陳麗梅 方科

根據(jù)中國國家癌癥中心發(fā)布的2018年報告, 顯示結(jié)直腸癌居惡性腫瘤發(fā)病率第4位, 女性第3位, 死亡率男性第5位, 女性第4位。早期結(jié)直腸癌手術(shù)治療效果理想, 中晚期患者最終死亡于腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的研究為其防治提供了重要的理論基礎(chǔ)。HOXB9是HOX家族中的成員, 包括39個基因, 分為4個基因簇, 分別是HOX A、B、C和D, 并且分布在4條不同染色體上［1］。HOX基因家族在胚胎發(fā)育過程中起著重要作用, 近些年的研究表明HOX基因家族在腫瘤中有表達(dá), 包括白血病、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌和卵巢癌［2］。研究［3］表明, HOXB9是WNT/TCF4信號通路的靶基因, WNT/TCF4信號通路參與了細(xì)胞增殖、分化、胚胎分割和四肢形成等過程。研究［4］表明HOXB9蛋白在乳腺癌中表達(dá)上調(diào)并且促進(jìn)腫瘤進(jìn)展, 并且在乳腺癌中的研究顯示, E2F1可以與HOXB9基因的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點結(jié)合, 上調(diào)HOXB9的表達(dá)。前期的研究［1］也提示HOXB9和E2F1與結(jié)腸癌的發(fā)生有關(guān), 并且在其侵襲轉(zhuǎn)移的程度呈正相關(guān)。本研究主要通過隨訪該研究的患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移時間和總生存時間, 探討是否HOXB9和E2F1的高表達(dá)與患者預(yù)后有關(guān)。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2012年1月～2015年1月經(jīng)病理確診的65例結(jié)腸癌術(shù)后病理標(biāo)本, 前期研究中已經(jīng)分別選擇結(jié)腸癌陰性切緣(正常結(jié)腸組織, 距腫瘤組織5～8 cm)和結(jié)腸癌組織, 并進(jìn)行切片, 進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色實驗, 得出了HOXB9和E2F1在腫瘤組織中的表達(dá)結(jié)果。

1.2 實驗方法 隨訪65例患者的復(fù)發(fā)時間和總生存時間,將免疫組化結(jié)果與復(fù)發(fā)時間和總生存時間做生存分析研究。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。免疫組化結(jié)果為等級資料、生存時間以月為單位, 采用Kaplan-Meier法分析, 將生存時間與HOXB9和E2F1結(jié)果進(jìn)行生存分析, 繪制生存曲線, 并將不同表達(dá)水平的生存曲線進(jìn)行Log Rank檢驗分析。檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 HOXB9表達(dá)與生存時間的關(guān)系 將HOXB9表達(dá)分為高表達(dá)組和低表達(dá)組, 將結(jié)果與患者生存時間做生存分析,采用Kaplan-Meier檢驗, 見圖1。低表達(dá)組與高表達(dá)組生存曲線明顯分離。低表達(dá)組中位生存時間61個月［95%CI(53.03,68.98)］, 高表達(dá)組中位生存時間53個月［95%CI(46.5,59.7)］, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)。

圖1 HOXB9表達(dá)的生存曲線

2.2 E2F1表達(dá)高低與生存時間關(guān)系 將E2F1表達(dá)分為高表達(dá)組和低表達(dá)組, 將結(jié)果與患者生存時間做生存分析, 采用Kaplan-Meier檢驗, 見圖2。低表達(dá)組與高表達(dá)組生存曲線明顯分離。低表達(dá)組中位生存時間65月［95%CI(57.34,73.76)］, 高表達(dá)組中位生存時間53月［95%CI(47.3, 59.5)］,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

2.3 HOXB9與E2F1聯(lián)合表達(dá)與生存時間關(guān)系 將HOXB9-E2F1表達(dá)分為同低表達(dá)組, 一高一低表達(dá)組和同高表達(dá)組,將結(jié)果與患者生存時間做生存分析, 采用Kaplan-Meier檢驗, 見圖3。三組生存曲線明顯分離。同低表達(dá)組中位生存時間70月［95%CI(64.5, 76.9)］, 同高表達(dá)組中位生存時間45月［95%CI(39.5, 53.6)］, 中間組中位生存時間53月［95%CI(44.1, 60.9)］；同低表達(dá)組中位生存時間長于同高表達(dá)組和中間組, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

圖2 E2F1表達(dá)的生存曲線

圖3 HOXB9-E2F1聯(lián)合表達(dá)的生存曲線

3 討論

HOXB9能夠通過調(diào)節(jié)放射損傷修復(fù)所需的ATM的活化,并且參與轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)誘發(fā)的上皮細(xì)胞向間沖質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化［5］。HOXB9-TGF-β-ATM通路在細(xì)胞周期檢查點和DNA修復(fù)中起著重要作用。研究［6］也表明HOXB9可通過活化WNT/TCF通路, 促進(jìn)肺腺癌和直腸癌的轉(zhuǎn)移。前期研究也表明HOXB9高表達(dá)與結(jié)腸癌患者浸潤和轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。

E2F家族是一系列的轉(zhuǎn)錄因子, 是從無脊椎動物到哺乳動物進(jìn)化過程中保留下來的, 是參與細(xì)胞周期循環(huán)、細(xì)胞分化、凋亡和應(yīng)激反應(yīng)中的重要蛋白。E2F1是E2F家族中的重要成員, 其在細(xì)胞周期G1期向S期轉(zhuǎn)換過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用, 通過整合多個上游信號決定細(xì)胞是否進(jìn)入分裂期還是進(jìn)入凋亡過程［7,8］, 其在多種實體瘤中均有高表達(dá), 如非小細(xì)胞肺癌、卵巢癌、前列腺癌、結(jié)腸癌和其他消化系統(tǒng)腫瘤, 并且與患者不良預(yù)后有關(guān)。在乳腺癌中的研究也表明E2F1可上調(diào)HOXB9表達(dá), 進(jìn)而促進(jìn)HOXB9下游的基因表達(dá)［9,10］。前期研究也表明在結(jié)腸癌中E2F1與HOXB9協(xié)同高表達(dá), 并與結(jié)腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。

本研究通過隨訪前期研究中患者的生存時間, 進(jìn)而得出HOXB9和E2F1與結(jié)腸癌患者預(yù)后的關(guān)系。從圖1和圖2的數(shù)據(jù)可以看出, HOXB9和E2F1高表達(dá)與低表達(dá)的患者生存曲線明顯分離, 高表達(dá)患者中位生存期縮短, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。并且在圖3中可以看出, 在HOXB9和E2F1均高表達(dá)的患者生存時間短于其余兩組, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

綜上所述, HOXB9和E2F1高表達(dá)與結(jié)腸癌患者不良預(yù)后有關(guān), 生存時間明顯縮短。