李釗 張彥輝 肖亞楠 王茹夢(mèng) 何順 李建洪 游紅

別之龍，博士，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)學(xué)院教授，博士生導(dǎo)師，國(guó)家蔬菜改良中心華中分中心主任，國(guó)家西甜瓜產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系設(shè)施栽培崗位科學(xué)家，主要從事設(shè)施蔬菜生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控研究，先后主持國(guó)家自然科學(xué)基金、中以國(guó)際科技合作項(xiàng)目等縱向科研項(xiàng)目30余項(xiàng)，在國(guó)內(nèi)外發(fā)表論文200余篇，其中SCI論文40余篇，以第1完成人獲得省部級(jí)獎(jiǎng)勵(lì)3項(xiàng)，先后榮獲“中國(guó)農(nóng)業(yè)工程學(xué)會(huì)青年科技獎(jiǎng)”、“湖北省自然科學(xué)基金青年杰出人才”、“武漢市學(xué)科帶頭人”、“武漢市黃鶴英才（農(nóng)業(yè)）”等稱號(hào)，2014年被評(píng)為第六屆全國(guó)優(yōu)秀科技工作者，享受國(guó)務(wù)院政府特殊津貼專家?，F(xiàn)為國(guó)際園藝學(xué)會(huì)會(huì)員，中國(guó)農(nóng)業(yè)工程學(xué)會(huì)理事，中國(guó)園藝學(xué)會(huì)設(shè)施分會(huì)常務(wù)理事，中國(guó)農(nóng)業(yè)工程學(xué)會(huì)設(shè)施園藝工程專業(yè)委員會(huì)委員?！堕L(zhǎng)江蔬菜》副主編，《Scientia Horticulturae》咨詢編委，《中國(guó)蔬菜》、《中國(guó)瓜菜》編委。

小菜蛾P(guān)lutella xylostella（L.）是一種世界性的遷飛型害蟲，以幼蟲為害十字花科作物為主，嚴(yán)重影響十字花科作物的產(chǎn)量和質(zhì)量，甚至絕收[1，2]。 全球每年因小菜蛾為害造成的損失和防治費(fèi)用由10億美元增至40億～50 億美元[3，4]，僅我國(guó)每年用于小菜蛾的防治費(fèi)用就高達(dá)7.7億美元[5]。目前，小菜蛾田間防控以化學(xué)防治為主，但由于長(zhǎng)期不科學(xué)合理用藥，導(dǎo)致其對(duì)97種不同成分的殺蟲劑產(chǎn)生了抗性，成為世界上抗藥性最嚴(yán)重的害蟲之一（www.pesticideresistance.com.）。 阿維菌素是華中地區(qū)防治小菜蛾的主要藥劑之一，生產(chǎn)上長(zhǎng)期不合理使用導(dǎo)致華中地區(qū)小菜蛾田間種群對(duì)該藥劑產(chǎn)生了高等水平抗性，并呈現(xiàn)上升趨勢(shì)[6]。農(nóng)藥復(fù)配是提高藥效和緩解抗藥性產(chǎn)生的重要途徑之一[7，8]。篩選對(duì)小菜蛾具有增效作用的阿維菌素與其他藥劑的混配組合，對(duì)減緩華中地區(qū)小菜蛾對(duì)阿維菌素抗性及有效防治小菜蛾具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx及飼養(yǎng)方法

供試?yán)ハx為室內(nèi)敏感品系小菜蛾，由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)昆蟲生理毒理實(shí)驗(yàn)室惠贈(zèng)，采用蛭石蘿卜苗法[9]于室內(nèi)飼養(yǎng)多代，飼養(yǎng)過(guò)程中未接觸任何藥劑。飼養(yǎng)溫度為（25±1）℃，相對(duì)濕度60%±5%，光周期 L∶D=16∶8，成蟲期補(bǔ)充 10%蜂蜜水。

1.2 供試藥劑

95%阿維菌素 （Abamectin），98%乙基多殺菌素（Spinetoram）均購(gòu)自湖北康寶泰精細(xì)化工有限公司。

1.3 生物測(cè)定方法

采用殺蟲劑抗性行動(dòng)委員會(huì)（IRAC）提出的浸葉 法 （No.018，http://www.irac-online.org/methods/plutella-xylostella-larvae/）測(cè)定2種藥劑對(duì)小菜蛾的生物活性。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，分別將阿維菌素、乙基多殺菌素用0.1%的Triton X-100配制成6個(gè)系列濃度，以0.1%的Triton X-100作為對(duì)照。用直徑為7.0 cm的打孔器從干凈的甘藍(lán)葉上取大小均一的葉片，浸入配好的藥液10 s后取出，室溫晾干后置于直徑為7 cm的培養(yǎng)皿中，每皿接入大小一致的3齡幼蟲10頭（培養(yǎng)皿用雙層吸水紙密封，防止試蟲逃逸）。每組處理4次重復(fù)，48 h后統(tǒng)計(jì)各處理的幼蟲死亡數(shù)，以小毛筆或鑷子輕觸蟲體，試蟲不能協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)或蟲體與對(duì)照差異過(guò)大的個(gè)體視為死亡。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用DPS統(tǒng)計(jì)軟件處理，計(jì)算出各藥劑的致死中濃度（LC50）、95%置信區(qū)間及斜率（標(biāo)準(zhǔn)誤）等參數(shù)。

