曹 衛(wèi) ，郭夢玲，胡情姣

(南京海融醫(yī)藥科技股份有限公司，江蘇 南京 211100)

艾司奧美拉唑鈉(Esomeprazole Sodium)，化學名5-甲氧基-2-[(S)-[(4-甲氧基-3，5-二甲基-2-吡啶基)甲基]亞硫?；鵠1H-苯并咪唑鈉鹽，是奧美拉唑的S-異構(gòu)體，其對應(yīng)制劑注射用艾司奧美拉唑鈉是第一個應(yīng)用與臨床的光學異構(gòu)體質(zhì)子泵抑制劑，臨床上主要用于胃潰瘍、十二指腸潰瘍、消化道食管炎以及胃炎的治療[1]。該品種目前已收載于2015版中國藥典中，其消旋體奧美拉唑已收載于美國藥典(USP)、歐洲藥典(EP)等多個藥典中，以上各標準中均針對有色雜質(zhì)進行了質(zhì)控。

溶液顏色檢查法是控制原料及注射劑、口服溶液、滴眼液和滴耳液等制劑中有色雜質(zhì)限量的方法，藥品的顏色與藥品本身的性質(zhì)、純度、雜質(zhì)的含量有著密切的關(guān)系。該法可以簡易、直觀、快速地判斷藥品中有色雜質(zhì)的量，并與通常采用的HPLC 法測定有關(guān)物質(zhì)相結(jié)合，可以從兩個不同的角度來控制藥品質(zhì)量，兩者可互相補充，不能相互替代[2]。溶液顏色檢查法的第二法為紫外-可見分光光度法，通過測定藥品在某一波長處的吸光度來控制樣品溶液的顏色或有色雜質(zhì)，為本次實驗所采用的的檢驗方法。

1 儀器與試藥

UV-2600紫外-可見分光光度計，日本島津公司；BT125D分析天平，德國賽多利斯公司；分析級二氯甲烷；分析級甲醇；艾司奧美拉唑鈉原料藥(批號：170501、170502、170503)，浙江震元制藥有限公司；雜質(zhì)F(批號41313)，英國皇家化學協(xié)會(LGC)；雜質(zhì)G(批號115407)，英國皇家化學協(xié)會(LGC)。

2 文獻對比研究

2.1 各類標準對比解讀

將中國藥典2015年版艾司奧美拉唑鈉質(zhì)量標準[3]、USP40奧美拉唑質(zhì)量標準[4]、EP9.0奧美拉唑質(zhì)量標準[5]中吸光度雜質(zhì)的測定方法進行對比匯總，匯總結(jié)果見表1。

表1 測定方法對比分析匯總

對表1中信息進行解讀：①不同藥典方法均采用紫外-可見分光光度法來控制雜質(zhì)吸光度；②不同藥典方法原料藥的濃度一致，均為20mg/mL，但稀釋劑不一樣，其中奧美拉唑稀釋劑為二氯甲烷，艾司奧美拉唑鈉稀釋劑為甲醇，需考察不同稀釋劑對雜質(zhì)吸光度的影響；③奧美拉唑在440nm波長處進行控制，僅控制雜質(zhì)F和雜質(zhì)G，艾司奧美拉唑鈉在440nm和650nm雙波長進行控制，控制了各自波長所有可能的產(chǎn)生吸光度的雜質(zhì)(包括雜質(zhì)F和G)；④僅對比440nm，奧美拉唑的吸光度≤0.10，艾司奧美拉唑鈉的吸光度≤0.05，但因各自稀釋劑不一樣，且吸光度值可能隨著稀釋劑的變化而變化，還需研究對比何種限度更為嚴格；⑤艾司奧美拉唑鈉配制后均需立即檢測，初步表明本品的溶液穩(wěn)定性可能不好，需針對樣品溶液穩(wěn)定性進行研究。

2.2 稀釋劑與限度的考察

用甲醇和二氯甲烷作為稀釋劑，分別配制雜質(zhì)F、雜質(zhì)G、艾司奧美拉唑鈉的濃度為3.5μg/mL、3.5μg/mL、20mg/mL的待測溶液，其中雜質(zhì)F和G的量均相當于艾司奧美拉唑鈉的175×10-6，模擬奧美拉唑雜質(zhì)F和G的限度進行配制(奧美拉唑要求雜質(zhì)F和雜質(zhì)G之和不得過350×10-6)。取上述各種溶液，立即照UV-Vis法，在440nm和650nm的波長處測定，結(jié)果見表2。

