靳莉莉 李 靜 許東風(fēng)

(商丘醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校護(hù)理系,商丘476100)

肺癌是目前人類多種惡性癌癥中死亡率最高的主要類型之一[1]。其通過組織學(xué)差異主要可以分為小細(xì)胞肺癌(Small cell lung cancer，SCLC)和非小細(xì)胞肺癌(Non-small cell lung cancer，NSCLC)。而非小細(xì)胞肺癌又可以進(jìn)一步分類腺癌、鱗狀細(xì)胞和大細(xì)胞癌[2,3]。在肺癌早期疾病發(fā)展階段，其臨床癥狀不明顯，臨床檢查手段有限，所以大部分晚期發(fā)現(xiàn)的非小細(xì)胞肺癌患者的預(yù)后較差[4]。放射治療在非小細(xì)胞肺癌的不同階段有不同的作用[5]。針對非小細(xì)胞肺癌早期使用放射治療作為輔助化療方案，效果仍然需要進(jìn)行臨床觀察。而且針對非小細(xì)胞肺癌放療敏感性的研究目前需要深一步的探討。

非小細(xì)胞肺癌的放療方案通常由鉑類化合物組成，例如順鉑，卡鉑或奧沙利鉑等[6]。而根據(jù)目前的臨床效果觀察，非小細(xì)胞肺癌對一線藥物治療的反應(yīng)效果較差，治療有效率約10%～15%[7]。而且容易出現(xiàn)耐藥及放療不敏感現(xiàn)象，許多生物學(xué)因素被認(rèn)為是腫瘤內(nèi)產(chǎn)生細(xì)胞性放射抵抗重要原因[8]。部分研究表明在非小細(xì)胞癌miRNA的表達(dá)模式和相關(guān)蛋白信號的表達(dá)途徑都可能參與到腫瘤細(xì)胞放射敏感性的發(fā)生機(jī)制中[9]。

miRNA是小的內(nèi)源性非編碼單鏈RNA分子，約由18～25個(gè)核苷酸分子組成[10]。他們負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)靶向mRNA在轉(zhuǎn)錄后水平上的表達(dá)降解或抑制部分mRNA的翻譯過程，從而干擾其相關(guān)部分生物性特性[11]。Carroll等[12]學(xué)者報(bào)告了2 000多種miRNA和已被證實(shí)與miRNA可相互調(diào)節(jié)的腫瘤作用靶標(biāo)，例如促進(jìn)細(xì)胞增殖和抑制細(xì)胞死亡等分子基因。

此外，miRNA還與很多惡性腫瘤細(xì)胞的輻射敏感性相關(guān)。越來越多的研究指出miRNA可以干擾腫瘤細(xì)胞的輻射耐受及敏感性[13]。有研究表明，miR-214能與ATM 相互作用，通過調(diào)控下游蛋白的表達(dá)水平影響腫瘤細(xì)胞的放射敏感性[14]。而且有研究證實(shí)，miR-214在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)明顯上調(diào)[15]。但miR-214是否參與非小細(xì)胞肺癌的放療敏感性的調(diào)節(jié)以及具體調(diào)節(jié)機(jī)制，尚無相關(guān)研究。本研究通過建立非小細(xì)胞肺癌H358放射抵抗細(xì)胞株，然后檢測miR-214在H358細(xì)胞和H358抵抗細(xì)胞株中的差異表達(dá)，以及抑制miR-214后其細(xì)胞活性及對放射敏感性的變化情況，探究miR-214對非小細(xì)胞肺癌H358細(xì)胞放射敏感性的影響及具體調(diào)節(jié)機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1細(xì)胞株和實(shí)驗(yàn)試劑 人肺癌細(xì)胞株H358由復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院獲得。RPMI1640培養(yǎng)基購于美國賽默飛公司，胎牛血清購于杭州四季青生物工程材料有限公司。ERK1、jnk、p38MAPK和γ-H2AX抗體均購買于美國Abcam公司(ab17942，ab176662，ab170009，ab11175)。脂質(zhì)體Lipofectamine 2000、miR-214-mimic，miR-NC購自(Gnenpharma Co.,Shanghai,China)，CCK-8試劑購買于美國Sigma公司，Trizol購自Ambion(Ambion Inc,Austin,TX,USA)，逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(FSQ-101)購自日本ToYoBo公司(ToYoBo,FSQ-101,Japan)，PCR試劑盒購自美國Sigma公司(KapaBiosystems Inc,Boston,US)。

