王 瑛

（哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院靜脈藥物調(diào)配中心，黑龍江哈爾濱 150001）

山楂葉為薔薇科植物山里紅（Crataegus pinnatifida Bge. var.major N. E. B r.） 或山楂（C. pinnatifida Bge.）的干燥葉[1-2]。山楂葉味酸、性平， 歸肝經(jīng)， 具有活血化瘀、理氣通絡(luò)的作用。我國(guó)山楂葉資源豐富，價(jià)廉易得，而山楂葉總黃酮為山楂葉提取物中的主要成分。目前對(duì)山楂葉的現(xiàn)代藥理研究主要集中在心腦血管、降脂、降糖、降壓和抗氧化等方面[3]。有資料表明，山楂葉的主要成分黃酮類物質(zhì)具有一定的抗抑郁作用[4]。本研究旨在明確山楂葉的抗抑郁作用，為臨床研究提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物

主要藥品包括山楂葉提取物粉末（晉城中晉藥業(yè)有限公司生產(chǎn)） ，百合皂苷（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)自制，純度為70%），氟西?。ǔＶ菟乃幹扑幱邢薰荆?。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康昆明種小鼠，雄性，體質(zhì)量18～21 g，2月齡，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。飼養(yǎng)環(huán)境：室溫18～22℃，相對(duì)濕度40%～55%。

1.3 試劑

蒸餾水、生理鹽水于購(gòu)哈爾濱三聯(lián)藥業(yè)有限公司。

1.4 實(shí)驗(yàn)儀器

主要儀器包括電子天平（沈陽(yáng)龍騰電子稱量?jī)x器有限公司）；MC-3型數(shù)字式溫度體溫計(jì)[歐姆龍（中國(guó)）有限公司 ]；1/100 s秒表秒表。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法

（1）動(dòng)物分組和給藥。昆明種小白鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，隨機(jī)分為6組，分別為山楂葉提取物高劑量組（1 g/kg）、中 劑 量 組（0.5 g/kg）、低 劑 量 組（0.25 g/kg）、氟 西 汀 組（0.004 g/kg）、百合皂苷組（0.05 g/kg）和空白對(duì)照組（給等體積的生理鹽水）。灌胃給藥1次/d，連續(xù)7 d。

（2）懸尾實(shí)驗(yàn)。末次給藥1 h后將每組小鼠尾部距末端2 cm處用膠帶條固定懸掛于鐵架臺(tái)上，距離桌面15 cm，適應(yīng)2 min后計(jì)算4 min內(nèi)小鼠懸尾累計(jì)不動(dòng)時(shí)間（小鼠表現(xiàn)被動(dòng)懸掛，肢體運(yùn)動(dòng)消失時(shí)被認(rèn)定為不動(dòng)狀態(tài)）。

（3）強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)。小鼠末次給藥1 h后先訓(xùn)練游泳5 min，1 d后將小鼠放入水深10 cm、直徑20 cm 的玻璃缸內(nèi)，水溫保持在25℃，先預(yù)適應(yīng)2 min，然后記錄小鼠4 min內(nèi)不動(dòng)時(shí)間（小鼠表現(xiàn)被動(dòng)漂浮，掙扎行為消失持續(xù)1 min被認(rèn)定為不動(dòng)狀態(tài)）。

（4） 拮抗利血平降低小鼠體溫實(shí)驗(yàn)。將體溫計(jì)探頭輕插入小鼠肛門內(nèi) 1～2 cm，當(dāng)溫度顯示穩(wěn)定后讀數(shù)，為基礎(chǔ)體溫。然后給藥，1 h后腹腔注射利血平 2.5 mg/kg，4 h后測(cè)定肛溫，以體溫降低值作為指標(biāo)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用 SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，多組間單因素比較先用單因素分析其正態(tài)分布，后以LSD 法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 山楂葉提取物對(duì)小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間的影響

各組小鼠與空白對(duì)照組比較，山楂葉提取物高、中、低劑量組、百合皂苷組和氟西汀組小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間均明顯縮短，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01），見(jiàn)表1。

表1 山楂葉提取物對(duì)小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間的影響（±s）

表1 山楂葉提取物對(duì)小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間的影響（±s）

注：與正常對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 n 劑量（g/kg） 4 min累計(jì)不動(dòng)時(shí)間（s）山楂葉提取物高劑量組 10 1 74.28±6.22*山楂葉提取物中劑量組 10 0.5 70.13±7.25*山楂葉提取物低劑量組 10 0.25 85.17±8.45*百合皂苷組 10 0.05 77.08±6.93*氟西汀組 10 0.004 48.35±5.47**空白對(duì)照組 10 等容積 102.69±8.36

