余山紅， 方 輝， 王會福

(1.臺州市農(nóng)業(yè)科學研究院，浙江臨海 317000； 2.浙江省臨海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，浙江臨海 317000)

稻曲病是危害水稻穗粒的病害之一。近年來，由于氣候條件和水稻種植模式發(fā)生變化，氮肥過量使用，水稻感病品種大面積推廣、往來調(diào)運頻繁以及防治時期不當?shù)仍?，導致該病發(fā)生日趨嚴重，已經(jīng)取代白葉枯病發(fā)展成為我國水稻上新的三大病害之一[1-2]。由于稻曲病侵染循環(huán)、抗性基因挖掘利用等關(guān)鍵技術(shù)仍未取得明顯突破，目前生產(chǎn)上最經(jīng)濟有效的方法主要還是采用化學殺菌劑進行防治。因此，稻曲病防治藥劑的選擇就顯得尤為重要。各地已開展了較多的稻曲病防治藥劑篩選試驗[3-8]，但供試藥劑基本上都局限于當?shù)厥袌鲣N售的少數(shù)幾種，還未見有對各地防治藥劑進行統(tǒng)一比較的應(yīng)用研究。2015—2017年3年間，筆者收集了來自多地農(nóng)資市場上的51種殺菌劑，基本上囊括了當前國內(nèi)水稻種植過程中用于防治稻曲病的常用藥劑，并采用室內(nèi)篩選結(jié)合大田防病試驗的方法進行藥效篩選與評價，以期為稻曲病的防治與研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 殺菌劑 51種供試殺菌劑來源于各地大型農(nóng)資市場，生產(chǎn)廠家等詳細信息見表1。

1.1.2 供試菌株 稻曲病病菌(Ustilaginoideavirens)采自浙江省臨海市甬優(yōu)538水稻發(fā)病植株，以組織分離法分離，按照柯赫氏法則進行驗證后轉(zhuǎn)接到馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基上，置于 4 ℃ 冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗方法

1.2.1 室內(nèi)初篩 試驗于2015—2016年在浙江省臺州市農(nóng)業(yè)科學研究院實驗室內(nèi)進行。采用菌絲生長速率法測定藥劑對稻曲病病菌的抑制率[9]。按藥劑推薦使用濃度的上限配制含藥馬鈴薯蔗糖瓊脂(potato saccharose agar，簡稱PSA)培養(yǎng)基(200 g馬鈴薯，20 g瓊脂，20 g蔗糖，用蒸餾水定容至 1 000 mL)。將稻曲病病菌活化后，從菌落邊緣用打孔器制備菌碟(直徑為5 mm)，并將菌碟接入含藥PSA培養(yǎng)基平板上。28 ℃黑暗培養(yǎng)14 d后，十字交叉法測量菌落直徑，計算菌絲生長抑制率。試驗重復(fù)3次。抑制率=(空白對照菌落增長直徑-藥劑處理菌落增長直徑)/空白對照菌落增長直 徑×100%。

1.2.2 田間試驗 挑選“1.2.1”節(jié)室內(nèi)初篩中對病菌抑制率高的藥劑進行田間藥效試驗。試驗于2015—2017年在稻曲病連年發(fā)生較嚴重的浙江省臨海市江南街道塘渡村、白巖岙村及汛橋鎮(zhèn)道頭村進行。施藥前1個月內(nèi)未使用任何殺菌劑。于水稻破口前7～10 d采用常規(guī)手動噴霧器噴霧，藥液量為750 L/hm2。各供試藥劑的用量見表2。水稻品種為甬優(yōu)12，小區(qū)面積為80～120 m2，每個處理3次重復(fù)，隨機區(qū)組排列，設(shè)空白對照。在水稻蠟熟期進行調(diào)查，各小區(qū)按棋盤式10點取樣，每點20叢，參照唐春生等的稻曲病分級標準[10]調(diào)查稻曲病的病穗數(shù)、病粒數(shù)，計算病情指數(shù)和防治效果。用DPS軟件鄧肯氏新復(fù)極差法對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析和比較[11]。另外，觀察試驗期間供試藥劑對水稻葉片、植株長勢等有無不良影響。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)藥劑篩選