1.1.2實(shí)驗(yàn)分組 本實(shí)驗(yàn)分為3組，空白對照組(Blank組)，陰性對照組(NC組)和實(shí)驗(yàn)組(miR-214-mimic組)?？瞻讓φ战M使用PBS處理，陰性對照組使用miR-NC模擬物處理，實(shí)驗(yàn)組使用miR-214-mimic進(jìn)行處理。

1.2方法

1.2.1qPCR實(shí)驗(yàn) 使用miRNA提取試劑盒進(jìn)行miR-214抽提，實(shí)驗(yàn)過程按照試劑盒使用說明進(jìn)行，抽提之后，使用核酸濃度檢測儀檢測RNA濃度和純度，最后將其濃度稀釋至50 μg/ml，使用特異性反轉(zhuǎn)錄引物進(jìn)行cDNA合成，反應(yīng)條件按照cDNA合成試劑盒使用說明進(jìn)行設(shè)置。反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性10 min、95℃變性15 s、60℃退火32 s，循環(huán)50次后檢測其溶解曲線，檢測完成后，通過計(jì)算機(jī)系統(tǒng)自動分析各樣本Ct值，然后采用2-ΔΔCt計(jì)算miRNA的相對表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。miR-214引物序列：5′-CACTCTATATAGTGTATCTTTC-3′(正向)和5′-GGCTTTTAGTGTACGTCGTAATG-3′(反向)。

1.2.2Western blot檢測ERK1蛋白的表達(dá) H358-RR細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-214-mimic后48 h后提取總蛋白，用BCA蛋白測定試劑盒測定蛋白濃度，上樣60 μg總蛋白，在4%～12%的SDS聚丙烯酰胺凝膠中電泳，用濕轉(zhuǎn)的方式將蛋白轉(zhuǎn)到膜上，5%脫脂奶粉室溫封閉1 h，一抗(ERK1 1∶1 000)4℃搖床孵育過夜，使用TBST洗膜3次，每次10 min，二抗室溫孵育2 h，使用TBST洗膜3次，每次10 min，使用超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒顯影，使用GAPDH作為內(nèi)參蛋白。

