(河北省張家口市宣化區(qū)農(nóng)牧局,河北 張家口 075100)
太行雞為我國(guó)著名地方品種雞,具有抗病力強(qiáng)、適應(yīng)性好、耐粗飼、蛋肉質(zhì)量高等特點(diǎn)。本研究從大量具有促生長(zhǎng)和增強(qiáng)免疫效果的中草藥中篩選出大麥、茯芩、白芍等并依據(jù)中醫(yī)清熱燥濕理論,輔以增強(qiáng)體質(zhì)、健脾胃,組成本試驗(yàn)復(fù)方中藥,并應(yīng)用于太行雞,觀察其對(duì)太行雞機(jī)體免疫的影響。
復(fù)方中藥由大麥、茯芩、白芍、甘草、黨參、白術(shù)、當(dāng)歸、貫眾等按比例配制組成,經(jīng)粉碎研磨后添加在飼料中。
表1 基礎(chǔ)日糧
注:a每千克飼糧中添加:維生素A 1500IU, 維生素D3200IU, 維生素E 10IU, 維生素K 0.5mg, 維生素B11.8mg, 維生素B23.6mg, 維生素B63.0mg, 維生素B120.009mg, 生物素 0.15mg,葉酸0.55mg,泛酸10.0mg,煙酸27mg,膽堿1300mg; 鐵(FeSO4·H2O) 80mg,錳(MnSO4·7H2O) 60mg,鋅(ZnSO4·7H2O) 40mg,銅(CuSO4·5H2O) 8mg,碘(KI) 0.35mg,硒(Na2SeO3) 0.15mg;b實(shí)測(cè)值
28 日齡太行雞 320 只,隨機(jī)分為 4 組,每組4重復(fù),每重復(fù)20 只。對(duì)照組為基礎(chǔ)日糧(見表1)、Ⅰ組基礎(chǔ)日糧+0.75%復(fù)方中藥、Ⅱ組基礎(chǔ)日糧+1.5%復(fù)方中藥、Ⅲ組基礎(chǔ)日糧+2%復(fù)方中藥。
飼養(yǎng)方式為3層全階梯式分籠飼養(yǎng),人工光照和自然光照結(jié)合,機(jī)械通風(fēng)加自然通風(fēng),定時(shí)飼喂 2 次/d,自由飲水;其他日常管理和免疫按常規(guī)進(jìn)行。
試驗(yàn)為期42 d,在42、56、70 d從每重復(fù)隨機(jī)抽取3只雞屠宰,打開胸腔、腹腔,收集脾臟、胸腺和法氏囊,用 4℃的生理鹽水洗去表面的血污,并除其表面的結(jié)締組織,用濾紙吸干,用分析天平稱重以計(jì)算重量指數(shù)。
免疫器官指數(shù)=免疫器官重(g)/雞活重(kg)[4]
淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率采用比色法(MTT 法)檢測(cè)[5]
采用終點(diǎn)散射比濁法測(cè)定 IgG、IgM、IgA 的含量[5]
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行雙因素單變量方差分析,各組間通過LSD和Duncan′s進(jìn)行數(shù)據(jù)間的多重比較進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。以P<0.05表差異顯著,P>0.05表差異不顯著。
由表2可見,復(fù)方中藥的添加對(duì)試驗(yàn)期太行雞胸腺指數(shù)有明顯影響,在42、56和70 d時(shí)1.5%和2%復(fù)方中藥組的胸腺指數(shù)顯著高于0.75%復(fù)方中藥組和對(duì)照組(P<0.05),而1.5%和2%復(fù)方中藥組以及0.75﹪復(fù)方中藥組和對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)。
各試驗(yàn)組法氏囊指數(shù)42 d差異不顯著(P>0.05);56 d 1.5%和2%復(fù)方中藥組顯著高于0.75%復(fù)方中藥組和對(duì)照組(P<0.05),但1.5%和2%復(fù)方中藥組以及0.75%復(fù)方中藥組和對(duì)照組之間差異不顯著(P>0.05);70 d 時(shí)1.5%復(fù)方中藥組和2%復(fù)方中藥組顯著高于對(duì)照組(P<0.05),2%復(fù)方中藥組顯著高于0.75%復(fù)方中藥組(P<0.05),其他各組差異不顯著(P>0.05)。
