劉玉琪， 楊俊柱

(1.合肥市第八中學(xué)，安徽 合肥 230071；2.安徽省化工研究院，安徽 合肥 230041)

引 言

噻蟲(chóng)胺化學(xué)名稱(chēng)(E)-1-(2-氯-1,3-噻唑-5-基甲基)-3-甲基-2-硝基胍(結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1),由拜耳公司和日本Takeda武田公司共同開(kāi)發(fā)，是一種活性高、具有內(nèi)吸活性、觸殺和胃毒作用的新煙堿類(lèi)廣譜殺蟲(chóng)劑。適用于葉面噴霧、土壤處理使用。對(duì)水稻稻飛虱、小麥蚜蟲(chóng)、番茄煙粉虱和韭菜韭蛆具有較高活性和較好防治效果[1]。

圖1 噻蟲(chóng)胺結(jié)構(gòu)式

有關(guān)噻蟲(chóng)胺的常量分析和殘留檢測(cè)主要涉及原藥、制劑和土壤、蔬菜等，大多采用液相色譜法[2-4]和液相色譜-質(zhì)譜法[5-6]，但均未涉及對(duì)噻蟲(chóng)胺及其異構(gòu)體的分析，而根據(jù)其結(jié)構(gòu)式可以看出，其存在E式和Z式兩種異構(gòu)體，且二者生物活性和藥效均不一樣，故分離并檢測(cè)其有效異構(gòu)體具有十分重要的意義。本文采用正相高效液相色譜法進(jìn)行分離和外標(biāo)法定量，具有簡(jiǎn)單、迅速、準(zhǔn)確度高、精密度好等特點(diǎn)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑及儀器

正己烷、四氫呋喃，色譜純；噻蟲(chóng)胺標(biāo)準(zhǔn)品物質(zhì)，≥98.5%，由國(guó)家農(nóng)藥質(zhì)檢中心(沈陽(yáng))提供。

安捷倫1 100液相色譜儀，具可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器；色譜工作站；微孔過(guò)濾器，0.45 μm有機(jī)濾膜；進(jìn)樣針：20 μL；超聲波清洗器。

1.2 液相色譜操作條件

色譜柱：SiO2, 200×4.6 mm(id)×5 μm不銹鋼柱；柱溫：35 ℃；流動(dòng)相：v(正己烷)∶v(四氫呋喃)=100∶4，經(jīng)濾膜過(guò)濾并超聲脫氣10 min；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：260 nm；進(jìn)樣量：5 μL；保留時(shí)間：噻蟲(chóng)胺6.9 min，噻蟲(chóng)胺Z體8.1 min(圖2、圖3)。

圖2 噻蟲(chóng)胺標(biāo)準(zhǔn)樣品HPLC譜圖

圖3 噻蟲(chóng)胺原藥HPLC譜圖

1.3 測(cè)定步驟

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

稱(chēng)取噻蟲(chóng)胺標(biāo)準(zhǔn)品0.04 g(準(zhǔn)確至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，超聲振蕩5 min，取出恢復(fù)至室溫，搖勻備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

稱(chēng)取含噻蟲(chóng)胺0.04 g(準(zhǔn)確至0.000 2 g)的試樣于50 mL容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，超聲振蕩5 min，取出恢復(fù)至室溫，搖勻，經(jīng)微孔過(guò)濾器過(guò)濾，濾液待用。

1.3.3 測(cè)定和計(jì)算

在上述操作條件下，待儀器基線(xiàn)穩(wěn)定后,連續(xù)進(jìn)數(shù)針標(biāo)準(zhǔn)溶液，待相鄰2針?lè)迕娣e變化小于1.2%后，按標(biāo)準(zhǔn)溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液的順序進(jìn)行液相色譜測(cè)定。

試樣中噻蟲(chóng)胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(X)按式(1)計(jì)算。

X=(A2×m1×P)/(A1×m2)

(1)

式中：A1為2針標(biāo)樣溶液中噻蟲(chóng)胺峰面積的平均值；A2為2針試樣溶液中噻蟲(chóng)胺峰面積的平均值；m1為噻蟲(chóng)胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量，g；m2為試樣的質(zhì)量，g；P為噻蟲(chóng)胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的優(yōu)化

對(duì)噻蟲(chóng)胺標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行200 nm～300 nm紫外掃描，其在260 nm左右吸收最大，且雜質(zhì)峰較小，噻蟲(chóng)胺及其異構(gòu)體和雜質(zhì)峰的分離度高，因此，設(shè)定檢測(cè)波長(zhǎng)為260 nm。

2.2 色譜柱的選擇

在分析過(guò)程中，選擇了反相色譜柱，甲醇、乙腈與水的混合溶液，改變各成分的配比，噻蟲(chóng)胺及其異構(gòu)體的分離效果均不理想，且分析時(shí)間較長(zhǎng)。因此，選用正相色譜柱。

2.3 流動(dòng)相的優(yōu)化

分析用v(正己烷)∶v(四氫呋喃)=100∶4為流動(dòng)相，流速為1.0 mL/min時(shí),出峰時(shí)間短,峰形對(duì)稱(chēng)、分離度高。

2.4 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

在選定的色譜操作條件下，對(duì)同一樣品平行測(cè)定5次，求得其標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.16；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.17%(見(jiàn)表1)。

2.5 添加回收率實(shí)驗(yàn)

取5份已知含量的噻蟲(chóng)胺試樣，分別加入一定量的噻蟲(chóng)胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，在相同色譜條件下進(jìn)行重復(fù)測(cè)定，測(cè)得其平均回收率為99.50%(見(jiàn)表2)。

表1 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

表2 添加回收率實(shí)驗(yàn)

2.6 線(xiàn)性相關(guān)實(shí)驗(yàn)

將10 mg/mL噻蟲(chóng)胺標(biāo)準(zhǔn)溶液用流動(dòng)相稀釋配得一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。按上述液相色譜條件測(cè)定，以噻蟲(chóng)胺標(biāo)準(zhǔn)溶液及其峰面積作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得到線(xiàn)性回歸方程：y=166.86x-3.8811，相關(guān)系數(shù)：r2=0.999 4(見(jiàn)表3)。

表3 線(xiàn)性相關(guān)試驗(yàn)

3 結(jié)語(yǔ)

本方法重復(fù)性好、準(zhǔn)確度高、線(xiàn)性關(guān)系良好，能很好地用于噻蟲(chóng)胺原藥及其制劑的定量分析。