1.2.3γ-H2AX免疫熒光染色實(shí)驗(yàn) 轉(zhuǎn)染miR-214-mimic后的H358-RR細(xì)胞，鋪板于直徑為35 mm 的細(xì)胞爬片的培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)24 h后接受10 Gy 的X射線照射，照射后均再培養(yǎng)2 h，使用預(yù)冷的4%的多聚甲醛在4℃冰箱中固定20 min，使用0.2%的TritonX-100破膜20 min，使用2%BSA 室溫封閉1 h，加入50 μl的2%BSA稀釋的抗γ-H2AX 小鼠單克隆抗體后，放置于4℃冰箱過夜，加入 50 μl 羊抗鼠FITC二抗，室溫孵育1 h。載玻片上加 30 μl 含DAPI的染色液的抗熒光淬滅封片液，室溫避光 30 min。然后通過熒光正置顯微鏡下觀測每個(gè)細(xì)胞核內(nèi)DNA雙鏈斷裂形成的熒光焦點(diǎn)數(shù)量，計(jì)算每組細(xì)胞中的平均熒光焦點(diǎn)數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.2.4CCK-8檢測照射前后的細(xì)胞株活力 根據(jù)前述實(shí)驗(yàn)分組分別取3個(gè)組別的對數(shù)生長期H358-RR細(xì)胞，以每孔3 000個(gè)細(xì)胞接種于96孔板，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔，以加入PBS作為空白對照，培養(yǎng)24 h后，加入10 μl/孔CCK-8試劑，振勻后避光培養(yǎng) 2 h，酶標(biāo)儀測其吸光度(A450nm)值；照射組實(shí)驗(yàn)細(xì)胞進(jìn)行射線照射10 Gy，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后加入CCK-8 試劑，避光2 h后，使用酶標(biāo)儀檢測各組細(xì)胞活力。以空白組的細(xì)胞活性值為1.000。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.2.5彗星實(shí)驗(yàn)檢測DNA損傷修復(fù)能力 常規(guī)接種各組對數(shù)期的細(xì)胞于6孔板，接種密度為5×105，待細(xì)胞貼壁并恢復(fù)狀態(tài)后，給予0 Gy、10 Gy照射，置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。分別于照射后1 h、6 h收集細(xì)胞，胰酶消化、離心后，以1 ml冰冷的PBS重懸細(xì)胞，在暗室低溫下進(jìn)行。采用Invitrogen公司的彗星實(shí)驗(yàn)試劑盒低溶點(diǎn)瓊脂糖LMA沸水浴5 min，完全溶化后置于37℃達(dá)20 min，取細(xì)胞懸液20 μl與80 μl LMA混勻，置于4℃避光10 min。輕輕加入預(yù)冷的新鮮配制的細(xì)胞裂解液，4℃裂解過夜。從細(xì)胞裂解液中取出并排干載玻片上的水分，置于新鮮配制的DNA解旋液中，4℃避光處理1 h。取出載玻片，輕輕置于電泳槽中，有標(biāo)記的一側(cè)朝向陰極(黑色)，輕輕倒入電泳液500 ml，恒壓21 V，30 min，避光。充分漂洗后染色，每孔加入DAPI工作濃度100 μl，室溫避光染色30 min，蒸餾水充分沖洗3次，37℃避光干燥載玻片。 熒光顯微鏡下觀察：每個(gè)樣本隨機(jī)拍照100個(gè)細(xì)胞并保存，用CASP軟件分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有的統(tǒng)計(jì)分析均采用SPSS 16.0軟件包(SPSS，Chicago，IL)進(jìn)行。組間比較采用方差分析；應(yīng)用GraphPadPrism5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)圖形制作。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1人肺癌H358放射抵抗細(xì)胞株的建立 體外培養(yǎng)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株H358，待細(xì)胞融合度為60%～70%，且細(xì)胞生長處于對數(shù)生長期時(shí)，給予一定劑量的放射線照射。照射后繼續(xù)于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，密切觀察細(xì)胞狀態(tài)。待細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)良好后，再進(jìn)行下一次的照射，重復(fù)以上步驟，并逐漸加大每次照射的劑量，直到建立具有穩(wěn)定耐受放射線能力的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株H358(表1)，此時(shí)我們命名篩選出的細(xì)胞為H358-RR(H358 radiation resistance)，后續(xù)試驗(yàn)使用5～10代之間的細(xì)胞。

2.2qPCR檢測不同組的H358-RR細(xì)胞中miR-214的表達(dá)水平 通過qPCR實(shí)驗(yàn)檢測H358和H358-RR中miR-214的表達(dá)水平，然后檢測miR-214-mimic的轉(zhuǎn)染效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，相比H358細(xì)胞，H358-RR細(xì)胞中miR-214的表達(dá)水平相對較高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(1.47±0.14)vs(0.87±0.11)，P<0.05](圖1A)。圖1B結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染了miR-214-mimic后，實(shí)驗(yàn)組的miR-214表達(dá)水平相比NC組和Blank組明顯提高[(1.78±0.25)vs(0.62±0.12)vs(0.53±0.08)，P<0.05]，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明miR-214-mimic轉(zhuǎn)染效率良好，可以有效提高H358-RR細(xì)胞中miR-214的表達(dá)。

