吳 祎，鄧冬莉，鄧 灝，胡 科，蔣春陽

(1.外生成礦與礦山環(huán)境重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(重慶地質(zhì)礦產(chǎn)研究院)，重慶 400042；2.重慶工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院 化學(xué)與制藥工程學(xué)院，重慶 401120；3.中國航空油料有限責(zé)任公司重慶分公司，重慶 401120)

水楊酸是阿司匹林的水解產(chǎn)物，是阿司匹林引起消化道刺激的主要因素，也是控制阿司匹林制劑的質(zhì)量的重要指標(biāo)之一[1]。游離水楊酸是阿司匹林在生產(chǎn)過程中由于乙酰化不完全而帶入或在貯存期間阿司匹林水解產(chǎn)生的。水楊酸不僅對人體有毒性，且分子中的酚羥基在空氣中逐漸被氧化成一系列醌型有色物質(zhì)，例如淡黃色、紅棕色甚至深棕色，故可使阿司匹林變色[2]。因此準(zhǔn)確、快速測定阿司匹林腸溶片中水楊酸和乙酰水楊酸的含量具有重要意義。

1.1 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器

1.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

紫外-可見分光光度儀(配帶1cm的石英比色皿)；容量瓶(50 mL*10、100 mL*2、1000 mL*1)、烘箱；移液管、洗耳球、玻璃棒、小燒杯、過濾裝置、錐形瓶、容量瓶、小燒杯、玻璃棒、洗氣瓶、滴管、滴定管、水浴鍋。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑

0.1 mol/L NaOH：稱取2g NaOH與500mL容量中，加水定容。

0.1 mol/L HCl：移取4mL12mol/L的鹽酸到燒杯中稀釋至480 mL。

pH值=3的CH3COOH-CH3COONa緩沖溶液：取冰醋酸50 mL加水800 mL混合后，用NaOH調(diào)節(jié)pH值至3.0，再加水稀釋至1000 mL。

0.0100 mol/LFe3+標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取0.2703 g的FeCl3·6H2O，用上述pH值=3的緩沖溶液稀釋定容于100mL容量瓶。

0.100 mol/L水楊酸標(biāo)準(zhǔn)乙醇溶液：準(zhǔn)確稱取0.6904 g水楊酸，用乙醇稀釋定容于50 mL容量瓶中。

0.0100 mol/L水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：取上述的水楊酸乙醇溶液10 mL，用pH值=3的緩沖溶液稀釋定容于100mL容量瓶中。

1.2 兩步滴定法測定阿司匹林中乙酰水楊酸的含量

1.2.1 NaOH及HCl的標(biāo)定

1.2.1.1 NaOH的標(biāo)定

稱取0.2000 g左右鄰苯二甲酸氫鉀于錐形瓶中，加水稀釋至70 mL左右，加酚酞3滴，用NaOH滴定至淡紅色，平行測定三次，結(jié)果見表1。

表1 NaOH的標(biāo)定數(shù)據(jù)

1.2.1.2 HCl的標(biāo)定

準(zhǔn)確移取10mLHCl與錐形瓶中，加水至70mL左右，加酚酞3滴，用標(biāo)定好的NaOH滴定至淡紅色，平行測定三次，結(jié)果見表2。

表2 HCl的標(biāo)定數(shù)據(jù)

1.2.2 樣品測定

中和：取15片藥片，精密稱定，研細(xì)。稱取約0.1 g與錐形瓶中加20 mL乙醇。震搖使阿司匹林溶解，加酚酞3滴，滴加NaOH至顯粉紅色。此時(shí)中和存在的游離酸，同時(shí)阿司匹林也被中和為鈉鹽。

水解與測定：在中和后的滴定液中，加入過量NaOH滴定液20 mL，置于水上水浴加熱20min，迅速放冷至室溫，并將結(jié)果用空白校正。

表3 兩步滴定法測定乙酰水楊酸數(shù)據(jù)

1.3 紫外分光光度法測定阿司匹林中乙酰水楊酸含量

1.3.1 阿司匹林中游離水楊酸的測定

1.3.1.1 實(shí)驗(yàn)原理

水楊酸與Fe3+在pH值=3的CH3COOH-CH3COONa的緩沖體系下發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)。形成穩(wěn)定紫色絡(luò)合物。正在一定濃度范圍內(nèi)，絡(luò)合物的濃度與吸光度滿足朗伯比爾定律A=ξbc。

1.3.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精確量取1 mL、2 mL、4 mL、5 mL、6 mL、8 mL的標(biāo)準(zhǔn)水楊酸(SA)溶液(0.01 mol/L)與3.00 mLFe3+(0.01mol/L)標(biāo)準(zhǔn)溶液于50 mL容量瓶中，用pH值=3的緩沖液定容配制成不同濃度的SA-Fe3+溶液。以Fe3+空白溶液作為參比液，分別測定每組溶液吸光度，繪制吸光度隨水楊酸濃度變化的標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見表4和圖1。

表4 水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線測定數(shù)據(jù)

圖1 水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

1.3.1.3 樣品的測定

稱得5片阿司匹林質(zhì)量為0.3735 g，準(zhǔn)確稱取了0.1038 g加乙醇定容，搖勻。干過濾，取5 mL續(xù)濾液與50 mL容量瓶中加3 mLFe3+溶液，緩沖定容。測定樣品吸光度為0.293，帶入水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線通過計(jì)算可得游離水楊酸的含量：

C游離水楊酸=10×(0.293-0.1701)/325.81=0.003772 mol/L

W游離水楊酸=0.003772×50/1000×0.1038×100%=0.18%

1.3.2 阿司匹林中乙酰水楊酸的測定

1.3.2.1 實(shí)驗(yàn)原理

阿司匹林腸溶片中的主要成分乙酰水楊酸會發(fā)生水解反應(yīng)，在稀NaOH溶液中，乙酰水楊酸完全水解，變成水楊酸鈉進(jìn)入水溶液。根據(jù)兩者分子量，即可求得阿司匹林腸溶片中乙酰水楊酸含量。

1.3.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

表5 水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線測定數(shù)據(jù)

圖2 水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

將6個(gè)50 mL容量瓶按0～6依次編號。分別移取水楊酸0.00、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50 mL與相應(yīng)編號的容量瓶中，各加入1.0 mL 0.10 mol/L NaOH溶液，用水稀釋至刻度，搖勻。上述溶液用紫外分光光度計(jì)測定，測定結(jié)果見表5與圖2。

1.3.2.3 樣品的測定

取3片阿司匹林準(zhǔn)確稱量，研細(xì)。取0.0250置于100 mL容量瓶中，加入25.0 mL 0.1 mol/L NaOH，充分使其溶解，在80℃的水浴鍋中加熱20min，冷卻至室溫，再用水稀釋至刻度。過濾該溶液，棄去初濾液，準(zhǔn)確取續(xù)濾液1 mL置于50 mL容量瓶中，加水稀釋定容，搖勻。

表6 紫外分光光度法測定乙酰水楊酸數(shù)據(jù)

2 結(jié)論

兩步滴定法測得乙酰水楊酸含量為95.25%，游離水楊酸含量為0.18%，分光光度法的測定的乙酰水楊酸含量為95.71%。實(shí)驗(yàn)證明分光光度法是一種能夠快速、準(zhǔn)確地測定阿司匹林腸溶片的含量的可靠方法。游離水楊酸不會對結(jié)果造成較大影響。