馬科 張明欣

慢性鼻竇炎并鼻息肉主要為源自篩竇、上頷竇及中鼻甲附近區(qū)域的發(fā)炎反應(yīng)，然其詳細(xì)的病因及發(fā)生機(jī)制仍不清楚[1]。顯微鏡下可見以嗜酸性球?yàn)橹鞯谋歉]黏膜發(fā)炎細(xì)胞浸潤(rùn)，先前研究顯示此現(xiàn)象受到趨化嗜酸性球的細(xì)胞激素表現(xiàn)所調(diào)控，故推測(cè)鼻息肉的形成可能與微生物感染、過敏原刺激及宿主本身的免疫反應(yīng)有關(guān)[2-3]。血液嗜酸性球濃度也被發(fā)現(xiàn)與組織嗜酸性球的浸潤(rùn)程度、鼻息肉的大小，鼻竇計(jì)算機(jī)斷層攝影的嚴(yán)重性及術(shù)后再發(fā)息肉中活化的嗜酸性球數(shù)量有關(guān)[4-5]。因此慢性鼻竇炎患者組織及血液中的嗜酸性球及其相關(guān)細(xì)胞激素的濃度也可作為評(píng)估臨床癥狀、治療效果、預(yù)后以及研究其病理發(fā)生機(jī)制的依據(jù)[6]。采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)60例鼻竇炎鼻息肉黏膜組織中Toll樣受體2(toll-like receptor 2，TLR2)和Toll樣受體4(toll-like receptor 4，TLR4)蛋白的表達(dá)和分布，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017年2月到2018年4月收治的60例鼻竇炎鼻息肉患者為研究組，按照臨床分型分期標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ型16例，其中1期5例，2期7例，3期4例；Ⅱ型30例，其中1期5例，2期12例，3期13例；Ⅲ型14例。Ⅰ型取自炎性黏膜，Ⅱ型和Ⅲ型均取自息肉組織。同期選取20例正常篩竇黏膜組織進(jìn)行對(duì)照。所有入組患者均簽署知情同意書，本研究已通過醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。

1.2 方法 采用免疫組化SABC法。石蠟切片常規(guī)脫蠟、水化，抗原修復(fù)，3%過氧化氫溶液阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，分別滴加兔抗人TLR2、TLR4多克隆抗體，TLR2、TLR4多克隆抗體，SABC檢驗(yàn)試劑盒均購(gòu)自武漢博士德生物有限公司。按試劑盒說明行免疫組織化學(xué)染色，以細(xì)胞膜和胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性染色。

1.3 觀察指標(biāo) 以圖像分析軟件進(jìn)行圖像分析處理，計(jì)算累計(jì)光密度值。研究組Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型鼻竇炎鼻息肉患者以及對(duì)照組各組間TLR2和TLR4表達(dá)程度的差異。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。不同分型的累計(jì)光密度值計(jì)量資料用()表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TLR2、TLR4免疫反應(yīng) TLR2、TLR4主要表達(dá)在鼻腔黏膜上皮細(xì)胞、固有層炎性細(xì)胞及黏膜下層腺體的胞漿和胞膜上(圖1)。

圖1 TLR2、TLR4免疫反應(yīng)

2.2 TLR2在各組的表達(dá) 各組鼻腔黏膜組織中均有TLR2的表達(dá)。各型各期均較對(duì)照組高，并且隨著分型的升高其表達(dá)也隨之增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；但Ⅰ型和Ⅱ型各期之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表1)。

表1 TLR2在各組的表達(dá)()

表1 TLR2在各組的表達(dá)()

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2.3 TLR4在各組的表達(dá) 各組鼻腔黏膜組織中均有TLR4的表達(dá)。各型各期均較對(duì)照組高，并且隨著分型的升高其表達(dá)也隨之增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；但Ⅰ型和Ⅱ型各期之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表2)。

表2 TLR4在各組的表達(dá)()

表2 TLR4在各組的表達(dá)()

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3 討論

鼻竇炎的主要癥狀包括顏面疼痛或壓力感，鼻塞、膿性鼻涕、嗅覺減退或喪失等；次要癥狀則包括頭痛、發(fā)燒、口臭、疲倦、牙痛、咳嗽及耳部癥狀等[7-8]。鼻竇口鼻道綜合體是上頷竇、前篩竇、額竇開口與固有鼻腔的交會(huì)處，竇口阻塞正是慢性鼻竇炎形成過程中的關(guān)鍵性變化[9-10]。一般而言鼻竇開口要維持正常運(yùn)作，必須靠健全的黏膜分泌，及上皮纖毛正常的運(yùn)動(dòng)，兩者皆為外來致病微生物無法入侵黏膜的重要因素[11-12]。慢性鼻竇炎常來自于急性鼻竇炎的治療不足，造成鼻腔黏膜的腫脹，且當(dāng)鼻竇開口漸漸阻塞后，鼻竇空腔中的氧氣會(huì)被鼻竇黏膜吸收[13]，形成缺氧狀態(tài)及超氧化物生成，導(dǎo)致纖毛運(yùn)動(dòng)不良，因而鼻竇內(nèi)黏液滯積、黏膜增厚、發(fā)炎細(xì)胞浸潤(rùn)及血管通透性增加，使細(xì)菌更易滋生[14-15]。慢性鼻竇炎患者鼻黏膜會(huì)對(duì)前述致病菌及鼻腔中正常情況下共存而無致病的數(shù)種霉菌產(chǎn)生免疫發(fā)炎反應(yīng)，分泌免疫蛋白以對(duì)抗或消滅霉菌[16-17]，但同時(shí)也破壞黏膜的防御機(jī)制，引起續(xù)發(fā)性的細(xì)菌感染以致慢性鼻竇炎的生成[18]。

Toll樣受體(TLRs)通過識(shí)別病原相關(guān)分子模式(PAMPs)激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑級(jí)聯(lián)反應(yīng)，誘導(dǎo)I-IFNs、促炎性細(xì)胞因子、趨化因子、MHC分子和共刺激分子等一系列抗病原因子的分泌與表達(dá)以及DCs的成熟，激發(fā)機(jī)體的天然免疫反應(yīng)并介導(dǎo)建立獲得性免疫反應(yīng)[19]。然而，近年來隨著對(duì)TLRs研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)TLRs及其多態(tài)性或免疫缺陷也與許多疾病密切相關(guān)。TLRs不僅在機(jī)體的免疫防御中扮演著重要的角色，還在疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用，為安全、高效藥物與疫苗的合理設(shè)計(jì)和開發(fā)提供依據(jù)[20]。通過本研究表明，TLR2、TLR4主要表達(dá)在鼻腔黏膜上皮細(xì)胞、固有層炎性細(xì)胞及黏膜下層腺體的胞漿和胞膜上。慢性鼻竇炎鼻息肉各型各期均較對(duì)照組高；并且隨著分型的升高，TLR2、TLR4的表達(dá)量也隨之增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此，TLR2和TLR4在鼻竇炎鼻息肉中的表達(dá)可能與鼻竇炎鼻息肉的發(fā)病機(jī)制存在著一定的相互關(guān)聯(lián)，TLRs在該機(jī)制中可能扮演重要角色。