1.4 最佳配比篩選

采用交互測(cè)定法確定2種殺蟲劑的最佳配比[10]。以單劑阿維菌素（A）、乙基多殺菌素（B）的LC50值為基礎(chǔ)，設(shè)置11個(gè)濃度梯度以及1個(gè)空白對(duì)照，共12個(gè)處理進(jìn)行測(cè)定，各處理兩單劑比例見表1（以各自LC50值為100%，然后10等分，分別計(jì)算在各比例中的含量）。

各處理測(cè)定結(jié)果計(jì)算公式如下，預(yù)期死亡率：在不同比例下，由單劑的回歸方程計(jì)算出相應(yīng)濃度的死亡率 A'、B'，預(yù)期死亡率=（A'+B'）-A'B'×100；共毒因子=（實(shí)際死亡率-預(yù)期死亡率）/（預(yù)期死亡率）×100，共毒因子≤-20，拮抗作用；-20＜共毒因子＜20，相加作用；共毒因子≥20，增效作用[11]。

1.5 共毒系數(shù)（CTC）的計(jì)算

根據(jù)共毒因子的測(cè)定結(jié)果，選取具有增效作用的混配組合，對(duì)混配組合的聯(lián)合毒力進(jìn)行測(cè)定，采用Sun等[12]方法計(jì)算混劑的共毒系數(shù)（CTC）。毒力指數(shù)（TI）= 標(biāo)準(zhǔn)藥劑 LC50/供試藥劑 LC50×100，混劑實(shí)際毒力指數(shù) （ATI）=A藥劑的LC50/混劑的LC50×100，混劑理論毒力指數(shù)（TTI）=ATI（A）×藥劑 A 在混劑中的百分含量+ATI（B）×藥劑B在混劑中的百分含量，共毒系數(shù)（CTC）=ATI/TTI×100，CTC≥120，增效作用；CTC≤80，拮抗作用；80＜CTC＜120，相加作用[13]。

表1 各處理單劑比例 %

表2 阿維菌素與乙基多殺菌素單劑對(duì)小菜蛾的毒力

表3 阿維菌素與乙基多殺菌素混配最佳配比的篩選

2 結(jié)果與分析

2.1 阿維菌素與乙基多殺菌素單劑對(duì)小菜蛾的毒力

表2可見，阿維菌素對(duì)小菜蛾3齡幼蟲的LC50值為0.602 mg/L，乙基多殺菌素對(duì)小菜蛾3齡幼蟲的LC50值為0.328 mg/L。

2.2 最佳配比篩選

①殺蟲劑混配最佳配比的初步篩選 表3結(jié)果表明，阿維菌素與乙基多殺菌素以比例為50∶50、80∶20、90∶10 混配時(shí)，共毒因子均大于 20，對(duì)小菜蛾3齡幼蟲的毒力表現(xiàn)為增效作用。

②混劑共毒系數(shù)的測(cè)定 表4結(jié)果表明，阿維菌素+乙基多殺菌素（0.30+0.160）、阿維菌素+乙基多殺菌素 （0.48+0.064）2種混配的共毒系數(shù)分別為127.206、134.100，對(duì)小菜蛾均表現(xiàn)為明顯增效作用；阿維菌素+乙基多殺菌素（0.54+0.032）的共毒系數(shù)為111.216，對(duì)小菜蛾表現(xiàn)為相加作用。

表4 阿維菌素與乙基多殺菌素混配對(duì)小菜蛾的聯(lián)合作用

3 小結(jié)與討論

小菜蛾是十字花科蔬菜上世界性分布的重要害蟲，嚴(yán)重影響了甘藍(lán)、花椰菜等十字花科蔬菜的安全生產(chǎn)?；瘜W(xué)防治在控制小菜蛾的各項(xiàng)措施中依然占據(jù)主導(dǎo)地位，但由于殺蟲劑的頻繁不合理使用，華中地區(qū)小菜蛾對(duì)阿維菌素、Bt、高效氯氰菊酯、氟啶脲等藥劑產(chǎn)生了高水平抗藥性[14]，給防治工作帶來(lái)較大困難。農(nóng)藥混配使用具有擴(kuò)大防治譜、提高防治效果、延緩靶標(biāo)生物抗性發(fā)展等優(yōu)點(diǎn)。

不同作用機(jī)理的殺蟲劑合理混配使用，可以起到較好的增效作用，同時(shí)有效延緩害蟲抗藥性發(fā)展。印楝素與多殺菌素混配（1∶7）、銀杏酚酸與印楝素復(fù)配（1∶7）、高效氟氯氰菊酯和甲維鹽混配（1.5∶1.5）、氟啶脲與溴蟲腈混配（13.20∶1.72）、氟啶脲與茚蟲威混配（2.20∶3.60）的研究結(jié)果表明，藥劑合理混配具有延緩抗藥性發(fā)展，提高防治效果的作用[15～19]。本研究測(cè)定了阿維菌素和乙基多殺菌素對(duì)小菜蛾的毒力，并根據(jù)藥劑對(duì)小菜蛾的聯(lián)合毒力作用，篩選出了阿維菌素+乙基多殺菌素 （0.30+0.160）、阿維菌素+乙基多殺菌素（0.48+0.064）2 種高效新型混配配方。室內(nèi)測(cè)定結(jié)果表明，該混配組合可以達(dá)到減少單劑用藥量、提高殺蟲效果等目的。由于光照、溫度、濕度等外在因素影響，混劑的篩選不僅需要室內(nèi)測(cè)定，還需要田間藥效試驗(yàn)的驗(yàn)證，本研究為華中地區(qū)小菜蛾田間藥效試驗(yàn)的驗(yàn)證及抗藥性治理提供了科學(xué)依據(jù)。