由表2可知，51種供試藥劑在推薦使用濃度下有32種藥劑對稻曲病病菌菌絲生長抑制率達100%，數(shù)量占總數(shù)的62.7%，表現(xiàn)出較強的體外抑菌能力。從中挑選出20種在水稻上有效登記的藥劑進行田間藥效試驗。

2.2 田間藥效試驗

在水稻破口前7～10 d按每種藥劑推薦劑量的上限進行施藥，由表2可知，20種參試藥劑對稻曲病的田間防效存在較大差異，效果最好的是75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑，田間防效達82.27%。最差的是70%甲基硫菌靈可濕性粉劑，對稻曲病的田間防效僅為5.70%。通過田間觀察，在該試驗條件下，所有供試藥劑均對水稻葉片、植株長勢等無不良影響，藥劑對水稻植株安全性整體較好。

表1 51種供試殺菌劑

對各處理中稻曲病病穗率與病情指數(shù)進行回歸分析，發(fā)現(xiàn)二者之間存在極顯著的正相關(guān)關(guān)系。病穗率(x) 與病情指數(shù)(y)之間的回歸方程為y=0.571 3x-1.048 1(5.55≤x≤20.06)，決定系數(shù)r2=0.994 4，決定系數(shù)接近于1，說明擬合程度較好。經(jīng)方差分析得到F=3 168.833>F0.01=8.185，表明稻曲病病穗率和病情指數(shù)之間存在真實直線回歸關(guān)系。

表2 51種藥劑對菌絲室內(nèi)抑制率及大田防效

注：同列數(shù)據(jù)后不同大寫、小寫字母分別表示在1%、5%水平上差異顯著。

3 結(jié)論與討論

采取合理的栽培措施是防治病害的基礎(chǔ)，種植抗病品種是有效控制病害發(fā)生與危害的重要途徑。然而遺憾的是，由于當前病原基礎(chǔ)研究進展較慢，抗稻曲病水稻品種的選育及利用目前還不能與抗稻瘟病、抗白葉枯病，甚至抗條紋葉枯病品種相提并論[12]。因此，化學防治仍是現(xiàn)階段乃至今后相當長時期內(nèi)防治稻曲病的主要手段。

目前稻曲病防治藥劑的有效登記成分共有20種[13]，參試藥劑涵蓋了其中15種，樣本具有一定的代表性。本試驗對國內(nèi)農(nóng)藥市場上收集到的51種防治稻曲病常用藥劑進行室內(nèi)與田間篩選。在室內(nèi)抑菌試驗篩選中發(fā)現(xiàn)，僅有62.7%的藥劑在推薦使用濃度下對稻曲病病菌菌絲生長具有較強的抑制能力。抑菌能力欠佳的主要是一些沒有登記的稻曲病藥劑，包括2類：多菌靈、百菌清、甲基硫菌靈等廣譜性殺菌劑；主要用于防治細菌病害的藥劑，如氯溴異氰尿酸、農(nóng)用鏈霉素、噻唑鋅等。表明各地在稻曲病防治藥劑的選擇上還存在一些問題。還有一些藥劑雖有登記稻曲病但室內(nèi)防效不甚理想，如銅制劑(含堿式硫酸銅、絡(luò)氨銅、混合氨基酸銅、琥膠肥酸銅)、生物制劑(井岡霉素、嘧啶核苷類抗菌素)、嘧菌酯等。

各藥劑之間大田防效差異較大，分布于5.70%～82.27% 之間，表明當前藥劑質(zhì)量參差不齊。防效較好的主要還是進口藥劑，占據(jù)了前8位，整體趨勢與多地研究結(jié)果[14-17]一致。國產(chǎn)藥劑雖普遍具有價格優(yōu)勢，但在產(chǎn)品品質(zhì)追趕上仍然任重而道遠。

