 h，將大鼠右后肢固定，在其踝關(guān)節(jié)處用記號(hào)筆作一標(biāo)記，沒過標(biāo)記為界，測(cè)右后肢正常足體積，連續(xù)測(cè)量3次，取平均值，然后灌胃給藥(陽(yáng)性組腹腔注射)，給藥1 h后，右后肢足趾中部皮下注射10%新鮮蛋清0.1 mL，分別在注入致炎劑后1、2、3、4 h測(cè)足體積。

3 結(jié)果

3.1不同濃度總提取物及3個(gè)單味藥對(duì)免疫細(xì)胞活力的影響如Fig 1所示，分別將總提取物及3個(gè)單味藥與免疫細(xì)胞THP-1預(yù)孵育24 h后，鹿茸草和鴨跖草分別在最大濃度(625 mg·L-1)下對(duì)正常免疫細(xì)胞的增殖均無明顯的抑制作用(P>0.05)，而總提取物在125 mg·L-1及白花蛇舌草在5 mg·L-1以上的濃度，表現(xiàn)出抑制細(xì)胞增殖現(xiàn)象，即細(xì)胞毒活性。

Fig 1 Cytotoxicity test in THP-1 n=6 )

*P<0.05,**P<0.01vscontrol group

3.2對(duì)LPS誘導(dǎo)的免疫細(xì)胞中NO、PGE2釋放及iNOS、COX-2表達(dá)的抑制作用如Fig 2所示，在THP-1細(xì)胞中，總提取物、鹿茸草和鴨跖草單獨(dú)孵育THP-1細(xì)胞時(shí)，PGE2均未有變化；但在NO含量的檢測(cè)中，發(fā)現(xiàn)鹿茸草顯示出抑制NO生成的作用。LPS刺激后，總提取物、鹿茸草和鴨跖草均可降低NO和PGE2的釋放。Fig 3結(jié)果顯示，LPS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞后，iNOS和COX-2的蛋白表達(dá)明顯升高，而給藥組蛋白表達(dá)則明顯降低。這些結(jié)果說明，總提取物、鹿茸草和鴨跖草均可減少LPS誘導(dǎo)的NO和PGE2的分泌，其作用機(jī)制主要是通過減低iNOS和COX-2的蛋白表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。

3.3對(duì)LPS誘導(dǎo)的免疫細(xì)胞細(xì)胞因子分泌的抑制作用如Fig 4所示，在THP-1細(xì)胞中，空白對(duì)照組細(xì)胞因子水平處于較低的水平，單獨(dú)給予總提取物(25 mg·L-1)時(shí)，THP-1細(xì)胞并未見細(xì)胞因子分泌量的明顯改變，但單獨(dú)給予鹿茸草和鴨跖草時(shí)，細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β出現(xiàn)抑制現(xiàn)象，與之前的NO生成結(jié)果幾乎一致。進(jìn)一步研究證實(shí)鹿茸草和鴨跖草是否具有免疫抑制活性。經(jīng)LPS孵育，THP-1細(xì)胞上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量明顯增加，與空白對(duì)照組相比有明顯差異(P<0.01)，而加入總提取物、鹿茸草和鴨跖草孵育后，細(xì)胞上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量均明顯降低(P<0.01)。

Fig 2 Inhibitory effects on PGE2(A) and NO(B) releases in LPS-stimulated THP-1 n=6 )

*P<0.05,**P<0.01vscontrol group;##P<0.01vsLPS group

Fig 3 Total cellular protein isolated and LPS-induced iNOS and COX-2 expression levels measured using Western blot analysis n=3)

**P<0.01vscontrol group;#P<0.05vsLPS group

Fig 4 Inhibitory effects on TNF-α(A), IL-1β (B) and IL-6(C) releases in LPS-stimulated THP-1 cells n=6 )