2.2 山楂葉提取物對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間的影響

各組小鼠與空白對(duì)照組比較，山楂葉提取物高、中、低劑量組、百合皂苷組和氟西汀組小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間均明顯縮短，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P ＜ 0.01），見(jiàn)表 2。

表2 山楂葉提取物對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間的影響（±s）

表2 山楂葉提取物對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間的影響（±s）

注：與正常對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 n 劑量（g/kg） 4min累計(jì)不動(dòng)時(shí)間（s）山楂葉提取物高劑量組 10 1 66.38±5.37*山楂葉提取物中劑量組 10 0.5 59.24±5.67*山楂葉提取物低劑量組 10 0.25 68.90±7.19*百合皂苷組 10 0.05 69.14±3.98*氟西汀組 10 0.004 47.75±4.79**空白對(duì)照組 10 等容積 98.29±6.20

2.3 山楂葉提取物對(duì)拮抗利血平降低小鼠體溫的影響

腹腔注射利血平1 h后各組小鼠體溫?zé)o明顯變化，組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；腹腔注射利血平4 h后，各組小鼠與空白對(duì)照組比較，山楂葉提取物中、低劑量組、百合皂苷組合氟西汀組小鼠體溫變化明顯減小，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

3 討論與結(jié)論

抑郁癥是以顯著而持久的心情低落為主要特征，是心境障礙的主要類型，是近年來(lái)嚴(yán)重危害人類身心健康的精神類疾病之一[5]。氟西汀、帕羅西汀、舍曲林等西藥的抗抑郁作用主要與單胺類神經(jīng)遞質(zhì)有關(guān)，且副作用明顯。今年來(lái)，植物抗抑郁藥的研究也有了一定的發(fā)展。山楂葉是一種常用天然藥用植物，其野生資源非常豐富，目前臨床上多用于心血管疾病，有資料表明，山楂葉的主要成分黃酮類物質(zhì)具有一定的抗抑郁作用[6]。動(dòng)物模型懸尾試驗(yàn)與強(qiáng)迫游泳是臨床評(píng)估應(yīng)用藥物抗抑郁效果的一種模型，將動(dòng)物模型放置在有限空間內(nèi)對(duì)其進(jìn)行懸尾或使之進(jìn)行游泳，會(huì)發(fā)現(xiàn)動(dòng)物會(huì)拼命逃脫，但一段時(shí)間后動(dòng)物會(huì)停止掙扎放棄逃脫，是一種絕望表現(xiàn)。本文作者制作小鼠動(dòng)物模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各給藥組小鼠與空白對(duì)照組相比，小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間和小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間均縮短，初步證實(shí)山楂葉提取物具有一定抗抑郁效應(yīng)。目前臨床普遍認(rèn)為抑郁癥的發(fā)病機(jī)制與單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量下降或單胺類受體功能減弱密切相關(guān)。利血平可以通過(guò)阻礙神經(jīng)末梢內(nèi)囊泡對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)的攝取，使中樞5-羥色胺與去甲腎上腺素等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)耗竭，引起運(yùn)動(dòng)不能或者體溫降低等行為以及生理上改變[7-8]。本文作者制作小鼠動(dòng)物模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各給藥組小鼠與空白對(duì)照組相比，體溫變化有所減小。提示山楂葉提取物可以拮抗利血平所致的體溫下降情況，與抗抑郁機(jī)制有著一定聯(lián)系，然而其抗抑郁的作用機(jī)制仍需我們進(jìn)一步探討。

表3 山楂葉提取物對(duì)拮抗利血平降低小鼠體溫的影響（±s）

表3 山楂葉提取物對(duì)拮抗利血平降低小鼠體溫的影響（±s）

注：與正常對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 n 劑量（g/kg） 1 h體溫降低值（℃） 4 h體溫降低值（℃）山楂葉提取物高劑量組 10 1 1.38±0.53 5.14±0.07山楂葉提取物中劑量組 10 0.5 -0.09±0.04 4.07±0.13*山楂葉提取物低劑量組 10 0.25 1.14±0.09 3.55±1.21*百合皂苷組 10 0.05 1.20±0.11 3.94±0.09*氟西汀組 10 0.004 -0.07±0.02 3.21±0.04*空白對(duì)照組 10 等容積 0.22±0.08 5.68±1.27