目前，還未見有防治稻曲病藥劑室內(nèi)抑菌率與田間防效相關(guān)性的專門研究報道。本試驗比較了20種藥劑對稻曲病菌的室內(nèi)與田間抑制效果。結(jié)果表明，藥劑田間防效與室內(nèi)抑菌效果不完全一致。室內(nèi)抑菌率高的藥劑田間防病效果不一定好。17種室內(nèi)抑菌率達100%的藥劑中僅有12種田間防效在60%以上，有3種藥劑的防效甚至低于40%。尤以70%甲基硫菌靈可濕性粉劑最為明顯，其室內(nèi)抑菌率達到100%，但對稻曲病的田間防效僅為5.70%。抑菌率低的藥劑田間防效一般也較差，如20種藥劑中抑菌率沒達到100%的藥劑僅有50%多菌靈可濕性粉劑、20%井岡霉素可溶性粉劑、17%四氟·嘧菌酯懸浮劑等3種，其田間防效均低于40%。田間防效較好的藥劑其室內(nèi)抑菌率較高。在相同使用濃度下，田間防效最好的15個藥劑在室內(nèi)抑菌試驗中都能完全抑制稻曲病病菌菌絲的生長。但王大為等研究發(fā)現(xiàn)，4種藥劑的室內(nèi)抑菌率與田間防效完全一致，這可能與其樣本數(shù)太少有關(guān)[18]。

據(jù)農(nóng)業(yè)部藥檢所統(tǒng)計資料顯示，截至2017年11月在國內(nèi)登記防治稻曲病的藥劑共有168個(處于有效期內(nèi)，下同)，其中單劑92個，混劑76個。戊唑醇登記的單劑、混劑分別有35、20個，分別占登記總數(shù)的38.0%、26.3%；井岡霉素登記的單劑和混劑分別有4、32個，分別占登記總數(shù)的 4.3%、42.1%。表明戊唑醇與井岡霉素仍是當前防治稻曲病的重要藥劑，不同的是戊唑醇側(cè)重于單劑防治，井岡霉素以混劑防治為主。在92個登記防治稻曲病的單劑中，除戊唑醇和井岡霉素外另有18種不同成分，其單劑數(shù)量分別為：氟環(huán)唑14個、己唑醇10個、銅制劑7個、咪鮮胺5個、芽孢桿菌(含蠟質(zhì)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌)3個、蛇床子素2個、腈苯唑2個、丙環(huán)唑2個、申嗪霉素2個、噻呋酰胺2個、嘧菌酯1個、三唑醇1個、咪鮮胺錳鹽1個、嘧啶核苷類抗菌素1個。由此可見，三唑類殺菌劑(包括戊唑醇、氟環(huán)唑、己唑醇、腈苯唑、丙環(huán)唑、三唑醇等)在防治稻曲病的殺菌劑中數(shù)量優(yōu)勢明顯，登記數(shù)占單劑總數(shù)的69.6%，是第2位生物制劑(包括井岡霉素、申嗪霉素、蛇床子素、嘧啶核苷類抗菌素、枯草芽孢桿菌、蠟質(zhì)芽孢桿菌等)的5.3倍，更遠遠領(lǐng)先于以嘧菌酯、肟菌酯、醚菌酯等為代表的最新一代甲氧丙烯酸酯類殺菌劑，在上市40年后三唑類殺菌劑的地位依然穩(wěn)固。另外，隨著人們對健康與環(huán)境的重視，生物制劑在稻曲病上登記數(shù)量近年來也呈逐漸上升的趨勢，已經(jīng)超過銅制劑僅次于三唑類殺菌劑。

調(diào)查稻曲病的病情指數(shù)須要統(tǒng)計每個單穗的曲球數(shù)，工作量大，且易造成誤差。本試驗發(fā)現(xiàn)，稻曲病病穗率和病情指數(shù)高度相關(guān)且存在直線回歸關(guān)系，這與前人的報道結(jié)果[19-22]一致。因此，調(diào)查稻曲病病穗率后經(jīng)過數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換就可以得到病情指數(shù)，這樣可以極大地減輕調(diào)查強度，尤其在調(diào)查大量水稻樣品發(fā)病情況時效率更高。