2.3Western blot檢測不同組肺癌細(xì)胞中ERK1蛋白的表達(dá)水平 通過Western blot實(shí)驗(yàn)檢測H358-RR不同處理組細(xì)胞中ERK1蛋白的表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示(圖2)：轉(zhuǎn)染了miR-214-mimic后，ERK1、jnk和p38MAPK蛋白的表達(dá)水平相比NC組和Blank組均明顯提高[(1.38±0.22)vs(0.25±0.07)vs(0.27±0.12)，P<0.05；(1.35±0.15)vs(0.23±0.09)vs(0.22±0.05)，P<0.05；(1.19±0.11)vs(0.28±0.08)vs(0.26±0.06)，P<0.05]，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明miR-214可以調(diào)控下游ERK1、jnk和p38MAPK蛋白的表達(dá)，提高ERK1、jnk和p38MAPK的表達(dá)水平，激活相應(yīng)的MAPK信號通路。

2.4miR-214的表達(dá)對肺癌H358細(xì)胞對放療敏感性的影響(γ-H2AX表達(dá)) 為進(jìn)一步觀察在電離輻射處理后細(xì)胞變化，通過免疫熒光檢測γ-H2AX聚集點(diǎn)不同處理的H358-RR細(xì)胞株中的表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，γ-H2AX蛋白在對照組(NC)和空白組(Blank)中的表達(dá)較明顯，在實(shí)驗(yàn)組(miR-214-mimic)中的表達(dá)明顯降低，電離輻射明顯促進(jìn)了γ-H2AX聚集點(diǎn)的形成，在過表達(dá)miR-214之后，γ-H2AX聚集點(diǎn)的表達(dá)明顯較少，DNA損傷較少(圖3)。

表1肺癌H358放射抵抗細(xì)胞的建立方法

Tab.1MethodforestablishinglungcancerH358radiationresistantcells

RadiationIradiation dose and frequency2 Gy4 Gy6 Gy8 Gy10 GyTotalDoseTimeX ray2222260 Gy3 min

圖1 qPCR檢測肺癌細(xì)胞中miR-214的表達(dá)水平Fig.1 Detection of miR-214 expression in lung cancer cells by qPCRNote: *.P<0.05.

圖2 Western blot檢測肺癌細(xì)胞中ERK1蛋白的表達(dá)水平Fig.2 Western blot detection of lung cancer cells in expression of ERK1 protein levels

圖3 免疫熒光技術(shù)檢測γ-H2AX聚焦點(diǎn)在電離輻射之后的變化情況Fig.3 Immunofluorescence technique to detect changes in gamma-H2AX focal point after ionizing radiation

2.5放射線照射對不同處理的肺癌細(xì)胞活力的影響 通過CCK-8細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測不同組的肺癌細(xì)胞在接受放射前后細(xì)胞活力的情況。結(jié)果顯示，未接受放射時(shí)，相比Blank組和NC組，miR-214-mimic組細(xì)胞活力變化輕度降低，而Blank組和NC組之間差距不明顯，無明顯地統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在接受10 Gy放射線之后，miR-214-mimic組的細(xì)胞活力相比NC組和Blank組降低幅度小，差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表2。表明過表達(dá)miR-214后可以有效減少細(xì)胞凋亡，減少細(xì)胞活力的下降，對放射損傷有一定的抵抗性。

表2放射線照射對各組肺癌細(xì)胞活性的影響

Tab.2Effectofradiationonactivityoflungcancercellsineachgroup

IrradiationdosenBlank groupNC groupmiR-214-mimic groupP0 Gy51.000±0.0001.256±0.0320.896±0.0820.05810 Gy50.256±0.0080.392±0.0240.752±0.0390.008

圖4 電離輻射誘導(dǎo)H358-RR細(xì)胞DNA損傷產(chǎn)生的情況Fig.4 Generation of DNA damage induced by ionizing radiation in H358-RR cells