表2 稀釋劑對比考察結(jié)果

由表2數(shù)據(jù)得知：①艾司奧美拉唑鈉在甲醇中溶解度大于二氯甲烷，不同稀釋劑的雜質(zhì)吸光度存在差異；②在440nm波長處，以二氯甲烷為稀釋劑時，雜質(zhì)F和雜質(zhì)G的吸光度總和為0.098，與奧美拉唑要求的吸光度限度一致(0.10)；在以甲醇為稀釋劑時，雜質(zhì)F和雜質(zhì)G的吸光度總和為0.075，雖小于奧美拉唑要求的吸光度限度，但已超過艾司奧美拉唑鈉要求的吸光度限度(0.05)；③在650nm波長處，雜質(zhì)F、G和供試品溶液均未有明顯吸收；④艾司奧美拉唑鈉條件下為雙波長控制，從安全性角度考慮，艾司奧美拉唑鈉的有色雜質(zhì)控制相比奧美拉唑更為嚴格，結(jié)合樣品的溶解性，可制定艾司奧美拉唑鈉的雜質(zhì)吸光度采用與藥典一致的雙波長控制方法，具體方法與限度可與中國藥典保持一致。

3 方法的驗證與檢測

3.1 檢測方法

取本品，加甲醇是溶解并稀釋至20mg/mL的溶液，立即照UV-Vis法，在440nm和650nm的波長處測定，吸光度均不得過0.05。

3.2 雜質(zhì)F與G的線性試驗

精密稱取雜質(zhì)F和雜質(zhì)G各適量，分別加甲醇溶解并稀釋制得濃度分別為0.7,1.4,2.8,3.5,7.0,10.0μg/mL的溶液，作為線性考察溶液(1)～(6)；取溶液(1)～(6)，照UV-Vis法，在440nm和650nm的波長處測定。以各成分的濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標進行線性回歸，得雜質(zhì)F的回歸方程為y = 0.0106x + 0.001(r=0.9993)，雜質(zhì)G的回歸方程為y = 0.0105x + 0.0012(r=0.9995)。結(jié)果表明，雜質(zhì)F和雜質(zhì)G在0.7μg/mL～10.0μg/mL的濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

3.3 溶液穩(wěn)定性試驗

取“3.2”項下的線性考察溶液(4)，并照“3.1”項下方法配制供試品溶液，于室溫下放置，分別于0，0.5，1，2h取樣，在440nm和650nm的波長處測定吸光度，結(jié)果，兩種波長下，供試品溶液、雜質(zhì)F溶液、雜質(zhì)G溶液在2h內(nèi)的吸光度均無明顯變化，該方法穩(wěn)定性良好。

3.3 樣品測定

取3批艾司奧美拉唑鈉各適量，按“3.1”項下方法進行配制及檢測，結(jié)果，3批樣品在440nm和650nm的波長處測定，吸光度均小于0.05。

4 討論

溶液穩(wěn)定性試驗結(jié)果表明，雜質(zhì)F、雜質(zhì)G和供試品溶液的吸光度均在2h內(nèi)保持穩(wěn)定，短期內(nèi)并未發(fā)現(xiàn)預(yù)期的不穩(wěn)定現(xiàn)象，穩(wěn)妥起見，測定時間保持與中國藥典方法要求一致的配制后立即測定。

因在440nm波長處除了測定雜質(zhì)F和雜質(zhì)G的吸光度，還可測定艾司奧美拉唑鈉中其他可能引入或降解產(chǎn)生的未知有色雜質(zhì)，650nm波長同理；同時，由于藥品顏色往往不是單一波長所能表現(xiàn)的，所以在單一波長處的吸光度不能完全反應(yīng)藥品顏色的全部特征和有色雜質(zhì)的含有量，故艾司奧美拉唑鈉中有色雜質(zhì)可采用與中國藥典標準一致的雙波長檢測，而不僅僅是單波長下的已知雜質(zhì)F和G的檢測。該方法簡便、靈敏且準確，可用于艾司奧美拉唑鈉中有色雜質(zhì)的測定。