*P<0.05,**P<0.01vscontrol group;##P<0.01vsLPS group

3.4總提取物對(duì)LPS誘導(dǎo)的免疫細(xì)胞中NF-κB通路的影響如Fig 5所示，各組間IκBα總蛋白表達(dá)差異無顯著性。LPS刺激后，THP-1細(xì)胞中p-IκBα蛋白表達(dá)較對(duì)照組明顯升高；總提取物處理后，p-IκBα蛋白表達(dá)與LPS組比較明顯降低。此結(jié)果說明，總提取物對(duì)LPS誘導(dǎo)的THP-1細(xì)胞中IκBα磷酸化蛋白的升高具有抑制作用。LPS誘導(dǎo)后，細(xì)胞核內(nèi)NF-κB的表達(dá)出現(xiàn)差異。當(dāng)總提取物處理時(shí)，其可明顯降低LPS誘導(dǎo)的NF-κB的核轉(zhuǎn)位。此結(jié)果說明，總提取物可能通過抑制NF-κB的核轉(zhuǎn)位，進(jìn)而抑制細(xì)胞因子的表達(dá)。

Fig 5 Inhibitory effects of total extract on NF-κB signaling in LPS-stimulated THP-1 n=3)

**P<0.01vscontrol group;##P<0.01vsLPS group

3.5對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響Tab 1結(jié)果表明，與模型組比較，阿司匹林組和炎寧高劑量組對(duì)二甲苯引起小鼠耳腫脹有很強(qiáng)的抑制作用(P<0.01)，炎寧中、低劑量組也可抑制小鼠耳腫脹(P<0.05)，提示炎寧高、中、低劑量組均能減輕炎癥早期導(dǎo)致的毛細(xì)血管擴(kuò)張、滲出和水腫等作用。

3.6對(duì)蛋清引起的大鼠足腫脹的影響Tab 2結(jié)果表明，給予致炎劑前，各組之間的正常足體積差異無顯著性(P>0.05)。給予致炎劑后，各給藥組在不同時(shí)間段分別同模型組相比，氫化可的松組在2 h以內(nèi)均有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)，但隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，消腫作用有所下降。同樣，炎寧高、中劑量組在致炎后2 h之內(nèi)也表現(xiàn)出差異有顯著性(P<0.05)，炎寧低劑量組在致炎后差異無顯著性(P>0.05)。

Tab 1 Effects of Yanning syrup on ear swelling of mice induced by xylene n=10)

*P<0.05,**P<0.01vsmodel

4 討論

炎寧糖漿因其組方獨(dú)特、療效確切、副作用小而被列為國(guó)家中藥保護(hù)品種[2]，3種單味藥鹿茸草、鴨跖草和白花蛇舌草從古至今各家醫(yī)書也均有記載，如《湖南藥物志》記載：“鹿茸草四錢，水煎兌冰糖服治咳嗽”，《袖珍方》曰：“鴨跖草汁點(diǎn)之可治喉痹腫痛”，白花蛇舌草始載于《廣西中藥志》：“治小兒疳積，毒蛇咬傷，癌腫，外治白泡瘡，蛇癩瘡”。在本文中，通過觀察二甲苯致小鼠耳腫脹和雞蛋清致大鼠足腫脹兩個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)炎寧糖漿總提取物對(duì)急性或炎癥早期的毛細(xì)血管擴(kuò)張、通透性亢進(jìn)、滲出和水腫具有明顯的抑制作用。此外，體外實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)鹿茸草和鴨跖草對(duì)正常免疫細(xì)胞的增殖均無明顯的抑制作用，說明鹿茸草和鴨跖草發(fā)揮抗炎作用并非源于免疫細(xì)胞的減少，而是出于對(duì)免疫通路的調(diào)控。本實(shí)驗(yàn)中，白花蛇舌草在5 mg·L-1以上表現(xiàn)出細(xì)胞毒現(xiàn)象，與文獻(xiàn)記載白花蛇舌草(12.5 mg·L-1)作用48 h[8]，出現(xiàn)明顯的抑制腫瘤細(xì)胞的作用所得的結(jié)果相一致，推測(cè)白花蛇舌草可導(dǎo)致相應(yīng)細(xì)胞的凋亡[9]，抑制細(xì)胞增殖。因其具有細(xì)胞毒活性，未繼續(xù)進(jìn)行體外抗炎作用研究。總提取物在大濃度下也出現(xiàn)細(xì)胞毒現(xiàn)象，其原因可能為隨著白花蛇舌草濃度的加大，從而出現(xiàn)細(xì)胞毒現(xiàn)象。