2.6單細(xì)胞凝膠電泳檢測放射線照射后不同組肺癌細(xì)胞DNA損傷情況 H358-RR細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-214-mimic后，分為兩組，NC組和分別于10 Gy照射后1 h、6 h收集細(xì)胞進(jìn)行彗星實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖4所示，照射1 h后，兩組細(xì)胞核明顯形成彗星尾，呈現(xiàn)出彗星頭大，彗星尾細(xì)長的特殊征象，而照射6 h后，兩組細(xì)胞的彗星尾明顯縮短，說明NC組和miR-214-mimic組細(xì)胞均有一定程度的修復(fù)能力，但是在照射后1 h及6 h，miR-214-mimic組細(xì)胞的尾距明顯短于NC組細(xì)胞，說明miR-214-mimic組細(xì)胞的抵抗放射線及對DNA損傷修復(fù)的能力均強(qiáng)于NC組細(xì)胞。

3 討論

miR-214是近年來研究較火熱的一種小分子miRNA。田延鋒等[16]報(bào)道成熟miR-214分子長度為22個(gè)核苷酸，在多種腫瘤組織中存在異常表達(dá)。已有研究表明，miR-214在多種腫瘤組織中表達(dá)下調(diào)，影響腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、轉(zhuǎn)移等過程，并可能參與調(diào)控腫瘤細(xì)胞對放射線輻射的敏感性[17,18]。Zhong等[19]以肺癌A549為研究對象，發(fā)現(xiàn)miR-107在肺癌A549細(xì)胞系中表達(dá)明顯上調(diào)，通過體外轉(zhuǎn)染miR-107類似物的方法使過表達(dá)miR-107的表達(dá)水平之后發(fā)現(xiàn)，miR-107能抑制下游stathmin1蛋白表達(dá)水平，進(jìn)而干擾肺A549癌細(xì)胞對的放射線的敏感性。而Liao等[20]研究發(fā)現(xiàn)，在肝癌細(xì)胞中上調(diào)miR-214 的表達(dá)水平，可以與APK相互作用，通過抑制相關(guān)蛋白的表達(dá)起到抑制肝癌細(xì)胞的放射敏感性。

最近很多研究已經(jīng)顯示了miRNA表達(dá)在多種惡性腫瘤中都有相應(yīng)的監(jiān)管機(jī)制，包括肺癌、肝癌、結(jié)腸癌，神經(jīng)膠質(zhì)瘤等等[21-23]。其中某些miRNA已經(jīng)被廣泛認(rèn)為是關(guān)鍵的致癌基因或抑癌基因[24]。而目前惡性腫瘤的治療方案中，放射治療是常見的治療方案之一，尤其是針對非小細(xì)胞肺癌，放射治療是出現(xiàn)播散和轉(zhuǎn)移后的有效首選方案，但是其對放射劑量的耐受和敏感性降低是目前臨床上存在的主要問題[25]。曾有學(xué)者研究指出部分miRNA在惡性腫瘤的放射治療過程中，對腫瘤細(xì)胞的放療敏感反應(yīng)有一定的調(diào)控作用[26]。然而，目前尚沒有關(guān)于miR-214在肺癌細(xì)胞中的表達(dá)和與放射治療相關(guān)性的研究。因此，我們在肺癌類型中選取了非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株進(jìn)行miRNA分析和放療敏感性的研究。

在電離輻射引起的損傷中，對腫瘤細(xì)胞最為致命的是DNA DSBs損傷，未修復(fù)的DNA雙鏈斷裂數(shù)量增加表明細(xì)胞的存活率減少，即輻射敏感性提高，故DSBs 是與輻射敏感性密切相關(guān)的重要指標(biāo)[27]，而磷酸化的H2AX(γ-H2AX)與DSBs是等量關(guān)系，所以檢測γ-H2AX也是測量DNA損傷的重要方式[28]。本研究也是通過應(yīng)用免疫熒光法檢測了不同處理的H358細(xì)胞的熒光焦點(diǎn)數(shù)來判斷其DNA損傷情況，表明miR-214是通過阻止DNA損傷修復(fù)來提高H358細(xì)胞的放療敏感性。

