(重慶師范大學(xué)化學(xué)學(xué)院，重慶 401331)

氨茶堿(AP)是茶堿和乙二胺的復(fù)合物，主要用于治療支氣管哮喘和哮喘性支氣管炎，是應(yīng)用最廣泛的抗哮喘藥物之一。也可用于治療急性心功能不全、心源性哮喘和膽道絞痛[1]。近年來(lái)，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)氨茶堿對(duì)急性缺氧動(dòng)物吸入氧后缺氧損傷具有預(yù)防作用。但過(guò)量使用氨茶堿會(huì)引起躁動(dòng)、失眠等癥狀。因此，在臨床診斷中對(duì)氨茶堿進(jìn)行測(cè)量具有重要意義。目前氨茶堿的測(cè)定方法包括高效液相色譜法[2]、毛細(xì)管電泳法[3]、拉曼光譜法[4]、紫外分光光度法[5]等。這些方法已被廣泛應(yīng)用于氨茶堿的測(cè)定，但這些檢測(cè)方法往往儀器昂貴、程序復(fù)雜、耗時(shí)較長(zhǎng)，對(duì)操作人員的技術(shù)要求比較高，不適于大范圍推廣[6]。

流動(dòng)注射技術(shù)能高效地完成試樣的在線處理與檢測(cè)，其自動(dòng)化程度高、測(cè)試速度快、精度高、試劑用量少，常與其他方法聯(lián)用。在化學(xué)工程[7]、食品分析[8]等方面有著廣泛的應(yīng)用。

化學(xué)發(fā)光方法有很多優(yōu)勢(shì),比如分析速度快,靈敏度高,儀器便宜,操作簡(jiǎn)便和線性范圍廣等[9,10]。此外，化學(xué)發(fā)光法在藥理學(xué)[11]、生物醫(yī)學(xué)[12]、環(huán)境化學(xué)[13,14]和酶免疫[15]等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)研究了氨茶堿-酸性高猛酸鉀-甲醛體系的化學(xué)發(fā)光行為，發(fā)現(xiàn)氨茶堿的存在使得酸性高錳酸鉀-甲醛體系的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)，據(jù)此建立了流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光檢測(cè)氨茶堿的新方法。并將建立的新方法用于氨茶堿注射液的加標(biāo)回收，結(jié)果令人滿意。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

IFFM-D型流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光儀(西安瑞邁電子科技有限責(zé)任公司)；KQ5200DB型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；FA1204B型電子天平(上海精密儀器儀表有限公司)。

氨茶堿(分析純，阿拉丁試劑有限公司)；HCl(分析純,西隴化工)；高錳酸鉀溶液(0.1000 mol/L，深圳博瑞森化工有限公司)；甲醛(分析純，南京化學(xué)試劑股份有限公司)。實(shí)驗(yàn)室用水為二次蒸餾水。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

圖1 流動(dòng)注射-化學(xué)發(fā)光流程圖P.蠕動(dòng)泵；V.八通閥；W.廢液；F.流通池；PMT.光電倍增管；HV.負(fù)高壓；AM.放大器；A/D.數(shù)字模擬轉(zhuǎn)換器；COM.電腦；a.鹽酸溶液；b.高錳酸鉀溶液；c.甲醛溶液；d.氨茶堿溶液；e.水

2 結(jié)果與討論

2.1 酸性介質(zhì)的選擇和濃度的優(yōu)化

實(shí)驗(yàn)證明，在不同種類(lèi)的酸介質(zhì)中，系統(tǒng)的發(fā)光強(qiáng)度并不相同。考察了H2SO4、HNO3、HCl、H3PO4等pH對(duì)該體系化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的影響。結(jié)果如圖2，在鹽酸介質(zhì)中，系統(tǒng)的相對(duì)化學(xué)發(fā)光信號(hào)最強(qiáng)，最穩(wěn)定，因此選擇鹽酸作為酸性介質(zhì)。

圖2 酸介質(zhì)對(duì)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的影響

在0.2～1.6 mol/L范圍內(nèi)考察了鹽酸濃度對(duì)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的影響。在HCl濃度為1.0 mol/L時(shí)，得到了最大的化學(xué)發(fā)光信號(hào)。濃度1.0 mol/L后化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度開(kāi)始下降。因此，選擇1.0 mol/L HCl作為這項(xiàng)工作的最佳條件。

2.2 高錳酸鉀濃度的優(yōu)化

在固定濃度的HCl (1.0 mol/L)和甲醛(0.14 g/mL)下，考察KMnO4濃度對(duì)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的影響，從1.2 mmol/L到2.6 mmol/L。當(dāng)KMnO4濃度從1.2 mmol/L變化到2.2 mmol/L時(shí)，化學(xué)發(fā)光信號(hào)迅速增加，2.2 mmol/L后，增加速率減慢。但隨著濃度的增加，信噪比增大。因此，選擇0.1 mol/L KMnO4溶液作為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)的最佳濃度。

2.3 甲醛濃度的優(yōu)化

當(dāng)KMnO4(2.2 mmol/L)和HCl (1.0 mol/L)的濃度固定時(shí)，考察甲醛濃度對(duì)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的影響范圍為0.02 g/L～0.18 g/L。結(jié)果表明，隨著甲醛濃度的增加，化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度由0.02 g/L增加到0.14 g/L。濃度高于0.14 g/L后，化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度開(kāi)始下降。因此，選擇0.14 g/L甲醛作為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)的最佳濃度。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

在最佳條件下，獲得了該方法的分析性能，其線性范圍是10.51～210.16 mg/L?；貧w方程是ΔI= 0.2628c+ 2.1487，R2= 0.9911。對(duì)42.04 mg/L 的氨茶堿溶液進(jìn)行化學(xué)發(fā)光測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.4 (n=11)，檢出限為4.56 mg/L, 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.66%。

2.5 干擾測(cè)試

2.6 樣品分析

為了評(píng)價(jià)該方法的適用性和可靠性，將其應(yīng)用于實(shí)際樣品中氨茶堿的測(cè)定。氨茶堿注射液(四川省萬(wàn)鑫動(dòng)物藥業(yè)有限公司，0.25 mg/mL)稀釋后采用流動(dòng)注射-化學(xué)發(fā)光方法進(jìn)行分析,平行測(cè)定6次，分析結(jié)果如表1所示，回收率在96.3%～98.3%之間。說(shuō)明該方法成功應(yīng)用于實(shí)際樣品中氨茶堿的測(cè)定。

表1 樣品中氨茶堿的回收結(jié)果

3 結(jié)論

本研究創(chuàng)立了一種新的檢測(cè)氨茶堿含量的化學(xué)發(fā)光方法，此方法便于操作，儀器便宜，并且靈敏度高，檢出限低，可用于在線分析。