在正常的生理環(huán)境下，由免疫細(xì)胞所釋放的與炎癥相關(guān)的炎性介質(zhì)，如NO、PGE2等，主要用于組織的保護(hù)與修復(fù)，而他們的過度表達(dá)則會(huì)造成免疫損傷，加重病情。當(dāng)機(jī)體受到損傷或病原體入侵時(shí)，免疫系統(tǒng)激活并招募大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，分泌多種細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)，導(dǎo)致炎癥的產(chǎn)生[10]。炎癥是機(jī)體對(duì)于傷害性刺激、組織損傷以及感染等多種誘導(dǎo)因素所做出的級(jí)聯(lián)應(yīng)激反饋。如LPS刺激后，免疫細(xì)胞能夠分泌TNF-α、IL-1β、IL-6等多種細(xì)胞因子[11-12]，這些細(xì)胞因子可造成機(jī)體炎癥的過度表達(dá)。因此，NO和PGE2在免疫系統(tǒng)里作為典型的炎性介質(zhì)，常用于檢測(cè)免疫細(xì)胞是否被激活，而iNOS和COX-2的蛋白表達(dá)可對(duì)細(xì)胞中NO和PGE2的合成起到關(guān)鍵作用。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了總提取物、鹿茸草和鴨跖草對(duì)LPS誘導(dǎo)的免疫細(xì)胞活化后，細(xì)胞上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6水平的變化，同時(shí)選定NO和PGE2作為考察指標(biāo)，并通過Western blot技術(shù)檢測(cè)iNOS和COX-2的蛋白表達(dá)進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，LPS誘導(dǎo)免疫細(xì)胞后，細(xì)胞上清液中NO、PGE2、TNF-α、IL-1β和IL-6的含量明顯升高；通過總提取物、鹿茸草和鴨跖草處理則可降低其在上清液中的表達(dá)?？偺崛∥?、鹿茸草和鴨跖草可明顯降低LPS誘導(dǎo)的iNOS和COX-2蛋白水平，而起到抑制NO和PGE2分泌作用。

Tab 2 Effects of Yanning syrup on swelling of mice hind paw induced by fresh egg white n=10)

*P<0.05,**P<0.01vsmodel

NF-κB廣泛存在于真核細(xì)胞中，是一種具有多向轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用的轉(zhuǎn)錄因子。已有的大量報(bào)道表明，NF-κB通路在LPS誘導(dǎo)免疫細(xì)胞活化過程中起著重要作用[12]。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，NF-κB蛋白家族主要包括NF-κB 1(p50)、NF-κB 2(p52)、RelA (p65)、RelB和c-Rel 5個(gè)成員[13]。在正常靜息狀態(tài)下，細(xì)胞內(nèi)NF-κB通常以無活性的三聚體或有活性的二聚體存在。當(dāng)細(xì)胞受到LPS、細(xì)胞因子、病毒等刺激時(shí)，IκBα發(fā)生磷酸化[14]，隨之又發(fā)生泛素化，其構(gòu)象發(fā)生改變后，從而釋放出NF-κB二聚體，使其得以轉(zhuǎn)位入細(xì)胞核中，特異性地與DNA上相應(yīng)靶基因調(diào)控元件的序列相結(jié)合，單獨(dú)作用或與其他轉(zhuǎn)錄因子共同影響，上調(diào)這些靶基因的表達(dá)，從而發(fā)揮相應(yīng)的生理及病理作用。本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，LPS刺激后，p-IκBα的蛋白水平明顯升高，總提取物則可逆轉(zhuǎn)此現(xiàn)象。此外，對(duì)于核內(nèi)的NF-κB的檢測(cè)也可看出，總提取物有抑制LPS激發(fā)的NF-κB核轉(zhuǎn)錄的作用。

綜上所述，炎寧糖漿具有較好的抗炎作用，而其主要抗炎單味中藥為鹿茸草和鴨跖草，在之后實(shí)驗(yàn)會(huì)進(jìn)一步比較3種單味藥的藥效作用，分離及篩選三味藥中的活性成分，同時(shí)白花蛇舌草是否具有抗炎作用，需要進(jìn)一步體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。目前對(duì)于炎寧糖漿中主要活性單味藥鹿茸草的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及藥理機(jī)制報(bào)導(dǎo)還相對(duì)較少，進(jìn)一步對(duì)其深入研究，可對(duì)炎寧糖漿的臨床應(yīng)用和市場(chǎng)推廣產(chǎn)生重要意義及實(shí)際價(jià)值。