各試驗(yàn)組脾臟指數(shù)在42 d和56 d有增加,但差異不顯著(P>0.05);70 d 時(shí)1.5%和2%復(fù)方中藥組顯著高于0.75%復(fù)方中藥組和對(duì)照組(P<0.05),但1.5%和2%復(fù)方中藥組以及0.75%復(fù)方中藥組和對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)。
表2 復(fù)方中藥對(duì)太行雞免疫器官的影響
注:同列肩標(biāo)小寫字母不相同表示差異顯著(P<0.05 )。
由表3可見,0.75%復(fù)方中藥組T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05),1.5%復(fù)方中藥組、2%復(fù)方中藥組的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著高于0.75%復(fù)方中藥組和對(duì)照組(P<0.05),1.5%復(fù)方中藥組與2%復(fù)方中藥組差異不顯著(P>0.05)。
由表3可見,0.75%復(fù)方中藥組的IgG、IgM與對(duì)照組沒有差異(P>0.05),1.5%復(fù)方中藥組、2%復(fù)方中藥組的IgG、IgM顯著高于0.75%復(fù)方中藥組和對(duì)照組(P<0.05),而1.5%復(fù)方中藥組與2%復(fù)方中藥組之間血清IgG、IgM含量差異不顯著(P>0.05);0.75、1.5和2%復(fù)方中藥組太行雞血清的IgA含量顯著高于對(duì)照組,且0.75、1.5和2%復(fù)方中藥組之間無顯著差異(P>0.05)。
表3 復(fù)方中藥對(duì)太行雞血液免疫指標(biāo)的的影響
注:同行肩標(biāo)小寫字母不相同表示差異顯著(P<0.05 )。
免疫器官系數(shù)是機(jī)體免疫功能的初步觀察指標(biāo)。太行雞免疫器官的重量是評(píng)價(jià)其機(jī)體免疫力強(qiáng)弱的重要指標(biāo), 法氏囊、脾臟、胸腺等是體內(nèi)主要的免疫器官,與體液免疫和細(xì)胞免疫均有密切關(guān)系[6,7]。本研究中, 0.75%、1.5%和2%復(fù)方中藥組的胸腺、法氏囊和脾臟指數(shù)均高于對(duì)照組,尤其是1.5%和2%復(fù)方中藥組表現(xiàn)最為顯著,表明復(fù)方中藥可促進(jìn)太行雞免疫器官生長(zhǎng)發(fā)育,延緩免疫器官的萎縮,從而增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。
T淋巴細(xì)胞是介導(dǎo)機(jī)體細(xì)胞免疫的重要細(xì)胞,外周血中T淋巴細(xì)胞百分率的高低,可以反映機(jī)體細(xì)胞免疫的狀態(tài)[8-9]。對(duì)抗原產(chǎn)生特異性抗體的水平是衡量機(jī)體體液免疫的重要指標(biāo)。本研究中,0.75%復(fù)方中藥組的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率與對(duì)照組比較差異不明顯,1.5%復(fù)方中藥組、2%復(fù)方中藥組的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著高于對(duì)照組(P<0.05),且1.5%復(fù)方中藥組與2%復(fù)方中藥組之間差異不顯著。表明,復(fù)方中藥可能促進(jìn)太行雞T細(xì)胞繁殖分化,對(duì)機(jī)體細(xì)胞免疫有促進(jìn)作用。
免疫球蛋白IgA、IgM、IgG具有抗菌和抗病毒作用[10]。本試驗(yàn)中3個(gè)試驗(yàn)組復(fù)方中藥均提高了太行雞血清IgG、IgM和IgA含量,但1.5和2﹪復(fù)方中藥組的增強(qiáng)效果較0.75%復(fù)方中藥組更為顯著。
在太行雞飼料中添加由大麥、茯芩、白芍、甘草、黨參、白術(shù)、當(dāng)歸、貫眾等組成的復(fù)方中藥,太行雞在胸腺、法式囊、脾臟指數(shù),淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率,血清IgG、IgM和IgA含量均有明顯提高,尤其是1.5%和2%復(fù)方中藥組表現(xiàn)最為顯著,表明太行雞日糧添加1.5%和2%復(fù)方中藥顯著提高其機(jī)體免疫力。