我們首先構(gòu)建了非小細(xì)胞肺癌的放射抗性細(xì)胞株H358-RR，前述相關(guān)實(shí)驗(yàn)檢測放射抗性細(xì)胞株H358-RR對放射線敏感程度的穩(wěn)定抵抗，且影響細(xì)胞株的增殖和侵襲等惡性行為[29]。然后檢測H358-RR細(xì)胞株中的miR-218和ERK1的表達(dá)水平，探討miR-214-mimic對H358-RR細(xì)胞株中miR-214和ERK1的調(diào)控作用，及對MAPK信號通路的激活情況。我們的研究分析顯示，過表達(dá)miR-214后，γ-H2AX的聚集點(diǎn)顯著減少，表明DNA損傷相對較少，過表達(dá)miR-214可以有效抵抗放射作用，產(chǎn)生放射耐受，降低肺癌細(xì)胞株的放射敏感性。另外單細(xì)胞凝膠電泳又稱為彗星實(shí)驗(yàn)，是檢測DNA損傷常用的技術(shù)之一，也可以通過檢測DNA鏈的損傷程度來判斷DNA損傷的修復(fù)能力。本實(shí)驗(yàn)通過單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)證實(shí)了過表達(dá)miR-214后，DNA損傷修復(fù)能力得到增強(qiáng)，對放射線的抵抗性強(qiáng)于NC組細(xì)胞。表明miR-214的表達(dá)在一定程度上可以減弱肺癌細(xì)胞的放射敏感性，增強(qiáng)其放射抗性，一定程度上削弱放射強(qiáng)度對腫瘤細(xì)胞的損傷能力。在這種情況下，miR-214并沒有介導(dǎo)細(xì)胞凋亡信號的傳導(dǎo)，而僅僅是通過增加miR-214的表達(dá)削弱其對放射的敏感性。

而我們通過檢測miR-214對MAPK信號通路中ERK1蛋白表達(dá)水平影響發(fā)現(xiàn)，miR-214可以調(diào)控ERK1蛋白的表達(dá)， 兩者呈正相關(guān)關(guān)系，證實(shí)了miR-214在肺癌細(xì)胞中的過表達(dá)可以相應(yīng)增加ERK1的表達(dá)。曾有研究指出miR-214可以激活MAPK信號通路對肺癌細(xì)胞的生物學(xué)行為進(jìn)行干擾，甚至抑制其侵襲和轉(zhuǎn)移過程[30]。所以我們推測miR-214可以通過調(diào)控MAPK信號通路對非小細(xì)胞肺癌的放療敏感性進(jìn)行干擾調(diào)控。通過對非小細(xì)胞肺癌活力的檢測同時(shí)也驗(yàn)證了miR-214可以影響非小細(xì)胞肺癌對放射療法的敏感度。

總而言之，本實(shí)驗(yàn)通過分析非小細(xì)胞肺癌中的miR-214的表達(dá)水平，及其表達(dá)對H358細(xì)胞的活性及放射敏感性的影響，逐步證實(shí)了miR-214對肺癌細(xì)胞放射抵抗的功能性作用及其可能作用機(jī)制，當(dāng)然，本實(shí)驗(yàn)也存在一定的實(shí)驗(yàn)缺陷，未在動物體內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)驗(yàn)證放射強(qiáng)度對體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的影響，擬后續(xù)實(shí)驗(yàn)逐步完善相關(guān)研究。所以，本實(shí)驗(yàn)首次在體外實(shí)驗(yàn)中明確了過表達(dá)miR-214可以減弱非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H358的放射敏感性，并且對其可能作用機(jī)制做了初步的探討。對提高非小細(xì)胞肺癌臨床放療效果，發(fā)展新的肺癌治療手段提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。